丘脑束旁核-纹状体神经元轴突终末的超微结构证实

目的研究丘脑束旁核(PFn)-纹状体神经元轴突终末的分布和超微结构特征,以及与纹状体神经元之间的形态学联系。方法借助于神经示踪剂BDA10K注射方法顺行标记PFn神经元,光镜和电镜下观察和计数阳性纤维在纹状体内的数量和分布形式以及超微结构特征,实验资料借助于SPSS软件统计处理分析和体视学观察。结果①PFn神经元轴突终末在纹状体内呈散在不均匀分布;背侧区显著多于腹侧区(P<0.001),而外侧区与内侧区之间差异无统计学意义(P=0.387)。②光镜高倍镜观察显示大量的BDA阳性纤维与纹状体不同类型神经元(包括NeuN阳性、Darpp-32阳性以及Parv阳性神经元)的胞体和突起在形态学上存在明显的相邻关系。③电镜观察和测量结果显示BDA阳性终末平均直径为(0.648±0.288)μm,同时发现它们与纹状体神经元之间主要形成兴奋性(非对称型)突触连接;阳性轴突终末的65.18%与树突形成兴奋性突触,其直径为(0.651±0.304)μm;剩余的34.82%[平均直径为(0.642±0.257)μm]与树突棘形成兴奋性突触连接。结论丘脑PFn-纹状体神经元轴突终末主要分布于纹状体的背侧区,并与纹状体不同类型的神经元显示相邻关系,电镜超微结构下证实其突触形式主要为轴-树兴奋性突触连接,结果提示丘脑PFn神经元对纹状体不同类型的神经元的影响可能具有选择性和特异性。     

CEPO对6-OHDA诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的探讨氨甲酰化促红细胞生成素(CEPO)对6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)诱导PC12细胞损伤及凋亡的保护作用及其可能机制。方法借助CCK8、流式细胞(Flow cytometry,FCM)、Western-blotting和逆转录PCR(RT-PCR)技术检测PC12模型细胞相关指标的变化,实验数据以SPSS15软件统计分析。结果 CCK8结果显示6-O-HDA处理能够显著降低PC12模型细胞的存活率,而CEPO处理对其变化显示抑制作用;FCM技术探察结果显示,6-OHDA处理能够明显诱导PC12模型细胞的损伤与凋亡,而CEPO预处理能够减轻PC12模型细胞的损伤与凋亡(P<0.05);借助Western-blotting技术探察显示6-OHDA+CEPO处理组的PC12细胞的Cleaved caspase-3蛋白表达量显著低于6-OHDA处理组(P<0.05);RT-PCR结果显示,6-OHDA处理明显降低PC12模型细胞的Bcl-2 mRNA的表达(P<0.05)以及上调PC12模型细胞的Bax mRNA的表达(P<0.01),而CEPO处理明显上调Bcl-2 mRNA的表达水平(P<0.05)以及抑制Bax mRNA的表达(P<0.05)。结论CEPO处理能够显著抑制6-OHDA所诱导的PC12细胞的损伤及凋亡,其作用机制可能与其上调Bcl-2,并下调Bax和Caspase-3的表达有关。     

利用神经通路示踪方法证实大鼠纹状体神经元的连接

Using neural pathway tracing and immunohistochemical technique, the striato-direct pathway (BDA3 kDa injected into the rat lateral globus pallidus) and striato-indirect pathway (BDA3 kDa injected into the substantia nigra pars reticulata) neurons were specifically labeled, and then subjected to double-labeled immunohistochemistry for mu-OPIOID Receptor (specifically-labeled striatal patch compartment), D1, and D2, respectively. The experimental findings showed that there are no statistically significant differences in the soma diameter and the number of primary dendrites between the striato-direct (substantia nigra pars reticularis) and indirect (globus pallidum externum) neurons labeled retrograde by BDA3 kDa. In addition, these two kinds of projection neurons revealed no obvious coexistence. This evidence indicates that as a highly sensitive neural pathway tracer, BDA could yield reliably and exquisitely detailed labeling of target neurons and synaptic structures. The variance of the morphologic structures and the localization of neurons were not statistically significant between the striato-substantia nigra pars reticularis and the globus pallidum externum projection neurons. Mesencephalic and thalamic neurons correlated with striatal neurons in morphology. Especially the latter which make typical excitatory synaptic contacts with striato-direct and -indirect neurons. Thus, this evidence suggests that thalamic neurons may extensively excite striatal neurons.     

联合阴道哑铃锥训练改善产后盆底肌张力的研究

目的 证实Kegel联合阴道哑铃锥训练方法对产后盆底肌康复的临床效果.方法 借助PHENIX盆底肌康复检测仪检测300例产后妇女分别通过传统Kegel康复训练和Kegel联合阴道哑铃锥康复训练对盆底肌张力和产后性功能恢复的效果.对问卷调查资料和仪器检测数据进行评分和分度,并借助SPSS11.1软件对数据进行统计分析.结...     

