金匮肾气丸对阴阳两亏型2型糖尿病的应用价值

目的研究金匮肾气丸对阴阳两亏型2型糖尿病的应用疗效。方法抽取我院2017年8月至2018年9月收治的60例2型糖尿病患者,采用随机数字表法,将患者均分为实验组和参照组,每组30例;参照组运用二甲双胍治疗,实验组运用金匮肾气丸治疗,对比两组临床效果。结果实验组经治疗后,总有效率(93.33%)高于参照组(70.00%),血糖水平得到明显控制,组间检验(P0.05),具有统计学意义。结论金匮肾气丸可有效控制患者血糖水平,缓解患者症状,其效果较好,值得在临床医学中推广使用。     

治疗后嗜酸性粒细胞水平评价预测PD-1单抗治疗胰腺癌患者疗效和预后的价值（附2例）

目的:观察PD-1单抗治疗后长期持续获益的晚期胰腺癌患者外周血嗜酸性粒细胞水平的变化。方法:分析我院2例应用PD-1单抗治疗后长期持续获益的晚期胰腺癌患者的临床资料,探究在治疗过程中嗜酸性粒细胞水平的变化与疗效之间的关系。结果:2例晚期胰腺癌患者采用PD-1单抗治疗后肿瘤病灶均显著缩小,无进展生存期均明显延长,疗效持续时间已分别大于25个月和15个月,治疗期间定期复查发现外周血嗜酸性粒细胞计数及比率较基线均有明显升高,尤其是治疗半年后增高特别显著,且均未出现免疫相关不良反应。结论:嗜酸性粒细胞水平可能是PD-1单抗治疗胰腺癌长期获益的潜在评价指标,治疗过程中嗜酸性粒细胞显著增多提示免疫获益时间长,对于临床疗效评价和预后判断具有一定的预测价值。     

丙型肝炎病毒NS5A区与干扰素敏感性间关系的研究

日本学者首先发现丙型肝炎病毒NS5A区存在干扰素敏感决定区(ISDR),可预测干扰素疗效,但随后西欧学者的多项研究并不支持此观点.本文对ISDR与干扰素疗效、病毒滴度、准种选择性的关系以及ISDR的体外研究等方面的现状进行了综述.     

细菌在肿瘤治疗中的应用——从基础到临床

目前，肿瘤治疗方法日趋多样，其中细菌治疗渐成近年来的研究热点。细菌治疗肿瘤主要基于其独特的作用机制能 触发宿主抗肿瘤免疫作用，以及部分细菌能靶向性定植于肿瘤内部的特点，在实体肿瘤的基础研究和临床研究中均取得令人鼓 舞的疗效。综述就工程化细菌在肿瘤免疫治疗中的具体策略以及一些临床试验研究进行整理，讨论细菌疗法目前所面临的挑战 及应对策略等，以期为进一步的研究奠定基础，推进细菌在肿瘤治疗中的临床应用。     

两种β2m重组质粒的构建及其表达与纯化

目的 获得大量有活性的人胆β2m重组蛋白，为构建HLA与抗原肽的复合体及HLA四聚体作准备。方法 采用RT-PCR克隆法构建重组质粒，于BL21（DE3）菌中原核表达后，经金属螯合亲和层析纯化，BCA Protein Assay Kit测定蛋白含量，应用SDS-PAGE观察重组蛋白表达情况及Westem blot分析重组抗原的活性。结果 成功地构建了两种融合表达载体PET-22b/β2m及PET-28a/β2m，两者的表达量分别为5-10mg/L，40-80mg/L，纯度均为95％。结论 通过比较，确定了β2m最佳表达载体系统及表达条件，为研究轻链在原核系统中表达、纯化以及构建HLA复合体，探讨免疫识别机制奠定了基础。     

