骨髓间充质干细胞联合维生素E对急性肾损伤炎症反应的抑制作用

 目的:探索骨髓间充质干细胞联合维生素E对急性肾损伤中炎症反应的抑制效果,开发针对急性肾损伤的新型治疗模式。方法:采用庆大霉素作为急性肾损伤药物,复制大鼠急性肾损伤模型,以骨髓间充质干细胞联合维生素E对急性肾损伤进行治疗,治疗结束后,收集大鼠的血浆和肾脏组织,采用实时荧光定量PCR及ELISA方法,评价血浆及组织中炎症蛋白的表达。结果:通过骨髓间充质干细胞联合维生素E对大鼠急性肾损伤模型进行治疗后,大鼠血浆中的炎症蛋白显著降低;在肾脏组织中,与单一应用骨髓间充质干细胞或维生素E相比,二者联合在某些炎症蛋白的抑制方面具有更明显的效果。结论: 骨髓间充质干细胞联合维生素E对急性肾损伤中炎症反应具有一定抑制效果,优于单一骨髓间充质干细胞或单一维生素E的治疗方式,所以,这种联合治疗模式在急性肾损伤的治疗方面更具有临床应用价值。     

局灶性脑缺血后神经干细胞增殖及GDNF表达变化的实验研究

目的研究局灶性脑缺血后大鼠脑内神经干细胞(NSCs)增殖情况及与胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达变化的关系。方法将24只SD大鼠随机分为假手术组和模型1组、模型2组、模型3组各6只,后三组用大脑中动脉栓塞法(MCAO)制备局灶性脑缺血模型,分别于术后3、7、14 d处死;假手术组除不以尼龙线阻塞大脑中动脉起始部外,其他操作与模型1组相同。采用免疫组化染色法观察5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记的细胞及巢蛋白(Nestin)、GDNF阳性细胞表达,BrdU/Nestin免疫荧光双标法观察NSCs变化。结果模型2组损伤侧脑室下层(SVZ)BrdU阳性细胞显著多于假手术组(P<0.05),模型3组与假手术组相似;模型2、3组皮层梗死灶周围BrdU阳性细胞均显著多于假手术组(P<0.01、0.05);模型1、2组皮层梗死灶周围Nestin阳性细胞均显著多于假手术组(P均<0.01),BrdU/Nestin免疫荧光双标显示BrdU阳性细胞几乎均为Nestin阳性;模型2、3组皮层梗死灶周围GDNF阳性细胞均显著多于假手术组(P均<0.05)。结论大鼠局灶性脑缺血后3～14 d内源性NSCs增殖加快,GDNF表达增加可能对其起促进作用。     

结肠癌细胞源exosomes的分离鉴定及其表面蛋白CD44v6的表达

目的 探索结肠癌colo205细胞系对exosomes的分泌功能,并分析热休克作用对表面蛋白CD44v6表达量的影响.方法 采用超速离心法分离colo205细胞分泌的exosomes和热休克处理后colo205细胞分泌的exosomes(Heat shocked exosomes,HS-Exo),经220 nm微孔滤膜过滤纯化后,在透射电镜下观察其形态,并用SDS-PAGE方法分析细胞与exosomes的蛋白组成,Western Blot检测表面CD44v6的表达情况.结果 经透射电镜观察,正常exosomes与HS-Exo形态基本相似,均为圆形或椭圆形膜性囊泡,直径大多在30～100 nm之间,且经热休克处理的colo205细胞及其分泌的HS-Exo,在CD44v6表达量上较正常colo205细胞及exosomes显著上调(P＜0.05).结论 结肠癌colo205细胞系可分泌exosomes,且超速离心结合滤膜过滤的分离纯化方法切实可行;热休克作用可使CD44v6表达上调,说明HS-Exo较exosomes可能在肿瘤免疫治疗方面有更重要的应用价值.     

负压吸引在创面修复中的研究进展

随着难愈性创面的增多以及创面床理论的提出,负压吸引(VSD)作为一项传统的治疗技术,其研究及应用愈加广泛和深入。本文对负压吸引在创面准备及修复过程中使用时机、使用方式、多药物联合应用的进展作一综述。     

维生素在肝纤维化治疗中的研究进展

脂肪肝及肝纤维化发病率极高,几乎发生于所有慢性肝损伤患者,严重者发展为肝硬化乃至肝癌,全世界每年约有140万慢性肝病患者因肝纤维化和肝硬化导致死亡,肝病治疗已经成为一个世界性的公共健康问题〔1〕。老年肝纤维化患者会呈现出疲惫、食欲、神智、肤色、饮酒量等多个方面的不良反应,严重影响老年人的生活状况。肝纤维化作为大多数慢性肝病所共有的病理过程,同时也是各种慢性肝病向肝硬化发展的必经阶段〔2〕,肝炎病毒、过量摄入酒精、胆汁淤积、药物与毒物、自身免疫性肝病等多种损伤因素长期慢性刺激肝脏引起炎症均可引起肝纤维化的形成〔3〕。随着肝纤维化发生机制的进一步阐明,以肝星状细胞(HSC)为靶标的治疗措施逐渐成为抗肝纤维     

