小窝蛋白-1对人甲状腺上皮细胞增殖、凋亡及胞内活性氧水平的影响

目的: 探讨小窝蛋白-1（Caveolin-1）对人甲状腺上皮细胞系Nthy-ori 3-1增殖、凋亡和胞内活性氧产生的影响。方法: 将正常人甲状腺上皮细胞（Nthy-ori 3-1）分为实验组和阴性对照组,分别转染 Caveolin-1敲减病毒上清液以及阴性对照病毒上清液,以未转染的Nthy-ori 3-1细胞为空白对照组,应用嘌呤霉素筛选出阳性细胞,qRT-PCR和蛋白质印迹检测3组细胞Caveolin-1的mRNA和蛋白表达;MTT 法检测Caveolin-1敲减后细胞增殖能力变化;流式细胞术检测Caveolin 1敲减后细胞的凋亡率;荧光探针DCFH-DA法检测Caveolin-1敲减后细胞内活性氧水平。结果： Caveolin 1抑制性慢病毒感染后,Nthy-ori 3-1细胞Caveolin 1 mRNA和蛋白水平均显著降低（P均<0.01）。抑制Caveolin-1表达后,Nthy-ori 3-1细胞增殖能力较阴性对照组明显降低,凋亡率明显增加,细胞内活性氧水平明显升高（P 均<0.01）。结论： Caveolin-1表达降低通过增加胞内活性氧水平和细胞凋亡,抑制细胞增殖,介导甲状腺上皮细胞损伤。     

嗜酸粒细胞趋化蛋白-2血清含量对结直肠癌的诊断价值

目的:探讨嗜酸粒细胞趋化蛋白-2（eosinophil chemotactic protein 2,eotaxin 2）的血清含量对结直肠癌的诊断价值。方法:选取2020年1月至2021年2月在江苏大学附属医院胃肠外科就诊的结直肠癌患者50例作为研究对象,另选取同期健康体检者40例作为对照组。酶联免疫吸附实验（ELISA）检测结直肠癌患者及对照组血清中eotaxin-2的含量。分析血清eotaxin-2含量与结直肠癌患者临床病理参数的相关性。绘制受试者工作特征（ROC）曲线并分析血清eotaxin-2对结直肠癌的筛查效能。结果:结直肠癌患者血清中eotaxin-2的含量明显高于健康对照组（Z=-3.93,P<0.01）；血清eotaxin-2含量与结直肠癌患者淋巴转移、远处转移及TNM分期相关（P均<0.01）,而与患者的性别、年龄、肿瘤类型、瘤体大小无明显关系（P均>0.05）；血清eotaxin 2诊断结直肠癌的ROC曲线下面积为0.742（95% CI为0.639~0.845,P<0.01）,诊断敏感性为68.0%,特异性为77.5%。结论:结直肠癌患者血清eotaxin-2含量显著升高,有望成为结直肠癌诊断的生物学标志物。     

日本血吸虫热休克蛋白60通过诱导CD4+CD25+Treg 细胞表达IL?10和TGF?β增强其免疫抑制功能

目的 探讨日本血吸虫热休克蛋白60（SjHSP60）增强小鼠CD4+CD25+调节性T细胞（Treg）免疫抑制功能的可能机制。 方法 采用体外研究探索SjHSP60对Treg细胞功能的影响,通过体外细胞增殖实验检测SjHSP60促进Treg细胞免疫抑制功能增强的途径,利用流式细胞术检测Treg细胞表达IL?10和TGF?β的水平以及Treg细胞Foxp3和CTLA?4表达水平。 结果 体外实验证实,SjHSP60可增强Treg细胞的免疫抑制功能（t = 6.466,P = 0.006）;体外细胞增殖实验表明,SjHSP60刺激后的Treg细胞可通过分泌可溶性细胞因子IL?10（t = 7.363,P = 0.002）和TGF?β（t = 11.262,P = 0）发挥免疫抑制功能;流式细胞术检测显示,SjHSP60刺激后的Treg细胞IL?10（t = 12.367,P = 0）、TGF?β（t = 8.431,P = 0.001）、Foxp3（比例：t = 5.225,P = 0.006;平均荧光强度：t = 8.319,P = 0.001）和CTLA?4（比例：t = 3.518,P = 0.024;平均荧光强度：t = 4.164,P = 0.014）表达水平显著增加。 结论 SjHSP60可通过促进Treg细胞表达IL?10和TGF?β增强其免疫抑制功能,并可能与SjHSP60诱导Treg细胞表达Foxp3和CTLA?4有关。     

髓相关蛋白14过表达对人甲状腺上皮细胞增殖的影响

目的: 探讨髓相关蛋白14（myeloid related protein 14,MRP14）过表达对人甲状腺上皮细胞增殖及分泌甲状腺激素的影响。方法: 免疫组织化学染色方法检测 MRP14蛋白在单纯性甲状腺肿和桥本甲状腺炎（HT）患者甲状腺组织中的表达;将MRP14基因过表达质粒pcDNA3.1 MRP14或对照质粒pcDNA3.1瞬时转染入人甲状腺滤泡上皮细胞Nthy-ori 3-1,构建MRP14过表达甲状腺滤泡上皮细胞系;转染48 h后收集细胞及培养上清液,实时定量PCR检测 MRP14的转染效果;MTT法检测细胞增殖,化学发光免疫法检测细胞培养上清液中游离甲状腺素（FT4）浓度。结果： 与单纯性甲状腺肿患者相比,桥本甲状腺炎患者甲状腺组织中MRP14蛋白表达明显增多;MRP14基因转染成功后,MRP14过表达组Nthy-ori 3-1细胞存活率较对照组明显降低（P＜0.01）,培养上清液中 FT4浓度较对照组明显降低（P＜0.01）。结论： 成功构建MRP14过表达甲状腺滤泡上皮细胞系;MRP14蛋白可能通过抑制甲状腺细胞增殖和甲状腺激素的分泌参与桥本甲状腺炎的发生发展。     

