登革1型和2型病毒混合感染样本的一步法实时荧光定量PCR检测方法的建立

本文旨在建立检测登革1型和2型病毒的一步法实时荧光定量PCR方法,为登革热的诊断和预测提供技术支撑。依据登革1型和2型病毒的保守区序列设计引物和探针,建立了同时检测两个血清型登革病毒的一步法实时荧光定量PCR方法。特异性实验结果显示,该方法可检测出登1型和2型病毒,与登革3型、4型病毒、黄热病毒、流感H3N2病毒均无交叉反应,具有较好的特异性。对登革1型和登革2型的灵敏度均为102copies/μL。应用该方法,可检测出登革1型和2型病毒混合感染C6/36后不同时间点病毒复制动态。在两个血清型登革病毒混合感染C6/36细胞72~120 h登革2型病毒的拷贝数与单独感染时登革2型病毒的拷贝数相比显著下降。上述研究证实建立的一步法实时荧光定量PCR方法具有特异性好灵敏度高、重复性好等特点,能够用于登革型和2型病毒混合感染样本的检测。     

登革病毒在人与蚊虫细胞正选择压力下的致病性与基因序列变化分析

自然界中登革病毒在蚊虫与哺乳动物宿主内交替循环复制,研究病毒与不同类型宿主细胞间的相互作用有助于理解病毒基因突变与毒力变化的关系.本研究将登革2型病毒在人肝癌细胞(Huh-7)和蚊虫细胞(C6/36)之间交替传代模拟登革病毒在自然界中的人类与蚊虫间的交替感染,通过检测第10、18代病毒对小鼠的毒力以及在蚊虫中的感染率、...     

不同气候区白纹伊蚊滞育卵差异研究∗

白纹伊蚊Aedes albopictus是登革病毒、寨卡病毒等多种病原体的重要传播媒介,广泛分布于我国温带和亚热带地区,以滞育卵越冬.一旦虫媒病毒扩散到我国北亚热带地区,非流行季节时期病毒的保存方式,将成为虫媒病毒研究中的重要问题.本研究开展了白纹伊蚊滞育卵的生态学研究,发现在短光照下不同地理株白纹伊蚊滞育卵的滞育率从产卵后7 d逐渐上升到21 d,至40 d趋于平缓并达到最高,滞育率在滞育前期和滞育后期统计学上差异显著.在滞育中后期,北京株白纹伊蚊滞育率相比杭州株白纹伊蚊和广州株白纹伊蚊滞育率明显较高.卵孵化后,不同地理株白纹伊蚊的卵的孵化率在滞育前期和滞育后期有显著差异.在短光照下滞育后期北京株白纹伊蚊的卵孵化率(21.45％)明显比广州株白纹伊蚊的卵孵化率(8.15％)高,提示位于温带地区的北京株白纹伊蚊较位于亚热带地区的杭州株和广州株白纹伊蚊滞育率和孵化率更高,说明位于温带地区的白纹伊蚊品系的滞育卵更能在冬季不良环境如低温等下存活,有利于增加越冬存活率.通过白纹伊蚊以滞育卵实现种群扩散、定殖的重要生物学基础,为探索新型蚊媒的控制途径提供科学依据.     

2种新型驱避剂现场防蚊效果的研究

目的研究2种新型驱避剂,8-羟基别二氢葛缕醇甲酸酯和羟基香茅醛1,2-丙二醇缩醛在新疆伊犁地区防蚊效果。方法试验人群暴露下肢,并在下肢上均匀地涂抹驱避剂,同时以国际公认的驱避剂避蚊胺(DEET)为对照药剂,观察驱避剂的有效时间及有效率。结果新型驱避剂中20%羟基香茅醛1,2-丙二醇缩醛效果最好,最短有效时间大于6 h,有效率可达100%;20%8-羟基别二氢葛缕醇甲酸酯有效时间为3~5 h,有效率37%~67%;20%避蚊胺有效时间4 h,有效率37%;10%避蚊胺最短有效时间小于3 h,有效率为0,保护效果最差。结论新型驱避剂羟基香茅醛1,2-丙二醇缩醛在20%含量时在新疆伊犁地区对蚊虫有很好的驱避效果,驱避效果明显优于20%避蚊胺,20%R1与20%避蚊胺的效果相当。2种新型驱避剂对皮肤无任何副作用,使用方便,具有实用意义。     

云南省边境地区埃及伊蚊和白纹伊蚊孳生特征调查

埃及伊蚊和白纹伊蚊是登革热的主要传播媒介,蚊虫孳生情况的持续调查和分析,有助于对种群变化进行实时监控,从而为登革热的防治提供理论依据.2017-2020年,每年9-10月在云南省西双版纳州(勐腊县、景洪市、勐海县),临沧市(镇康县南伞镇、耿马县孟定镇),德宏州(瑞丽市)共6个市(县)调查埃及伊蚊和白纹伊蚊孳生地类型并捕捞幼虫,对4龄幼虫分类鉴定以观察两种伊蚊特征.结果 显示,此次在所调查的6个市(县)均发现两种伊蚊孳生地,共560个.孳生地类型以家用水桶类最多,占比44.82％.边境各地区居民区调查发现埃及伊蚊孳生地占比33.64％,商业区埃及伊蚊占比48.89％,两种调查地埃及伊蚊数量差异存在统计学意义,在商业区埃及伊蚊占比高于居民区.2017年西双版纳州和瑞丽市白纹伊蚊孳生地占比分别为75.51％和67.44％,2020年为36.67％和38.10％,说明两地白纹伊蚊构成比下降.两地区埃及伊蚊孳生地占比由2017年的18.37％和16.28％增长为2020年的43.33％和42.85％,说明埃及伊蚊构成比上升.结果 表明,由于埃及伊蚊比白纹伊蚊传播登革热的能力更强,2020年的西双版纳州和瑞丽市较2017年,商业区较居民区暴发登革热的潜在风险更高.     

感染寨卡病毒后埃及伊蚊黄病毒NIRVS表达的检测

本研究通过高通量测序技术检测了寨卡病毒(ZIKV)感染组、血餐对照组和糖水对照组埃及伊蚊中肠组织小RNA的丰度,并筛选出差异表达的6个黄病毒NIRVS和9个棒状病毒NIRVS.针对筛选出的6个NIRVS设计引物用两步法逆转录荧光定量PCR(RT-qPCR)方法验证了ZIKV感染第4、7和10天中肠组织中黄病毒NIRVS...     

中国2011-2015年登革热疫情分析

本文探讨了中国2011-2015年登革热疫情的时空分布特征.收集整理中国各省2011-2015年登革热疫情监测数据,应用ArcGIS 9.0软件建立地理信息库,利用SaTScan7.0软件进行时空聚类分析,确定登革热疫情发生的时空热点区域,再对该热点区域进一步进行疫情分析.中国2011-2015年登革热疫情呈显著的聚集性分布.一级时空聚类区为广东省2014年10月;存在2个二级聚类区,一个是云南省2015年10月,另一个是江西、福建省2014年9月.登革热的热点区域广东省2013-2015年的时空聚类分析显示,一级聚类区为广州市、东莞市和佛山市,聚类时段为2014年9-10月;二级聚类区为广东省东部的潮州市,聚类时间为2015年9月.我国2011-2015年登革热疫情主要分布于东南沿海区域(以广东省为主)、西南部地区(以云南省为主).广东省2013-2014年登革发疫情主要聚集于该省的中部地区,2015年高发聚集区东移至该省东部.