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目的 通过基因克隆在巴斯德毕赤酵母中表达人自身抗原Sm B'.方法 PCR扩增Sm B'基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-Sm B'.用电穿孔法转化酵母菌Sm D1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清液用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(WB)鉴定,并用免疫酶斑点法和免疫印迹法(immunoblot,IBT)检测与评价分析30例系统性红斑狼疮(SLE)患者、30例混合结缔组织病患者和30名健康体检者血清中抗-Sm B'水平差异.结果 PCR产物约700 bp,与预期657 bp接近,pPIC9k-Sm B'重组阳性克隆测序结果与核酸数据库报道完全一致,双酶切鉴定正确,表达产物Sm B'的相对分子质量约32 000,WB法证实表达产物具有天然Sm B'分子的免疫原性,阴性对照菌未见目的 表达条带.免疫酶斑点法检测阳性率为46.7%(42/90),IBT的检测阳性率为51.1%(46/90);2种方法检测结果一致性较佳(Kappa值=0.911 2,P<0.01).结论 Sm B'在巴斯德毕赤酵母中分泌表达成功,这为Sm B'试剂盒研究奠定了基础. 相似文献
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目的了解17株亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌相关耐药基因及分子流行病学状况。方法采用Hodge试验检测碳青霉烯酶表型;采用PCR法检测碳青霉烯酶、I类头孢菌素酶(AmpC)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐药基因,进行测序及网上比对确定基因型;采用肠杆菌科基因间重复序列(ERIC)和多位点序列分型(MLST)对菌株进行同源性和遗传相关性分析。结果 15株肺炎克雷伯菌检出KPC-2、TEM-1、SHV和CTX-M型基因,SHV12和CTX-M-24为主要基因亚型;2株大肠埃希菌检出KPC-2基因,其中1株大肠埃希菌检出TEM-1和CTX-M-24基因,另一株大肠埃希菌检出CMY-42和OXA-1基因;17株菌未检测到IMP、VIM和NDM碳青霉烯酶。15株肺炎克雷伯菌分为A、B和C三个ERIC类别,12株A类为ST11型,2株B类为ST290和ST147型,1株C类为ST967型,2株大肠埃希菌是同一ERIC类别。结论 17株菌亚胺培南耐药主要与KPC-2基因有关,产KPC-2肺炎克雷伯菌在本院神经外科病区呈克隆传播流行,ST11型为此次流行的主要型别;17株菌同时也是产ESBLs株或产ApmC酶株;首次在世界范围内发现ST290和ST967型产KPC-2肺炎克雷伯菌;临床科室应加强院内感染控制措施。 相似文献
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钾钠火焰光度计本身虽有压缩空气滤水器,但常因使用环境湿度较大时不能有效控制,进入气路系统的压缩气体仍带入不少水汽,在气路的各接口处及阀门处贮积水珠,可影响仪器的稳定性及临床标本检测的准确性.为克服上述影响,作者经反复研究及实 相似文献
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用血浆血红蛋白评价各种采血管及其添加剂 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 通过测定游离血红蛋白(free hemoglobin,FHb)浓度以判别溶血程度.评价不同采血管及采血方式对血液溶血程度的影响.方法 用新的2,4-二氯酚(2,4-DCP)法测定FHb浓度,比较用注射器采血和一次性采血针取血对血液溶血程度的影响,并比较枸橼酸钠、EDTA和肝素锂三种抗凝剂对溶血的影响.结果 促凝管血清FHb浓度比肝素锂抗凝管[FHb=(25.2±5.6)mg/L]高.三种抗凝剂相比,枸橼酸钠(1:9)的血浆FHb浓度最低,FHb=(20.0±5.2)mg/L.一次性采血针FHb比注射器采血的FHb平均高25.8%.比较CG分离胶与CG促凝管,以进口BD管FHb最低.结论 枸橼酸钠(1:9)抗凝剂管红细胞保存最好.促凝剂可致轻度溶血,BD管最好,分离胶管次之.各采血管3h后上升FHb浓度,24h后升高显著. 相似文献
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目的:观察短暂性脑缺血发作(TIA)患者卒中危险程度与血浆纤维蛋白原(FIB)含量和C-反应蛋白(CRP)水平的关系并探讨其临床意义。方法:60例TIA患者按TIA后预测短暂脑卒中危险性的ABCD评分系统,被分为高危卒中组(ABCD评分>4分,32例),非高危卒中组(TIA组,ABCD评分≤4分,30例),另30例健康体检者作为健康对照组。分别测量各组对象的血浆FIB、血清CRP水平并作比较。结果:高危卒中组血浆FIB水平[(4.6±1.2)g/L]、血清CRP水平[(32.12±6.3)mg/L]明显高于TIA组[(3.6±0.2)g/L、(6.20±4.5mg/L)]及健康对照组[(3.1±0.3)g/L、(5.4±4.8)mg/L],P<0.05或P<0.01。Pearson直线相关分析表明,高危卒中组血浆FIB与血清CRP水平呈正相关(r=0.61,P<0.01)。结论:不同卒中危险程度短暂性脑缺血发作患者血浆纤维蛋白原和血清C-反应蛋白水平存在显著差异。C-反应蛋白与纤维蛋白原可作为早期预测短暂性脑缺血发作患者发生脑卒中风险的生化指标。 相似文献
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尿红细胞镜检血浆血红蛋白与尿液试条潜血的探讨 总被引:2,自引:0,他引:2
目前尿液化学分析仪配套试条10-12联是尿液化学分析的过筛试验,不能代替"尿常规".尿红细胞镜检是血尿的定性参考方法.但是,目前不少单位潜血与红细胞有混淆报告,疏于镜检,造成漏误诊.我们比较了尿试条潜血,尿镜检红细胞与血浆血红蛋白(PHb),十分明确地提出尿沉渣镜检红细胞作为血尿标准.现报告如下. 相似文献