小鼠铁调素1功能肽Hepc25的表达及纯化

目的 利用原核生物表达载体表达小鼠铁调素功能肽Hepc25,并对其进行纯化。方法 选取编码25aa的Hepc25基因与硫氧还蛋白基因融合后在大肠杆菌中大规模诱导表达该融合蛋白,以RT-PCR法扩增小鼠Hepcidin1功能肽基因Hepc25,将目的基因克隆到原核表达载体pET-32a(+)中获得pET-32a-Hepc25,再以pET-32a-Hepc25转化大肠杆菌BL21表达融合蛋白,收集菌体蛋白,用Western blotting和SDS-PAGE法检测融合蛋白,优化融合蛋白高表达条件。 依次利用亲和层析、离子交换层析和凝胶排阻层析法纯化融合蛋白,融合蛋白经肠激酶酶切、高效液相色谱法（HPLC）分离纯化获得了目的蛋白Hepc25。结果 成功构建了小鼠pET-32a-Hepc25融合蛋白表达载体,融合蛋白表达量约占大肠杆菌BL21总蛋白量的28%,融合蛋白在33℃、120r/min 、终浓度为0.2mmol/L 的异丙基-β-D硫化半乳庶糖（IPTG）诱导8h的条件下表达量最高,融合蛋白纯度达95%。融合蛋白经过色谱分离、酶切和HPLC分析,目的蛋白的纯度也达95%以上。结论 利用原核生物表达载体成功表达并纯化了小鼠铁调素功能肽Hepc25,并筛选出了高表达的优化条件。     

大豆异黄酮与疾病防治研究进展

近年来对大豆生物化学的研究表明，大豆异黄酮（Soybean Isoflavone，SIF）具有抗氧化、消除自由基、抗癌、预防心血管疾病、预防骨质疏松、改善妇女更年期综合症等生理功能。为了更进一步的研究认识SIF在药理学方面的作用，本文就SIF的特性、功能尤其在疾病防治的机理方面进行综述。