液相色谱-质谱技术对利妥昔单抗及其类似药结构表征和相似性的研究

目的 应用液相色谱-质谱法(liquid chromatography-mass spectromety,LC/MS)和液相色谱-非数据依赖二级质谱数据采集技术(liquid chromatography-data independent acquisition mass spectromety,LC/MSE)对利妥昔单抗及其类似药进行结构表征和相似性研究.方法 用LC/MS对利妥昔单抗及其类似药的完整蛋白及轻链和重链的相对分子质量进行测定;用基于LC/MSE的肽图分析确定利妥昔单抗及其类似药的氨基酸全序列;用LC/荧光检测法分析利妥昔单抗的糖基化修饰结构及相对含量.结果 LC/MS可准确测定利妥昔单抗的相对分子质量.基于LC/MSE的肽图分析显示,利妥昔单抗的氨基酸序列覆盖率＞99％.LC/荧光检测法对利妥昔单抗的糖谱分析具有较好的重复性.利妥昔单抗类似药与原研药的相对分子质量和糖型信息相符、氨基酸序列完全一致、糖谱相似.结论 LC/MS和LC/MSE可用于利妥昔单抗及其类似药的结构表征和相似性比较,这为今后其他单克隆抗体结构表征平台的建立提供了依据.     

利妥昔单抗及其生物类似药的杂质分析

目的  对利妥昔单抗原研药和类似药的产品相关杂质和工艺相关杂质进行分析。方法 用分子排阻高效液相色谱法（size-exclusion high-performance liquid chromatography,SE-HPLC）、毛细管电泳和离子交换高效液相色谱法（ion-exchange high-performance liquid chromatography,IEX-HPLC）对原研药和类似药的产品相关杂质进行分析。同时对类似药的电荷异质体进行纯度和生物活性鉴定。采用ELISA和定量PCR对原研药和类似药的工艺相关杂质进行分析。结果 SE-HPLC分析表明,原研药和类似药中抗体单体分别占98.9%和99.9%,聚合体分别占1.0%和0.1%。毛细管电泳显示,原研药中相对分子质量低的杂质占5.6%,类似药中占3.3%;原研药和类似药中非糖基化重链均占0.6%。IEX-HPLC分析表明,原研药酸性峰和碱性峰含量分别为21.0%和10.0%,类似药分别为17.7%和9.1%。类似药主峰组分的纯度和补体依赖的细胞毒性均高于酸性峰组分和碱性峰组分。原研药和类似药中的宿主细胞蛋白、宿主细胞DNA及蛋白A的残留量相似,且大多低于检测限。结论 利妥昔单抗原研药和类似药产品相关杂质和工艺相关杂质的类别和水平相似。     

血管内皮生长因子及其靶向治疗

血管新生在胚胎发育、器官形成、伤口愈合及其他正常生理过程中具有非常重要的作用.此外,在一些病理过程中也涉及血管生成,这些病理过程包括肿瘤的生长与转移、糖尿病引起的视网膜病变、年龄相关性黄斑变性、类风湿关节炎以及银屑病等.研究表明血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在正常生理和病理性血管形成中起着非常重要的作用.因此,VEGF靶向治疗已成为肿瘤及相关疾病治疗的重要策略.     

抗新型冠状病毒中和抗体研究进展

自首次报道以来,新型冠状病毒（2019 novel coronavirus,2019-nCoV）引起的新型冠状病毒肺炎已迅速在全球传播。2019-nCoV感染可引起严重肺炎,危及患者生命,目前尚无特效药物。2019-nCoV刺突蛋白及其受体血管紧张素转化酶2的结构已获得解析,为药物的开发提供了基础。通过人外周血单B细胞抗体筛选技术及其他抗体筛选技术,已获得多种针对2019-nCoV的中和抗体。抗体药物的开发为新型冠状病毒肺炎的预防和治疗提供了新的选择。此文简要综述抗2019-nCoV抗体类药物的研究开发。