Sox2- R9- EGFP融合蛋白的表达及穿膜能力鉴定

构建、表达、纯化、鉴定Sox2- R9 - EGFP融合蛋白,验证其在体外培养的成纤维细胞中的转导活性.以胎猪原始生殖嵴为材料提取总RNA,反转录成cDNA第一链,设计带9聚精氨酸(R9)的特定引物,从cDNA中扩增出猪Sox2基因,克隆到pET- 28a- EGFP载体中,经酶切和测序鉴定后,重组质粒转化大肠杆菌BL...     

鱼腥草注射液抗内毒素性心肌损伤作用的实验研究

目的:揭示鱼腥草注射液抗内毒素诱导的心肌损伤作用的机制。方法:取SD雄性大鼠24只随机分成正常对照组(NC组,n=6),内毒素组(ET组,n=6),鱼腥草注射液+内毒素组(HHI+ET组,n=6)和单纯鱼腥草注射液组(HHI组,n=6),在Langendorff装置上用Krebs-Henseleit(KH)液对大鼠离体心脏行主动脉逆灌。在相应时点以HR、LVSP、LVEDP、LVDP、+dp/dt_max、-dp/dt_max等6项参数为指标,测定冠脉流出液中的超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及心肌组织一氧化氮(NO)含量、琥珀酸脱氢酶(SDH)活性。结果:与ET组相比,HHI+ET组在相应时点,左心室压差与心率乘积(LVSP-LVEDP)×HR、LVDP、+dp/dt_max恢复百分率明显改善,对内毒素诱导的心肌SOD、SDH活性的降低和MDA、NO含量的升高有明显抑制作用。结论:鱼腥草注射液具有明显的抗内毒素心肌损伤作用,通过降低心肌中NO的量,增强心肌的抗氧化能力,稳定心肌酶活性和膜相结构等途径,提高心肌对内毒素性损伤的抵抗力。     

骨髓间充质干细胞移植在卵巢早衰小鼠卵巢及生育功能重建中的作用

目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植在卵巢早衰小鼠卵巢及生育功能重建中的作用.方法 一次性腹腔注射环磷酰胺和白消安建立卵巢早衰小鼠模型,将实验动物分为建模组、移植组和空白对照组.建模后14 d,将绿色荧光蛋白(GFP)转基因小鼠的BMSCs经尾静脉注射至移植组小鼠体内,取等量生理盐水经尾静脉注射至建模组和空白对照组小鼠体内.建模后14 d及BMSCs移植2个月检测各组血清卵泡刺激素(FSH)和雌二醇(E2)水平,BMSCs移植2个月观察BMSCs在卵巢组织的定位及卵巢颗粒细胞凋亡情况,记录各组超促排卵后的获卵数、受精率、卵裂率、囊胚形成率,以及与雄性小鼠合笼后妊娠及生育子代数量.结果 BMSCs移植后2个月,移植组卵巢间质内可见大量绿色荧光细胞和标记的BMSCs,但并不表达FSH受体;FSH水平和颗粒细胞凋亡指数显著低于建模组(P＜0.05),E2水平及获卵数及受精率、卵裂率、囊胚形成率均显著高于建模组(P＜0.05),但各项指标仍显著低于空白对照组(P＜0.05);建模组无小鼠妊娠,移植组中2只小鼠妊娠,分别生育外观正常仔鼠4、2只.结论 BMSCs可定位于卵巢间质,显著降低卵巢颗粒细胞凋亡指数,改善卵巢内分泌功能,提高小鼠生育能力.     

利多卡因对油酸性肺损伤的防治作用

目的 探讨利多卡因对油酸(oleic acid)性肺损伤的防治作用。方法 36只家兔随机分为对照组、油酸组和利多卡因(Lidocaine)加油酸组。分别检测血清中丙二醛(MDA)、支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白与MDA的含量。结果 于静注油酸后1、2h利多卡因组血清和BMLF中MDA、蛋白的含量、肺湿/干比值均显著低于油酸组。结论 利多卡因对油酸性肺损伤有防治作用。     

拮抗剂方案单胚胎移植临床结局分析

目的:探讨拮抗剂方案单胚胎移植的临床应用价值。方法:回顾性队列研究分析2017年1月至2021年3月期间在中国人民解放军联勤保障部队第901医院生殖医学中心行拮抗剂方案体外受精/卵胞质内单精子注射（ in vitro fertilization/intracytoplasmic sperm injectio...     

