超氧化物歧化酶脂质体治疗大鼠实验性结肠炎的研究

溃疡性结肠炎 (UC) ,是病因未明的慢性非特异性肠道炎症性疾病 ,常迁延不愈 ,反复发作 ,严重影响患者的正常工作和生活。因此 ,探索各种治疗方法显得日趋重要。据文献报道 ,重要的炎症介质如氧自由基 (OFR)、一氧化氮 (NO)及其代谢产物过量生成 ,在 UC和实验性结肠炎的发生、发展过程中起着重要作用 [1,2 ]。有学者应用超氧化物歧化酶 (SOD)脂质体治疗 UC和克隆病 (CD) [3,4 ] ,取得了良效 ,但这些研究是非对照性的。本实验进行对照研究 ,观察SOD脂质体对大鼠实验性结肠炎的疗效 ,并同 5 -氨基水杨酸 (5 - ASA)进行对比 ,试图为临…     

人骨髓多能成体祖细胞的分离培养及向肝细胞样细胞分化的研究

目的 培养人骨髓多能成体祖细胞(multipotent adult progenitor cells,MAPCs)并研究其向肝细胞样细胞的分化。方法 应用体外细胞培养技术将人骨髓中的单个核细胞从无血液疾病患者的髂嵴骨髓中分离出来后，用磁式细胞分离仪分离富集骨髓单个核细胞中的CD45^-HIA—DR^-细胞，把其接种于DMEM培养基中进行培养，到达对数生长期时，加入成纤维细胞生长因子4(fibroblast growth factor-4，FGF—4)并改用维持液来诱导其向肝细胞样细胞分化，最后用免疫细胞化学方法检测其分化情况。结果 成功地进行了人骨髓MAPCs的原代和传代培养，并在体外成功地把其诱导分化为具有肝细胞表型特征的细胞。结论 FGF-4可诱导人MAPCs向具有肝细胞表型特征的细胞发生分化。     

NO、NOS在大鼠实验性结肠炎中的动态变化及意义

目的　观察大鼠实验性结肠炎发生发展过程中一氧化氮 (nitricoxide ,NO)、一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)的动态变化 ,了解NO、NOS同大鼠实验性结肠炎的关系。方法　采用 2 ,4 二硝基氯苯 (2 ,4 dinitrochlorobenzene ,DNCB)诱发大鼠实验性结肠炎模型 ;Wistar雄性大鼠 70只 ,检测造模前 (Ⅰ组 ) ,造模后第 1天 (Ⅱ组 )、第 1周 (Ⅲ组 )、第 2周 (Ⅳ组 )、第 4周 (Ⅴ组 )结肠粘膜NO、NOS的动态变化 ,同时观察其病理改变 ;结果用 x±s表示 ,采用单因素方差分析对数据进行统计学处理 ,以P <0 .0 5作为差异有显著性的检验水准。结果　 1、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组同Ⅰ、Ⅴ组相比 ,结肠粘膜NOS的活性及NO的水平明显升高 ,经统计学分析差异显著(P <0 .0 1) ,而Ⅰ、Ⅴ组间上述指标差异无显著性 (P >0 .0 5 )。 2、病理学改变 :Ⅰ组未见明显病理学变化 ;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组粘膜及粘膜下层明显充血、水肿 ,炎性细胞浸润 ,腺体杯状细胞减少 ,有糜烂及溃疡形成 ;Ⅴ组溃疡基本愈合 ,残存溃疡有明显修复性改变 ,如粘膜上皮修复、肉芽组织增生、瘢痕形成等。结论　NOS、NO过量生成和大鼠实验性结肠炎有关。     

青年人大肠癌的临床与实验研究

目的探讨青年人大肠癌的临床病理特点、细胞DNA含量以及P53，C-erbR-2，nm23的蛋白表达情况．方法进行了青年人大肠癌（35例）临床病理资料的回顾性研究，DNA含量的流式细胞学分析以及基因蛋白表达的免疫组织化学检测．结果青年人大肠癌中20岁以下者较少见，从21岁开始则有随年龄增长而增加之趋势，以直肠癌最为多见；临床分期上Ⅲ，Ⅳ期病例较多，年龄愈小晚期癌的发生趋于增多；生长方式以浸润肠壁全层和周围软组织为主；组织学特点粘液腺癌所占比例较高（41．9％），并多见印戒细胞癌，分化程度较差；浸润及局部淋巴结转移较快，一旦转移，手术效果很差．在DNA水平上青年人大肠癌的非二倍体癌发生率及细胞增殖指数均显著高于老年大肠癌（P＜0．01），G-erbB-2，P53蛋白的表达青年组大肠癌阳性率明显高于老年组，而青年人大肠癌nm23／NDPK则呈降低表达．结论青年人大肠癌的病理组织学特点可能与DNA增殖快，G-erbB-2激活和P53，nm23的突变相关．     