长链非编码RNA ELFN1-AS1在结直肠癌患者血清中的表达及临床意义

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)ELFN1-AS1在结直肠癌患者血清中的表达及临床意义.方法 选取50例未予手术和放化疗治疗的结直肠癌患者作为结直肠癌组,另选取40例健康志愿者作为对照组;提取两组研究对象血清总RNA,实时定量PCR法检测结直肠癌组和对照组血清中lncRNA ELFN1-AS1相对表达水平;分...     

人脐带间充质干细胞源胞外囊泡促进施万细胞增殖和迁移

目的: 探讨人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUCMSCs）源胞外囊泡（extracellular vesicles,EVs）对施万细胞增殖和迁移的影响。方法: 应用高速离心法从hUCMSCs上清液中分离和纯化EVs（hUCMSC-EVs）,透射电镜观察EVs形态特征;蛋白质印迹法检测EVs标志性蛋白CD63和CD9的表达;通过CCK-8和Transwell小室实验检测不同浓度的hUCMSC-EVs对施万细胞增殖和迁移能力的影响;共聚焦显微镜观察原代施万细胞对EVs的内吞。结果： hUCMSC-EVs呈圆形或椭圆形,且表达特异性分子标志物CD9和CD63;与对照组相比,hUCMSC-EVs显著促进施万细胞增殖和迁移（P均<0.05）;hUCMSC EVs与施万细胞孵育后细胞膜融合。结论： hUCMSC-EVs可显著促进施万细胞的增殖和迁移且呈浓度依赖。     

人脐带间充质干细胞培养上清液对甲状腺乳头状癌细胞诱导人脐静脉内皮细胞血管形成的影响

目的: 探讨人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs）对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1诱导人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVEC）血管形成的作用。方法: 使用不同浓度的hUCMSCs培养上清液（hUCMSC-CM）刺激甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1;采用基质胶小管形成实验检测经hUCMSC-CM作用后的TPC-1细胞对HUVEC血管形成的影响;CCK-8法检测hUCMSC-CM对TPC-1细胞增殖能力的影响;实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法、酶联免疫吸附实验（ELISA）分别检测经hUCMSC-CM作用后的TPC-1细胞中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）的mRNA和蛋白表达及其培养上清液中VEGF的含量。结果： 与对照组相比,hUCMSC-CM可显著抑制TPC-1细胞的增殖（P<0.05和P<0.01）;经hUCMSC-CM刺激后的TPC-1细胞诱导HUVEC血管形成能力显著下调（P<0.001）,且TPC-1细胞中VEGF的mRNA和蛋白表达水平均显著降低（P<0.001）,其培养上清液中VEGF含量显著降低（P<0.05）。结论： hUCMSC-CM可显著下调TPC-1细胞中VEGF的表达及分泌,抑制TPC-1细胞诱导HUVEC血管形成的能力。     

治疗自身免疫性疾病多肽药物的研究进展

近年来研究发现,靶向于特异表位的多肽药物治疗自身免疫病,可避免传统药物的非特异性免疫抑制,在自身免疫病动物模型及临床试验中显示出较好的治疗效果。该文从抑制自身免疫反应的候选多肽来源及其作用机制等方面,综述了近年来治疗自身免疫病多肽药物的研究进展和趋势,为全面深入了解自身免疫病免疫耐受机制及寻求新的治疗方法提供理论依据。     

性别对日本血吸虫感染过程中滤泡辅助性T细胞比例和活性影响的初步分析

目的 目的 研究性别对日本血吸虫感染过程中滤泡辅助性T （Tfh） 细胞的数量和功能的影响。方法 方法 选择安徽省池 州市血吸虫病流行区的血吸虫病患者50例, 以及来自该市非流行区的健康对照50名。采集上述研究对象外周血, 采用 流式细胞术检测不同性别日本血吸虫病患者和健康志愿者外周血中总Tfh细胞、 ICOS+ Tfh细胞和PD?1+ Tfh细胞的比例, 并进行比较分析。 结果 结果 与健康男性及女性对照相比, 男、 女性血吸虫病患者外周血中的总Tfh细胞比例 （U男= 149.0、 U女 = 39.5, P均< 0.01）、 ICOS+ Tfh细胞比例 （t男 = 5.9, t女 = 7.7, P均< 0.01）、 PD?1+ Tfh细胞比例 （t男 = 3.2、 t女 = 5.9, P均< 0.01） 均升高, 差异均有统计学意义。进一步分析发现, 与男性患者相比, 女性患者外周血中的总Tfh细胞比例 （U = 187.5, P < 0.05）、 ICOS+ Tfh细胞比例 （t = 3.2, P < 0.05）、 PD?1+ Tfh细胞比例 （t = 3.0, P < 0.05） 均升高, 差异均有统计学意义。结论 结论 在日本血吸虫感染过程中, 性别因素可能在Tfh细胞的产生和活化中发挥了重要的作用。