HIV精英控制者免疫机制分析及对疫苗研发的意义

感染人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)后的疾病进程一般从急性感染最终发展为艾滋病(acquired immune deficiency syndrome,AIDS),而这一过程的长短取决于病毒和宿主两个方面的因素.在未进行抗病毒治疗(antiretroviral therapy,ART)的情况下,小部分感染个体会呈现自发的、持续性的对病毒复制的控制和(或)疾病不发生进展的情况,在过去的20年内,世界多处研究中心和医疗机构报道了这一特殊现象的存在,同时,一系列的概念被用来对这些感染者进行分类和定义.     

靶向CD4基因的microRNA表达载体构建及其功能研究

目的 用分子克隆方法构建靶基因为CD4的microRNA的GFP报告载体,并观察其对MT4细胞CD4分子表达的影响.方法 在microRNA在线预测软件中寻找靶基因为CD4的microRNA.设计hsa-mir-181a基因引物,PCR后将产物与T载体连接,双酶切后与pEGFP-N1载体连接.用菌液PCR及测序鉴定正确连接入pEGFP-N1载体.测序正确后电转染MT4细胞系.用荧光定量PCR检测microRNA表达,流式分析检测CD4分子表达.结果 hsa-mir-181a为靶基因为CD4的microRNA.所构建载体测序结果证明连接产物正确.转染细胞后建靶基因为CD4的microRNA稳定表达,并能够使MT4细胞CD4表达下调.结论 表达靶基因为CD4的microRNA的GFP报告基因表达载体构建成功,并且能够抑制CD4分子的表达.本研究为microRNA成为潜在的抗HIV基因治疗工具提供了体外实验的依据.