胞外囊泡分离提取方法的研究进展

胞外囊泡(EVs)是由多种类型细胞释放的微小囊泡。目前研究认为EVs是细胞间信息传递的重要介质,可通过传递蛋白质、信使RNA(m RNA)、微小RNA(micro RNA,mi RNA)等改变靶细胞的基因表达、蛋白质合成等生物学功能,在组织修复、生物标记、疾病诊断等方面均发挥着越来越重要的作用。目前,分离提取EVs的主要方法有:差速离心法、超滤法和免疫亲和层析法,各有优缺点。在实际工作中,研究者常将多种分离提取方法联合应用以提高产物纯度,稳定EVs生物活性,减少提取时间。近年发现,在卵泡液和精液中存在EVs,其生物学意义及潜在的临床价值有待于进一步研究。本文介绍EVs提取方法的研究进展,为EVs的研究提供参考。     

内源性一氧化碳与心肌缺血再灌注损伤

20世纪 80年代NO研究的热潮 ,引起了人们对CO的关注。 1989年有人发现CO有与NO类似的内皮依赖性血管舒张作用 ,但并未引起关注。1993年Verma、Maines等提出CO像NO一样可通过激活可溶性鸟苷酸环化酶 (sGC)发挥其生理功能[1] 。研究证明 ,内源性CO (carbonmonoxide ,CO)也是机体内一种重要的化学气体信使分子 ,调节着神经、呼吸、心血管和免疫等几乎所有系统的多种生理功能 ,其作用可以和著名的NO相媲美。本文将其与心肌缺血再灌注损伤之间的关系作一简要综述。1　CO的内生性来源机体功能性CO的主要来源是血红素氧合酶(hemeoxygena…     

间充质干细胞来源微囊泡对卵巢颗粒细胞的作用

目的探讨间充质干细胞来源微囊泡(MVs)对卵巢颗粒细胞的作用。方法取传代第8代(P8)前的人脐带间充质干细胞进行无血清培养,超速离心结合蔗糖密度梯度离心法从培养液上清中分离纯化MVs,透射电镜形态学观察,Bradford法蛋白定量。将PKH26标记的不同浓度MVs(0、10、15、20、25μg/ml)与3周龄雌性SD大鼠卵巢颗粒细胞共培养,3h后荧光显微镜观察颗粒细胞对MVs的内化作用;48h检测培养细胞周期各时相的变化及培养液上清中E2浓度。结果随培养时间的延长,MVs释放量显著增加,8×105个细胞大约释放10μg左右的MVs,电镜下MVs呈圆形或椭圆形,直径介于30~1 000nm之间,中间为低电子密度区。与MVs共培养3h后,颗粒细胞胞浆中可见呈红色荧光信号的MVs;不同浓度的MVs均可显著增加颗粒细胞的增殖指数(PI)、S期细胞比率(SPF)及E2水平,且呈先上升后下降趋势(P0.05)。结论MVs能够被颗粒细胞摄取;人脐带间充质干细胞来源的MVs能够促进颗粒细胞增殖及分泌E2功能。     

ROC曲线评估hCG日P、E2水平和E2/P对IVF-ET结局的预测价值

目的:探讨人绒毛膜促性腺激素(h CG)注射日血清孕酮(P)、雌二醇(E2)水平和E2/P对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)临床结局的预测价值。方法:回顾性分析2008年1月~2012年9月在解放军105医院生殖中心接受IVF-ET治疗的不育患者共722个周期的临床资料,采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)评估h CG日血清P、E2水平和E2/P对IVF-ET结局的预测价值,确定其临界值及最佳预测指标。结果:h CG日血清P水平和E2/P预测妊娠的曲线下面积(AUC)分别为0.72和0.64,均显著大于机会参考线下面积(P<0.05),对妊娠有预测价值,最佳临界值分别为2.01和1.13 ng/ml,敏感度分别为0.66和0.57,特异度分别为0.75和0.67,其中后者的AUC显著大于前者(P<0.05);血清E2的AUC为0.54±0.02,与机会参考线下面积比较差异无统计学意义(P>0.05)。血清P、E2水平及E2/P预测流产的AUC分别为0.67、0.68、0.76,最佳临界值分别为1.59 ng/ml、3 022.42和2.02 pg/ml,均显著大于机会参考线下面积(P<0.05),对流产具有预测价值,其中E2/P对流产预测价值最高。结论:h CG注射日血清P水平对妊娠预测价值最高,E2/P对流产预测价值最高,两者可作为预测IVF-ET结局的参考指标。     

早期补救卵胞浆内单精子注射在常规体外受精不受精或低受精周期中的应用

常规体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)周期中,卵母细胞受精低下或不受精的发生率约为10％～20％[1].补救性卵胞浆内单精子注射(rescue intracytoplasmic sperm injection,rescue ICSI)作为受精失败的一种补救措施已在许多生殖中心实施,早期多行晚期补救,一般在受精后16～20 h观察原核形成情况,如未见原核形成则通过ICSI再次受精.