PCR-SSP结合测序分析快速筛选HLA-A*0201亚等位基因

建立相对简单经济的检测HLA A 0 2 0 1等位基因的方法 ,以便于从特定人群中快速筛选HLA A 0 2 0 1阳性的个体 ,满足科研的需要。根据第十二届HLA国际联合会提供的标准操作规程和一对HLA A位点特异性的引物 ,从外周血中提取基因组DNA ,扩增HLA A基因 ;再设计两对HLA A2组特异性引物 ,采用套式PCR分别扩增HLA A基因的 5’端和 3’端 ,如出现特异条带 ,则将后两对引物的PCR产物进行测序分析 ,对照HLA A2组等位基因的第 2和第 3外显子序列图 ,确定是否为HLA A 0 2 0 1 1～ 0 2 0 1 6的 6个等位基因。结果 :以HLA A 0 2 0 1阳性的T2细胞株为阳性对照进行检测 ,结果完全正确 ,并设立非HLA A 0 2 0 1的A2细胞株RML (HLA A 0 2 0 4 )及Raii细胞株 (非A2组 )为对照 ,同时随机检测 30份门诊病人血样 ,其中 7份为HLA A2阳性 ,经测序 ,2例为HLA A 0 2 0 1 1 ,1例为HLA A 0 2 1 1或 0 2 35 ,1例是HLA A 0 2 0 6或0 2 2 1或 0 2 4 1或 0 2 4 4或 0 2 5 1或 0 2 5 4 ,1例是HLA A 0 2 0 5或 0 2 1 4 ,1例是HLA A 0 2 34或 0 2 35 ,1例是 0 2 5 0。本方法利用位点特异性引物进行 2～ 3次PCR扩增 ,结合PCR产物测序便可相对简便经济地检测出HLA A 0 2 0 1的全部 6个亚等位基因 ,为快速检测其他特定HLA等位基因?     

肿瘤穿透肽iRGD在肿瘤靶向纳米递药治疗中的研究进展

恶性肿瘤是目前严重威胁人类生命健康的重大疾病之一,随着对恶性肿瘤研究的深入,越来越多的抗肿瘤药物被研发应用并取得显著的成效,但是由于复杂的肿瘤微环境,抗肿瘤药物常难以渗透至肿瘤组织深部,导致生物利用度低,抗肿瘤作用减弱。肿瘤穿透肽（tumor-penetrating peptide）iRGD化学连接在纳米载体表面或者与纳米载体联合给药,促进药物渗透至肿瘤组织深部有效发挥抗肿瘤作用,是目前肿瘤靶向治疗领域中备受关注的研究方向之一。本文回顾并总结了iRGD在抗肿瘤靶向纳米递药治疗中的研究进展,这些研究结果都显示了肿瘤穿透肽iRGD在肿瘤靶向治疗中拥有良好的应用前景。     

Construction of HLA／Peptide Tetramer with Peptide-Linked β2 Microglobulin

Ever since their first introduction in 1996 to the immunolo-gy community [1], the MHC class /peptide tetramershave become a useful tool to directly analyze MHC class-restricted, antigen-specific CTLs isolated from hostswith viral or malignant diseases. Th…     

EBV-LMP2A肽诱导的特异性CTL对EBV阳性胃癌细胞的体外杀伤作用

目的:探讨HLA限制性EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)表位肽EBV-潜伏膜蛋白2A (EBV-latent membrane protein 2A,EBV-LMP2A)诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对EBV阳性胃癌细胞的体外杀伤作用.方法:选用南京大学医学院附属肿瘤医院肿瘤中心HLA-A2阳性胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC)、人胃腺癌细胞株(AGS)和人EBV阳性胃腺癌细胞株(AGS-EBV),通过改良的体外细胞培养技术用HLA-A2限制性的EBV-LMP2A抗原肽从人PBMC中诱导扩增出特异性CTL,采用四聚体技术和流式细胞术检测抗原肽诱导产生的特异性CTL的含量,通过FITC-PI标记流式术检测EBV-CTL对EBV阳性和EBV阴性的胃癌细胞的体外杀伤作用.结果:经改良的细胞培养技术和抗原肽双重刺激后EBV-LMP2A抗原肽可以诱导产生出高比例的抗原特异性CTL[EBV-LMP2A-356特异性T细胞占CD8+T细胞的(47.1±5.2)％];EBV-CTL对EBV阳性胃癌细胞的体外杀伤作用较EBV阴性的胃癌细胞明显增强[(45.1±9.3)％s(19.4±2.5)％,P＜0.05].结论:通过改良的细胞培养技术使用EBV-LMP2A抗原肽能诱导产生高比例的EBV特异性CTL,其对EBV阳性胃癌细胞有较强的特异性杀伤作用.     

T淋巴细胞归巢：实体肿瘤过继性细胞治疗的关键因素

近年来,肿瘤免疫治疗迅速发展,其中以T淋巴细胞（T细胞）为主体的过继细胞治疗在临床上取得了一定的疗效,成为最具潜力的免疫治疗方法之一。T细胞归巢主要包括滚动、黏附、外渗和趋化等一系列过程。然而,在实体瘤中存在物理屏障、趋化因子不匹配、血管异常、免疫抑制微环境等因素限制了过继性细胞治疗的疗效。通过改善细胞表面的趋化因子受体、嵌插靶向肽、改进给药方式以及采用联合放疗、免疫检查点阻断剂、肿瘤疫苗、双特异性抗体等治疗方法,可进一步改善T细胞的归巢能力。本文主要对T细胞归巢过程、T细胞靶向肿瘤部位的影响因素以及相关治疗策略做总结与展望。