浅谈淀粉样变性肾病的染色方法体会

目的探讨淀粉样变性肾病的染色方法及体会。方法对15例淀粉样变性肾病患者的活检标本进行常规染色、刚果红、高锰酸钾氧化刚果红染色后以偏振光显微镜观察,同时予以免疫荧光、免疫组化染色,使用透视电镜观察,分析淀粉样变性肾病的染色方法及效果。结果 15例标本可见淀粉样蛋白沉积区HE呈均质、淡染的嗜伊红状,PASM染色呈毛刷样结构,刚果红染色呈砖红色、偏振光下呈青绿色。免疫组化染色中AA染色均为阴性,κ染色显示14例为阴性,λ染色显示14例为阳性。电镜下观察有纤维状结构且排列紊乱。结论对淀粉样变性肾病需采用多种染色方法结合效果较好,使用碱性刚果红染色较为便利使用,使用免疫组化染色后透视电镜观察有助于发现早期不典型病变。     

提高骨髓石蜡切片质量的几点体会

随着血液学的高速发展,近年来骨髓活检也越来越多地应用于临床.骨髓活检组织制片也是科研和临床病理经常遇到的重要技术问题.现在大多数单位都采用石蜡切片技术制作骨髓活检组织,但因骨髓组织富含钙盐及含有一定量的脂肪,按常规技术制作,常出现组织切片不完整、结构破坏、染色模糊不清,不利于诊断.另外石蜡制片的程序繁多,任何一个环节出现问题,均可影响切片的质量,而直接影响病理报道的准确性.     

免疫组化染色结果分析

目的探讨免疫组化染色过程中存在的问题及对策。方法收集我院2003年3月～2006年5月ABC法染色的手术切除标本1500例,对存在问题的80例标本进行分析并提出相应对策。结果ABC法染色手术切除标本1500例中,存在问题的80例(5.3%)按染色结果分为:无色片(即无阳性信号)11例(13.7%);"杂音"染色片(有阳性信号)69例(86.2%),其中,全片着色12例(17.3%)、切片边缘着色23例(33.3%)、"阴阳脸"着色9例(13.0%)、灶片状着色17例(24.6%)、间质着色4例(5.7%)、细胞浆着色1例(1.4%)、细胞核着色3例(4.3%)。结论每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果,避免染色过程中出现的问题可提高免疫组化染色的质量。     

MMP-9、CD34表达与胃癌的关系

目的:探讨基质金属蛋白酶9(matrix metallopro-teinase-9,MMP-9)表达和癌间质微血管密度(MVD)与胃癌临床病理的关系.方法:采用免疫组化S-P法,检测45例胃癌手术标本中MMP-9,CD34表达,用CD34标记血管内皮细胞并计算微血管密度MVD值.结果:正常胃黏膜组织MVD(12.16±9.38)个,明显低于胃癌组织MVD(28.68±10.25)个(t=2.123,P<0.05);胃癌原发灶CD34、MMP-9阳性率(67.39%、82.61%)明显高于癌旁10.0 cm(8.70%、10.87%)(x2=6.68,x2=6.78,P<0.01);CD34、MMP-9在胃癌中表达与组织学类型、侵及范围、淋巴结转移以及Duekes分期差异有统计学意义(P均<0.05).结论:联合检测MMP-9,CD34表达可作为判断胃癌生物学行为和预后的重要指标.     

miR-138靶向调控SIRT1表达及其对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨微小RNA-138（miRNA-138）在膀胱癌细胞中的表达情况,并研究其对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响及其可能的靶基因。方法 采用实时定量PCR（QPCR）法检测膀胱癌细胞T24和正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中miR-138的表达水平。将T24细胞分为3组：未转染组、miR-138对照组（转染阴性对照片段）和miR-138转染组（转染miR-138 mimics）。采用MTT法检测细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞的凋亡情况;Western blotting检测细胞中沉默信息调节因子1（SIRT1）蛋白的表达水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-138与SIRT1间的靶向关系。结果 膀胱癌T24细胞中miR-138的表达量为0.57±0.19,低于SV-HUC-1细胞的1.00±0.26（P＜0.05）。miR-138转染组的miR-138表达量为2.59±0.67,高于未转染组的1.00±0.36和miR-138对照组的1.08±0.49（P＜0.05）。miR-138转染组T24细胞的增殖率显著低于未转染组和miR-138对照组（P＜0.05）。 转染48 h后,miR-138转染组的细胞凋亡率为（29.8±1.9）％,高于未转染组的（5.8±1.2）％和miR-138对照组的（7.7±0.9）％（P＜0.05）。miR-138转染组SIRT1的相对表达量为0.59±0.22,低于未转染组的1.00±0.35和miR-138对照组的1.20±0.42（P＜0.05）。双荧光素酶报告基因实验证明SIRT1是miR-138的直接作用靶点。结论 miR-138在膀胱癌细胞中低表达,可能通过靶向SIRT1调控膀胱癌细胞的增殖和凋亡。     