大鼠肝脏发育成熟及癌变时miR-100的表达

目的：探讨microRNA-100(miR-100)在大鼠肝脏发育成熟和癌变时的表达。方法取新生SD乳鼠、成年SD大鼠肝组织以及经连续喂饲2-乙酰氨基芴加部分肝切除术(2-AAF/PH)诱导的SD大鼠肝癌组织,分别采用实时荧光定量PCR及FISH技术检测miR-100的表达。结果同新生SD乳鼠相比,miR-100在成年SD大鼠肝组织中表达明显升高( P<0．05)。大鼠肝脏癌变组织的miR-100表达较成年大鼠肝组织明显下降( P<0．05),接近于新生SD乳鼠miR-100的表达水平。结论 miR-100可作为SD大鼠肝脏发育成熟的标志,其表达降低可能与肿瘤形成有关。     

人骨髓单个核细胞向肝细胞诱导分化的体外研究

目的 探讨在HGF、FGF_4诱导下骨髓单个核细胞能否向肝细胞分化。方法 找健康忐愿者,年龄4～50岁,胸骨抽取骨髓,用淋巴分离液分离出骨髓单个核细胞,用含2％胎牛血清和1×ITS的DMEM培养,分别用单独HGF、单独FGF_4、HGF和FGF_4联合刺激、无生长因子4种处理因素进行诱导培养,分别于诱导培养0、7、14、21、28天时,留取细胞,用免疫细胞化学法检测CK18、AFP、白蛋白,用PAS法进行糖元染色试验以验证诱导分化的结果。结果 0天时,AFP、白蛋白少数细胞阴性,CK18阴性,糖元未见阳性;加生长因子的三组AFP在7、14天时表达逐渐增高,21、28天减弱;糖元、CK18、白蛋白表达逐渐增高。无生长因子组,在7、14、21、28天时,这此指标均未见表达。结论 在HGF、FGR_4诱导下,骨髓单个核细胞可分化为具肝细胞表型和功能的细胞。     

青年与老年结直肠癌C -erbB - 2不同表达与DNA倍体的关系

目的　探讨青年和老年结直肠癌 (CRC)患者C -erbB - 2蛋白的表达与病理学和细胞DNA倍体的关系。方法　采用免疫组化法检测 63例青、老年CRCC -erbB - 2 ,流式细胞学分析青年和部分老年患者的DNA倍体。结果　C -erbB - 2蛋白阳性表达在 31例青年CRC中有 1 4例 (45 .2 % ) ,而 32例老年CRC中仅 4例 (1 2 .2 % ) (P <0 .0 1 ) ;癌的DNA非二倍体发生率青年组为 87.1 % (2 7/ 31 ) ,老年组为 2 8.6 % (4/ 1 4 ) (P <0 .0 0 1 )。在腺癌、高 -中分化、无局部淋巴结转移及浅度浸润的癌中 ,青年组C -erbB - 2蛋白的阳性表达和非二倍体发生率均高于老年组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 0 1 )。结论　青年和老年CRCC -erbB - 2蛋白表达不同与细胞DNA倍体密切相关 ,并有助于了解青年CRC的高恶性度     

Polo样激酶1基因在大鼠肝再生和肝卵圆细胞增殖中的差异表达

肝脏具有很强的再生能力,当发生轻、中度肝损害时,肝细胞可经增殖和分化等复杂过程完成肝再生;而在肝细胞大量损害或肝细胞增殖能力被抑制时,卵圆细胞可增殖并分化为肝细胞或胆管细胞.然而,目前研究结果已初步证实肝细胞癌的发生也源起于卵圆细胞,其分子机制仍有待深入研究[1-3]. Polo样激酶1(Plk1)属于保守的丝氨酸/苏氨酸激酶家族,在调控细胞周期进程和细胞分裂方面起着十分重要的作用[4-6].研究结果表明,Plk1在肝癌中的表达增强[7-8].我们在前期研究中也发现Plk1基因在肝细胞癌中差异表达[9].但是Plk1在肝卵圆细胞中的表达及其病理意义鲜见报道.本研究以二乙酰胺基芴(2-AAF)为致癌物诱导大鼠肝卵圆细胞增殖,与单纯肝再生组织进行对比分析,探讨Plk1在肝卵圆细胞中的表达及其与癌前状态的关系.     

青年人大肠癌病理学特征的相关分子机制研究

大肠癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一，近年来随着我国人民生活方式和饮食结构的改变，其发病率和死亡率逐渐升高。虽然国内大肠癌的总体发病率低于欧美等国家，但值得重视的是我国青年人大肠癌发病率明显较高，且具有恶性度高和预后差的临床表现。