铁纳米颗粒佐剂的应用研究进展

与传统灭活疫苗相比,多肽等亚单位疫苗的免疫原性较差,一般需额外添加佐剂.近年来有关新型疫苗佐剂的研究不少,但仍然只有极少数佐剂被获批人类使用.纳米颗粒被认为有望替代传统佐剂,其中金属纳米颗粒是最有前途的一类疫苗佐剂,同时也是适宜的抗原递送系统.铁纳米颗粒作为新型疫苗佐剂的可能性正越来越受到关注.铁纳米颗粒的理化特性包括...     

类风湿关节炎发病机制及其治疗方法研究进展

类风湿性关节炎 (rheumatoidarthritis, RA)是一种慢性进行性的自身免疫性疾病, 以关节滑膜炎及对称性、破坏性的关节病变为主要特征。RA的发病率在我国约为 0. 4%, 全球为 0. 5% ~1. 0%。半个世纪以来, 人们提出多种假说来尝试解释RA, 但是因为RA的发病机制过于复杂, 自 20世纪初的免疫超敏反应被确认时, 关于RA的发病机制一直处在不断的发展变化中。尽管RA的发病机制至今尚未明确, 但许多针对其特异淋巴细胞或循环分子的各种制剂已初步显示出有效性, 预示着对RA的治疗具有广阔的前景。我们拟对RA的发病机制及其治疗方法的研究…     

人sTNFR II-IgG Fc融合蛋白在毕赤酵母菌中的表达及其产物分析

目的:在毕赤酵母菌中表达sTNFR II-IgG Fc融合蛋白。检测融合蛋白是否形成二聚体,并对其N-糖链进行分析。方法:从人淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增目的基因sTNFRII与IgG Fc,然后利用重叠延伸PCR得到嵌合体基因sTNFRII-IgG Fc,并将其插入pPIC9载体中。以重组载体转化巴斯德毕赤酵母菌中进行克隆与表达。采用ELISA筛选高表达sTNFR II-IgG Fc融合蛋白的重组毕赤酵母菌株,对融合蛋白通过还原和非还原SDS-PAGE分析其二聚体结构,采用L929细胞检测融合蛋白抗TNF-α的生物学活性,最后利用荧光辅助糖电泳(FACE)分析融合蛋白的N-糖链。结果:成功地建立了可分泌表达sTNFR II-IgG Fc融合蛋白的重组酵母菌株,摇瓶培养后融合蛋白的表达量为2mg/L。SDS-PAGE和Western blot表明,该融合蛋白能自然形成二聚体结构;可抑制TNF-α对L929细胞的杀伤作用,其中和5×104U/LTNF-α的EC50为170μg/L。FACE分析融合蛋白N-糖链的大小为11~13个糖残基。结论:在毕赤酵母菌中成功地表达了sTNFR II-IgG Fc融合蛋白,为在毕赤酵母菌中表达其他的Fc融合蛋白和抗体提供了参考。