缺氧诱导因子-1α和血管内皮因子在卵巢癌中的表达及其临床意义

探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在卵巢癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测HIF-1α和VEGF在10例良性卵巢肿瘤、20例交界性上皮性卵巢肿瘤和64例上皮性卵巢癌组织中的表达。结果HIF-1α在良性卵巢肿瘤、交界性上皮性卵巢肿瘤和上皮性卵巢癌中阳性表达率分别为40%、60%、92.2%,差异有统计学意义(P<0.05);HIF-1α在卵巢癌组织中表达和临床分期、淋巴结转移成正相关,差异有统计学意义(P<0.05)。VEGF在卵巢癌组织中表达和临床分期、淋巴结转移、病理分型成正相关,差异有统计学意义(P<0.05)。卵巢癌组织中HIF-1α表达和VEGF表达之间成正相关(P<0.05)。结论HIF-1α和VEGF在卵巢癌的发生发展和淋巴转移中起重要作用,可能成为卵巢癌治疗和判断预后的可靠指标之一。HIF-1α通过上调VEGF的表达,刺激微血管形成,促进卵巢癌的浸润和转移。     

液基薄层细胞学检测对宫颈病变的诊断价值

目的探讨液基薄层细胞学检测（TCT）技术对宫颈癌前病变的诊断价值。方法收集宫颈病变患者1000倒,分别应用TCT（500例）检查及传统巴氏涂片（500例）检查。结果TCT法满意490例（98．0％）,高于传统涂片法的440例（88．0％）（χ^2=3．987,P〈0．05）;传统涂片法检查IIB～V级阳性50例（10．0％）低于TCT法的85例（17．1％）（χ^2=3．923,P〈0．05）;TCT检查与病理活检的阳性符合率64．7％,明显高于传统涂片法的44．0％（χ^2=3．893,P〈0．05）。结论TCT技术明显提高了标本的满意率及宫颈异常细胞检出率,并且与组织病理活检有较高的阳性符合率,适合于临床推广应用。     

良恶性甲状腺肿瘤组织中层粘连蛋白的表达及意义

目的比较层粘连蛋白（LN）在良恶性甲状腺肿瘤的表达及其意义。方法采用免疫组化方法检测12例甲状腺正常组织和38例甲状腺腺瘤、20例甲状腺癌组织中LN的表达，对LN表达率作两两比较。结果LN在甲状腺腺瘤与甲状腺癌组织中阳性表达率差异有显著意义（P〈0．05）；在甲状腺癌组织中与甲状腺正常组织中的阳性表达率差异有非常显著意义（P〈0．01）。LN在甲状腺癌细胞及出现于甲状腺滤泡性腺瘤组织中的乳头状腺瘤细胞胞浆中有表达。结论LN参与了肿瘤的发生发展，可作为甲状腺良恶性肿瘤的鉴别诊断指标之一。LN免疫反应物出现于肿瘤细胞胞浆很可能是良性肿瘤转化为癌的标志。     

Survivin在原发性肝癌组织中的表达

目的 探讨原发性肝癌组织中Survivin的表达与临床病理特征的相互关系。方法 用ABC免疫组化法测定50例原发性肝癌组织及癌旁组织中Survivin的表达水平。结果 50例原发性肝癌组织中Survivin的阳性表达率62．0％明显高于癌旁组织中Sunrivin 14．O％的阳性表达率（P＜0．05）；Survivin的表达情况与原发性肝癌组织的分化程度、肿瘤有无转移、肿块直径、门静脉、肝静脉癌栓关系密切（P＜0．05）。结论 Survivin的表达可能与原发性肝癌的发生、发展密切相关。     

骨髓活检标本脱钙及除酸方法的改良

许多单位都采用石蜡切片技术制作骨髓活检组织切片,因骨髓组织富含钙盐,所以制片前一定要先脱钙。过去我们一直用14%硝酸脱钙液脱钙,脱钙后流水冲洗,但此法制作组织切片时常出现组织切片破碎、组织形态和细胞结构严重