牛膝甾酮干预SD乳鼠成骨细胞的增殖与分化

文题释义：牛膝甾酮：牛膝为苋科植物牛膝的干燥根,主要含有甾酮类、皂苷类及多糖类成分,具有调节糖代谢、抗炎、镇痛、降血糖、免疫调节等作用,牛膝甾酮是其活性成分之一,目前尚无文献报道其对成骨细胞的生物学效应。 成骨细胞：由间充质干细胞分化而来,直接参与骨形成,其增殖、分化缺陷是骨质疏松症发病的重要原因,研究表明改善成骨细胞功能可有效治疗骨质疏松症。 背景：促进成骨细胞的增殖以及分化是治疗骨质疏松症的有效手段之一,但关于牛膝甾酮对成骨细胞增殖、分化的影响却没有报道。 目的：研究牛膝甾酮对SD乳鼠成骨细胞增殖、分化的影响及其潜在的分子机制。 方法：通过酶消化法获得SD乳鼠成骨细胞,体外诱导培养并鉴定;采用CCK8法检测不同质量浓度牛膝甾酮(1,5,10 mg/L)对成骨细胞活力的影响;采用碱性磷酸酶染色及碱性磷酸酶活性试剂盒评价成骨细胞的早期分化能力;采用茜素红染色观察钙结节的形成数量,评估成骨细胞的矿化能力;采用实时荧光定量PCR法检测成骨分化标志物的表达水平;采用MDC染色检测自噬小体数量。 结果与结论：①相对于不加药对照组,牛膝甾酮在一定程度上抑制成骨细胞的增殖(P < 0.05),但却能够显著促进碱性磷酸酶活性及矿化结节的形成(P < 0.05),同时上调成骨分化标志物CollagenⅠ、OPG、OPN、OCN的表达水平,此外牛膝甾酮还能够促进自噬小体的形成;②结果提示,牛膝甾酮能够通过上调成骨分化相关基因及刺激自噬体的形成而促进成骨细胞的分化。 ORCID: 0000-0002-2837-6347(姜涛) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

岐黄针疗法治疗寒湿痹阻型膝骨关节炎的临床观察

【目的】观察岐黄针疗法治疗寒湿痹阻型膝骨关节炎的临床疗效及其对患者血清白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。【方法】将60例寒湿痹阻型膝骨关节炎患者随机分为观察组和对照组，每组各30例，对照组给予常规针刺疗法治疗，观察组给予岐黄针疗法治疗，治疗1次为1个疗程，共治疗3个疗程。治疗3个疗程后，评价2组临床疗效，观察2组患者治疗前后西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数（WOMAC）评分的变化情况，以及视觉模拟量表（VAS）评分的变化情况。比较2组患者治疗前后IL-1β和TNF-α水平的变化情况。【结果】（1）观察组总有效率为83.33%(25/30)，对照组为80.00%(24/30),2组比较差异无统计学意义（P>0.05）。（2）治疗后，2组患者的WOMAC评分均明显改善（P<0.05）。观察组在改善WOMAC评分方面稍优于对照组，但差异无统计学意义（P>0.05）。（3）治疗后，2组患者的VAS评分均明显改善（P<0.05）。观察组在改善VAS评分方面稍优于对照组，但差异无统计学意义（P>0.05）。（4）治疗后，2组患者的T...     

天灸对哮喘模型大鼠细胞因子及特异性转录因子的影响

目的:探讨天灸调节哮喘大鼠免疫失衡的机制。方法:将70只SD雄性大鼠分为正常组、安慰剂组、地塞米松组、大饼长程贴药组、大饼短程贴药组、小饼长程贴药组、小饼短程贴药组,每组各10只,除正常组外均采用卵白蛋白致敏和激发建立大鼠哮喘模型,对贴药组进行天灸治疗,其中大饼贴药组用1cm×1cm的大药饼贴药,小饼贴药组用0.5cm×0.5cm的小药饼贴药,每次按照相关穴位进行贴药,每次贴药5h,每天1次,共4次为一疗程。长疗程组共治疗3个疗程,短疗程组治疗1个疗程。地塞米松组予地塞米松进行腹腔注射,疗程与长程贴药组相同。实验结束后,观察哮喘大鼠外周血中嗜酸性粒细胞(EOS)变化;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠肺组织中免疫球蛋白E(IgE)、细胞因子白介素4(IL-4)及干扰素γ(IFN-γ)的含量变化;用实时荧光定量(real-time Q-PCR)技术检测肺组织转录因子T-bet(T-box express in T cell)及GATA-3(GATA binding protein 3)蛋白的表达水平。结果:与正常组比较,安慰剂组全血EOS计数及血清IL-4、IgE含量均升高(均P0.01),血清中IFN-γ含量明显降低(P0.01));天灸贴药各组及地塞米松组可显著降低哮喘大鼠EOS、IgE水平及IL-4含量(均P0.01),提高IFN-γ的含量(P0.01)。与正常组比较,安慰剂组中T-bet mRNA表达显著降低(P0.01);各治疗组能显著提高T-bet mRNA的表达,明显减少GATA-3mRNA的表达(P0.01)。与短程贴药组比较,长程贴药组及地塞米松组中T-betmRNA的表达明显升高(P0.01),GATA-3mRNA的表达显著降低(P0.01);长程贴药组与地塞米松组比较无显著性差异(P0.05),大饼贴药组与小饼贴药组比较亦无显著性差异(P0.05)。结论:天灸能明显减轻哮喘大鼠的气道炎症,随时间的延长,疗效增加,具有明显的时效性,与药饼的大小无明显关系。     

牛膝甾酮对小鼠MC3T3-E1细胞成骨分化和增殖的影响

目的研究牛膝甾酮(IS)对小鼠成骨细胞系(MC3T3-E1细胞)增殖、分化的影响及其可能的分子机制。方法将MC3T3-E1细胞分为对照组及IS不同浓度组(10~(-4)～10~(-1)ng/μL),24、48 h后采用细胞计数(CCK8)试剂盒检测细胞增殖,7、14天后采用碱性磷酸酶(ALP)活性试剂盒检测ALP活性,茜素红染色检测矿化结节,原位末端标记(TUNEL)试剂盒检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测成骨分化相关标志物Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、骨保护素(OPG)、骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)、ALP以及雌激素受体alpha(ERα)、雌激素受体beta(ERβ) mRNA的表达水平。结果与对照组比较,在干预48 h后,10~(-3)、10~(-2)、10~(-1)ng/μL IS能抑制细胞的增殖(P0.05),但对细胞凋亡无明显影响。10~(-4)、10~(-3)、10~(-2)、10~(-1)ng/μL IS均能够促进ALP活性及矿化结节的形成(P0.05),亦能促进ERα、OPG、CollagenⅠ、ALP mRNA表达(P0.05);10~(-3)、10~(-2)、10~(-1)ng/μL IS均能促进OPN、OCN mRNA表达(P0.05),10~(-1)ng/μL IS能够促进ERβmRNA表达(P0.05)。结论 IS能促进MC3T3-E1细胞的成骨分化,其可能机制与上调成骨分化标志物及提高ERαmRNA表达有关。