黄芪对心肌成纤维细胞增殖及分泌转化生长因子-β1的影响#br#

目的观察黄芪注射液对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞分泌转化生长因子(TGF-β1)的影响。方法体外培养乳鼠心脏成纤维细胞并制成单细胞悬液,分为对照组,黄芪低、中、高剂量组,AngⅡ组,AngⅡ联合黄芪低、中、高剂量组,分别加入50、100、200 mg/ml黄芪注射液,以及10-7 mol/L AngⅡ,共同培育2 d。用四甲基偶氮哇盐法测定各组细胞增殖情况,ELISA法测定培养上清TGF-β1分泌情况。结果各组间细胞增殖率差异有统计学意义(F=71.84,P=0.000);AngⅡ组的细胞增殖率明显升高,与其余各组比较均有统计学意义(P均<0.05);AngⅡ联合黄芪后,随着黄芪剂量的逐渐增加,细胞增殖率逐渐下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组间TGF-β1分泌量差异也有统计学意义(F=786.81,P=0.000);黄芪低、中、高剂量组的TGF-β1分泌量均低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);AngⅡ组的TGF-β1分泌量为各组中最高,与其余各组比较均有统计学意义(P均<0.05);AngⅡ联合黄芪后,随着黄芪剂量的逐渐增加,TGF-β1分泌量逐渐下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 AngⅡ可刺激心肌成纤维细胞增殖,促进心肌成纤维细胞分泌TGF-β1,而黄芪注射液可明显抑制AngⅡ诱导心肌成纤维细胞的增殖作用,并且减少心肌成纤维细胞分泌TGF-β1。     

骨髓间充质干细胞对损伤心肌细胞的影响及与Wnt/β-catenin信号通路的关系

目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)在治疗损伤心肌细胞中的分子机制,明确Wnt/β-catenin信号通路是否在其发挥着作用。方法分离、鉴定并培养心肌细胞72 h后分为3组,A组为正常心肌细胞组、B组为阿霉素损伤组(1 mg/L阿霉素作用心肌细胞4 h建立)、C组为MSCs与损伤心肌细胞共培养组,继续培养72 h后,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡,应用Western blot法检测β-catenin、c-Myc、p53蛋白的表达。结果阿霉素损伤组的心肌细胞凋亡率为(26.58±3.89)%,对照组为(0.74±0.65)%,MSCs与损伤心肌细胞共培养组为(7.72±0.90)%,差异有统计学意义(F=98.13,P0.001)。经两两比较发现,阿霉素损伤组的凋亡率高于对照组;而共培养组凋亡率低于阿霉素损伤组,差异均有统计学意义(P0.05)。阿霉素损伤组的β-catenin、c-Myc及p53蛋白表达水平均高于MSCs与损伤心肌细胞共培养组,两组间差异均有统计学意义(P均0.01);对照组上述3种蛋白表达不能测出。结论 MSCs可抑制阿霉素诱导的心肌细胞凋亡,其分子机制可能与Wnt/β-catenin通路的抑制有关。     

新生大鼠缺氧缺血性脑病中miRNA表达谱的改变及分析

目的 通过基因芯片检测新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIE)模型中差异性表达miRNA,构建HIE中miRNA及其靶基因调控网络。方法 将7 d龄新生SD大鼠12只随机分为HIE组及假手术对照组,每组6只。采用Rice法建立新生大鼠HIE模型,造模24 h取新生大鼠海马组织,基因芯片检测HIE组和假手术对照组海马组织中差异性表达的miRNA,采用生物信息软件分析相关miRNA调控的靶基因及信号通路。结果 筛选出差异性表达的miRNA共22个,其中表达上调9个(mmu-miR-215-5p, mmu-miR-1249-3p, mmu-miR-3072-5p, mmu-miR-324-3p, mmu-miR-690,mmu-miR-874-5p, 11＿10767,11＿10888,13＿12928＿star)、表达下调共13个(mmu-miR-141-3p, mmu-miR-182-5p, mmu-miR-183-5p, mmu-miR-190a-3p, mmu-miR-200a-3p, mmu-miR-200b-3p, mmu-miR-200c-3p, mmu-miR-429-3p, mmu...