DHM对3-NP诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的研究二氢杨梅素（DHM）对3．硝基丙酸（3-nitropropionic acid,3-NP）诱导的PCI2细胞损伤的保护作用及可能机制。方法M啊法测定细胞存活率,TBA（硫代巴比妥酸）法检测丙二醛（MDA）含量,WST-1（水溶性四唑盐）法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性,实验数据采用SPSS17．0软件统计分析。结果①MTr结果显示3-NP处理能显著降低Pcl2细胞的存活率,而DHM预处理对此变化有抑制作用;②MDA测定结果显示3-NP处理能显著增加PCI2细胞的MDA含量（P〈0．05）,而与3-NP处理组相比,3-NP＋DHM组PCI2细胞的MDA含量显著降低（P〈0．05）,接近对照组水平（P〉0．05）;③SOD测定结果显示,与对照组比较,3-NP处理显著降低了PCI2细胞SOD的活性（P〈0．05）,而3-NP＋DHM组PCI2细胞SOD的活性较3-NP组有显著提高（P〈0．05）,接近对照组水平（P〉O．05）。结论②DHM预处理能拮抗3-NP诱导的PCI2细胞的损伤,其机制可能与降低细胞内脂质过氧化水平,提高抗氧化酶的活性有关。     

3-NP诱导大鼠纹状体损伤的组织病理学证实

目的探察证实3-NP对实验大鼠纹状体的损害作用。方法实验借助行为学探测、经典组化和免疫组化染色技术对大鼠运动行为学和纹状体组织病理学变化进行形态学探察,实验数据采用SPSS软件统计学处理。结果①运动行为学探测显示大鼠过平衡木的启动延搁时间和完成全过程时间明显延长(P0.05,P0.05),以及前爪滑落次数与3-NP处理之前比较具有统计学差异(P0.05),其抓握时间也明显比3-NP处理之前延长(P0.05)。②组织学探察显示,多种组化染色均在实验大鼠纹状体的背外侧区恒定出现一块明显的坏死灶,发生率为80%。坏死区及其周边区绝大部分神经元发生丢失,仅有少数体积较大的细胞幸存。Golgi染色显示在周边区幸存神经元的树突发生明显断裂和弯曲。酶组化显示病灶区SDH明显淡染,周边区可见一些强反应的细胞。③神经元特异性抗体探察显示坏死灶及其周边区神经元丢失严重,纹状体投射神经元的丢失更显著。对神经元死亡和损伤性质的进一步鉴定结果显示在坏死灶及其周边区均可见大量凋亡细胞。结论 3-NP特异性地诱导纹状体背外侧区神经元损伤,纹状体不同类型神经元对3-NP损伤显示不同的敏感性,凋亡和能量代谢障碍因素牵涉到此病理过程。     

大鼠纹状体Patch和Matrix间区及其神经元形态学特征的观察

【目的】纹状体Patch和Matrix间区被证实与神经精神活动和躯体运动有关。本实验旨在探测Patch和Matrix间区及其神经元的形态学特征,为研究纹状体-Patch和-Matrix神经元的通路联系提供资料。【方法】成年雄性SD大鼠分别按照常规和电镜要求灌注固定、取脑和后固定;半导体或振动切片之后进行免疫组化PAP方法单标记和双标记;光镜下分别用Photoshop软件测量Patch和Matrix间区的面积并计算百分比;光镜和电镜下观察阳性神经元的结构;实验数据用SPSS软件统计处理。【结果】①Mor阳性的Patch间区呈不规则形的斑块状散在分布于纹状体,在胼胝体深方存在一条恒定的阳性带状区。Patch间区占纹状体面积的9%,其面积在纹状体的头侧明显大于尾侧（P〈0.05）。阳性结构呈细丝或絮状,阳性胞体不明显。②Calb阳性的Matrix间区在纹状体内侧区染色较深,可见明显不规则的淡染色区,其形状与相邻片的Patch间区一致。Matrix间区的面积明显大于Patch间区（P〈0.05）。可见阳性树突和树突棘,但阳性胞体不明显。③电镜下分别可见Mor和Calb阳性树突和树突棘,其大多数接受兴奋性突触连接,而与阳性树突形成的突触多为穿孔型。抑制性突触少见,阳性胞体不明显。【结论】头侧纹状体密集分布的Patch间区、内侧纹状体Calb强烈反应,和阳性标记的树突、树突棘以及兴奋性突触为主的形态学特征,提示Mor和Calb阳性神经元分别具有特异性的神经通路连接和生理机能。     

