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目的我们前期研究中进行全基因组表达谱检测发现在雄激素受体（androgen receptor,Ar）基因睾丸支持细胞特异性敲除小鼠（S-Ar^-/y）睾丸组织中泛素特异性蛋白酶25（ubiquitin specific peptidase 25,usp25）基因表达较低。本研究的目的是了解雄激素及其受体是否可以作用于Usp25基因,并测定其雄激素反应元件（androgen-responsive element,ARE）。方法采用RT-qPCR方法检测Usp25基因表达量。通过生物信息学预测脚25基因上游可能的ARE,构建Usp25基因ARE报告质粒pGLP／Usp25。在TM4细胞中,采用荧光素酶报告系统分析雄激素及其受体对Usp25基因ARE活性的调控作用。结果在S-Ar^-/y小鼠睾丸组织中矾p25基因表达量比在野生型小鼠中显著降低。在TM4细胞中睾酮可以显著提高Usp25基因表达量。在TM4细胞中,雄激素可以显著提高pGLP／Usp25的荧光素酶活性。结论Usp25基因表达可以被雄激素睾酮激活,Usp25基因第一内含子519至1102bp区域含有ARE,可以调控启动子的转录水平。 相似文献
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目的 探讨丝/苏氨酸蛋白激酶Aurora-A促进鼻咽癌化疗抵抗的机制。方法 应用Western blot和Q-PCR检测鼻咽癌组织及癌旁正常组织中Aurora-A的表达水平。选取Aurora-A高表达的鼻咽癌细胞系CNE2，添加Aurora-A激酶抑制剂60 nm VX 680处理8小时后，加入浓度为10 μg/ml的顺铂处理24小时，收集细胞通过流式细胞术检测细胞凋亡情况，同时WB和Q-PCR检测细胞凋亡相关信号通路蛋白的表达情况。结果 Aurora-A在鼻咽癌组织中表达水平明显高于癌旁正常组织，相对于正常鼻咽细胞NP69，Aurora-A在不同鼻咽癌细胞中表达显著升高且在CNE2中表达最高；相对于未处理CNE2，添加顺铂或/和Aurora-A抑制剂VX680处理的CNE2细胞能显著促进鼻咽癌细胞凋亡及p-AKT、p21及Cleaved-Caspase-3的表达。结论 Aurora-A通过p-AKT/p21/Cleaved-Caspase-3通路促进鼻咽癌的化疗抵抗。 相似文献
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目的:研究1700001O22RIK(RIKEN c DNA 1700001O22)基因在小鼠睾丸的表达特征,结合生物信息学分析初步探讨其功能。方法:通过分析小鼠基因表达谱芯片,发现1700001O22RIK基因特异性表达于睾丸组织。采用RT-PCR、实时PCR、Western印迹及免疫组化等方法分析该基因在成年C57BL/6J小鼠各组织中的表达特征,以及不同发育阶段小鼠的睾丸组织中的表达变化。利用生物信息学软件对该基因进行相关生物信息学分析。结果:1700001O22RIK基因在小鼠睾丸组织中呈现特异性表达,表达水平具有年龄依赖性,在成年期表达最强;1700001O22RIK蛋白在成年小鼠睾丸组织中主要定位于精原细胞、精母细胞及圆形精子细胞。经生物信息学分析,1700001O22RIK基因编码蛋白氨基酸序列在人和小鼠具有高度同源性,提示该基因在哺乳动物进化过程中十分保守。结论:1700001O22RIK属于睾丸特异性基因,主要表达于生精小管的精原细胞、精母细胞及圆形精子细胞,提示其可能参与精子发生的调节。 相似文献
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目的分析Lyzl6基因在小鼠中的表达特点.方法本研究通过RT-PCR实验明确Lyzl6基因在9、15、18、21、28、35d和6月龄小鼠睾丸中的表达变化及Lyzl6基因在成年小鼠各组织表达特点.采用多种生物信息学方法对该基因进行生物信息学分析.结果 RT-PCR结果显示,Lyzl6基因在小鼠21d龄及之前的睾丸中没有表达,28d睾丸中开始持续高表达.Lyzl6基因在14种小鼠组织中呈现睾丸显著高表达.经生物信息学分析,Lyzl6蛋白属于典型的C型溶菌酶,是一种分泌蛋白,其蛋白的信号肽剪切位点在第19~20个氨基酸之间.小鼠和人Lyzl6蛋白氨基酸序列有高度相似性和同源性,显示该基因在哺乳动物中高度保守.结论Lyzl6基因为小鼠睾丸年龄依赖性表达基因,在小鼠睾丸中高表达,显示其可能在生精过程发挥重要作用. 相似文献
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