贴壁型树突细胞的分离培养及鉴定

目的探索树突细胞的生长状态,建立鉴别树突细胞的简便方法。方法从正常人外周血分离获得单个核细胞,常规培养2 h,取贴壁细胞,用含细胞因子的培养液进行培养,于第1、2、5、7天在光镜下对其进行形态鉴别,然后检测其促淋巴细胞增殖和诱导免疫反应的功能。结果实验中所培养的树突细胞始终处于贴壁状态,未见悬浮生长现象,其形态与理论相符,可在体外促进淋巴细胞增殖,并诱导免疫反应。结论树突细胞体外培养至发育成熟的过程中,树突细胞可能始终处于贴壁生长状态。     

孕前体质指数和孕期增重速率与妊娠期高血压疾病的相关性

目的 探讨孕前体质指数(BMI)和孕期总增重与妊娠期高血压疾病的相关性。方法 选取2017年7月—2018年2月于上海市浦东新区妇幼保健院及上海市嘉定区妇幼保健院建卡并定期孕检的孕妇2 174例。依据2009年美国医学研究院(IOM)指南标准,根据孕前BMI情况分为偏瘦组、正常组、超重组及肥胖组;根据孕期增重情况分为增重过少组、增重适宜组及增重过多组。结果 妊娠期高血压疾病发病率随孕期总增重、孕前BMI的增加而增加,差异有统计学意义(P<0.05)。早孕期、中孕期及晚孕期不同孕期增重速率组的妊娠期高血压疾病发病率无组间差异。通过多元logistic回归分析,肥胖组孕妇妊娠期高血压疾病的发病风险是正常组孕妇的15.17倍(95%CI为5.50～41.84,P<0.001);孕期总增重异常及早孕期、中孕期、晚孕期增重速率异常并不增加妊娠期高血压疾病的发病风险。结论 妊娠期高血压疾病发病率随孕前BMI和孕期总增重的增加而增加。相较于孕期增重异常,孕前超重和肥胖具有更高风险。     

全膝关节置换术治疗膝关节骨性关节炎的临床观察

目的观察全膝关节置换术（TKA）治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效。方法自2012-01—2012-12对50例（59膝）膝关节骨性关节炎行TKA。采用HSS评分标准对手术前后膝关节功能进行评估,并观察有无并发症发生。术后于下肢全长正位X线片上测量机械轴内侧角和股骨假体角（FFC angle）及胫骨假体角（FTC angle）,在侧位X线片上测量股骨假体角（LFC angle）和胫骨假体角（LTC angle）。结果 50例（59膝）均得到平均9（6~12）个月随访。患膝疼痛得到明显缓解或者消失,畸形获得矫正,活动明显改善。末次随访时HSS评分平均（83.66±7.78）分,较术前明显提高。术后X线片均显示假体的位置良好。术后在站立位下肢全长正位X线片上测量机械轴内侧角176°~185°,平均（178±3）°。FFC angle 85°~94°,平均（87±3）°;FTC angle 87°~96°,平均为（90±3）°。LFC angle 78°~89°,平均（85±4）°;LTC angle 77°~95°,平均（87±2）°。结论 TKA可以有效治疗膝关节骨性关节炎,精确测量下肢的力线、恢复膝关节正常的外翻角、注意周围的韧带和软组织的松解平衡是手术的关键。     

牙周膜干细胞在再生医学中的研究进展

牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cell,PDLSC)是来源于牙周膜的一类成体干细胞,具有较强的自我更新能力,并且可以进一步分化成为多种具有不同功能特性的细胞。目前研究表明,牙周组织疾病在中老年人中具有较高的发生率,PDLSC在维持牙周膜功能稳定、修复牙源组织损伤和实现功能     

NaF与H2O2对大鼠真皮成纤维细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的： 比较不同剂量的氟化钠（NaF）与过氧化氢（H₂O₂）对成纤维细胞表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探索促进VEGF表达的简单有效的方法,为优化组织工程真皮培养条件提供理论参考。方法： 酶消化法分离大鼠皮肤成纤维细胞,以不同剂量NaF（0.05和0.50 mmol/L ）、H₂O₂（10 nmol/L和10μmol/L）以及两者联合（NaF 0.05 mmol/L H₂O₂ 10 μmol/L）分别作用于成纤维细胞,在第0、24及48 h采用CCK-8法测定细胞的增殖活性,在第48小时采用ELISA法和免疫组织化学法测定其对VEGF表达的影响。结果：不同剂量NaF、H₂O₂ 以及两者联合作用对成纤维细胞增殖无抑制作用,与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);NaF实验组和实验组的VEGF表达量均明显提高,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),而NaF与H2O2两者联合作用效果最为明显,可提高40%（P<0.05）。结论： NaF与H2O2联合作用能在不影响成纤维细胞正常增殖的前提下,有效地促进VEGF的表达。