大鼠纹状体Patch和Matrix间区及其神经元 形态学特征的观察

 【目的】 纹状体Patch和Matrix间区被证实与神经精神活动和躯体运动有关&#65377;本实验旨在探测Patch和Matrix 间区及其神经元的形态学特征,为研究纹状体-Patch和-Matrix神经元的通路联系提供资料&#65377;【方法】 成年雄性SD大鼠分别按照常规和电镜要求灌注固定&#65380;取脑和后固定;半导体或振动切片之后进行免疫组化PAP方法单标记和双标记;光镜下分别用Photoshop软件测量Patch和Matrix间区的面积并计算百分比;光镜和电镜下观察阳性神经元的结构;实验数据用SPSS软件统计处理&#65377; 【结果】 ① Mor阳性的Patch间区呈不规则形的斑块状散在分布于纹状体,在胼胝体深方存在一条恒定的阳性带状区&#65377;Patch间区占纹状体面积的9%,其面积在纹状体的头侧明显大于尾侧(P < 0.05)&#65377;阳性结构呈细丝或絮状,阳性胞体不明显&#65377;② Calb阳性的Matrix间区在纹状体内侧区染色较深,可见明显不规则的淡染色区,其形状与相邻片的Patch间区一致&#65377;Matrix间区的面积明显大于Patch间区(P < 0.05)&#65377;可见阳性树突和树突棘,但阳性胞体不明显&#65377;③ 电镜下分别可见Mor 和Calb阳性树突和树突棘,其大多数接受兴奋性突触连接,而与阳性树突形成的突触多为穿孔型&#65377;抑制性突触少见,阳性胞体不明显&#65377;【结论】 头侧纹状体密集分布的Patch间区&#65380;内侧纹状体Calb强烈反应,和阳性标记的树突&#65380;树突棘以及兴奋性突触为主的形态学特征,提示Mor和Calb阳性神经元分别具有特异性的神经通路连接和生理机能&#65377;     

大鼠Parv中间神经元形态学特征及其在纹状体 分布规律的探察

 【目的】 纹状体Parv中间神经元被认为是连接纹状体传入和传出神经元之间的枢纽&;#65377;本实验旨在观察证实纹状体Parv神经元胞体&;#65380;树突和轴突的形态学特征和在纹状体的分布及其与纹状体不同区域之间的关系&;#65377; 【方法】 对成年雄性SD大鼠常规灌注固定和取脑;半导体冰冻切片之后进行免疫组化PAP方法单标记和双标记;光镜观察阳性神经元的形态并进行计数和计算其百分比;应用SPSS软件统计处理&;#65377; 【结果】 Parv阳性神经元在纹状体呈现散在不均匀分布,在纹状体背外侧区的分布多于其它区域(P < 0.001);Parv阳性神经元在Matrix间区分布的百分比显著高于Patch间区(82.0%比18.0%,P < 0.001);纹状体Parv阳性细胞为典型的中等大小的中间神经元(平均直径11.68 μm),胞体呈多边形或卵圆形,外侧区胞体直径大于内侧区(P < 0.01);阳性神经元树突密集,表面光滑和未见树突棘;神经元轴突细长,在纹状体可见其分支&;#65377; 【结论】 Parv阳性中间神经元在纹状体背外侧区的密集分布&;#65380;高百分比聚集于Matrix间区和典型的中间神经元特征,提示其可能对纹状体不同区域的投射神经元具有选择性和特异性作用&;#65377;     

BDA神经示踪研究证实大鼠纹状体神经通路连接

目的 为了观察证实纹状体神经元的形态定位和突触连接,以及由此证实神经示踪技术在此领域的实用性和有效性.方法 实验借助示踪剂立体定位注射,并结合免疫组化和免疫电镜超微结构技术,实验数据以SPSS10.0软件统计处理.结果 (1)神经示踪剂BDA显示较好的定向运送特性,具有敏感和理想的标记效果.借助示踪剂BDA注射的逆行单标记实验结果显示纹状体-SNr和-GPe两类投射神经元的胞体大小和分支数量无明显的形态学差异,在免疫电镜下明显可见阳性树突和树突棘及其所形成的兴奋性突触连接.光镜下可见BDA顺行标记的PFn神经元的轴突终末密集分布于纹状体,并在电镜下清晰可见这些阳性终末与纹状体神经元之间的突触连接.(2)神经示踪结合免疫组化双标记显示纹状体-SNr和-GPe神经元均较少定位于Patch间区,而且均与纹状体Parv中间神经元之间无明显定性关系,但可见中脑TH阳性纤维的密集分布.在电镜超微结构水平可见BDA顺行标记的PFn阳性终末分别与纹状体-直接通路和纹状体-间接通路神经元形成典型的兴奋性突触连接,但与两者之间,及其所属的树突和树突棘之间的突触连接百分率均没有明显的统计学差异(P>0.05,P>0.05).(3)荧光双标记结果显示BDA标记的PFn阳性终末和VGlut2抗体的免疫标记的背侧丘脑-纹状体阳性终末,在纹状体内呈现95.4%的共存率,而且后者标记更充分.同时也证实纹状体-SNr和-GPe两类投射神经元相互之间不显示可见的共存关系.结论 BDA为高度敏感的神经示踪剂,能够较为方便和充分地标记目的 神经元和突触结构.纹状体-SNr和-GPe两类投射神经元的形态结构、分布形式无明显的差异.中脑和背侧丘脑神经元均与纹状体神经元之间存在形态学联系,尤其是背侧丘脑神经元与纹状体-直接通路和纹状体-间接通路神经元之间形成典型的兴奋性突触连接,提示其对纹状体神经元可能具有广泛的兴奋作用.