结核性胸膜炎患者外周血和胸水中Th17、Th1细胞检测分析

目的 探讨结核性胸膜炎患者Th17、Th1细胞免疫应答的特性及作用。方法 应用流式细胞术检测30例健康对照组（HD）、23例潜伏感染组（LTBI）、20例结核性胸膜炎组(TP) 患者外周血单个核细胞（PBMC）与胸水单个核细胞（PFMC）Th17、Th1细胞的变化情况。结果 结核性胸膜炎患组外周血非特异性Th17和Th1细胞百分比分别为（2.81±0.94）和（27.85±11.02）,低于健康对照组（4.63±1.63）、（36.34±9.39）和潜伏感染组（4.13±1.91）、（42.37±13.87）,差异有统计学意义（P<0.001,P<0.05）;结核性胸膜炎患者胸腔积液PFMC的非特异性Th17细胞百分比为（1.85±1.34）,低于外周血PBMC的（2.81±0.94）,差异有统计学意义(P<0.01);同时PFMC结核菌特异性Th17、Th1细胞的百分比分别为（0.68±0.13）和（6.91±1.16）,高于PBMC（0.25±0.11）和（1.98±0.56 ）,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.001)。结论 结核性胸膜炎患者外周血非特异性Th17、Th1细胞应答及感染局部Th17的非特异性应答反应均受到抑制;感染局部特异性Th17、Th1应答处于高水平状态;Th17、Th1细胞应答在结核性胸膜炎的发病中发挥重要作用。     

Elispot检测抗原特异性IFN-γ反应在肺外结核诊断中的应用价值

目的 评价酶联免疫斑点(Elispot)检测外周血中结核分枝杆菌性抗原特异性γ干扰素(IFN-γ)水平在肺外结核诊断中的价值.方法 利用Elispot技术分别对24例肺外结核患者(肺外结核组)和97健康对照(对照组)外周血中产生结核菌抗原特异性IFN-γ的水平进行定量检测.对其中20例肺外结核病人和20例健康者同时采用澳大利亚CELLESTIS公司生产的全血干扰素试剂(OFT-G)进行IFN-γ分泌水平的平行检测.结果 肺外结核组中IFN-γ水平和应答的阳性率显著高于对照组(P＜0.05);Elispot、QFT-G检测肺外结核组和健康者的反应阳性率分别是:76.1%、84.2%,健康者中分别为10%、20%;两种方法检测结果没有统计学差异(X2=1.1250,p＞0.05).结论 Elispot试剂的检测结果与QFT-G基本一致,可用于肺外结核的辅助诊断.     

结核分枝杆菌IFN-γ酶联免疫斑点检测在结核诊断中的应用

目的采用结核分枝杆菌特异性IFN-γ酶联免疫斑点（简称Elispot）检测技术对不同的人群进行检测,评价其在结核诊断中的应用情况。方法290例结核病人（结核组）,其中肺结核221例中痰抗酸染色（AFB）阳性者89例,AFB阴性者132例;同时选取133例健康志愿者为健康组。采用自行建立的Elispot技术对2组外周血结核菌特异性IFN-γ水平进行检测;对11例结核病人和10例健康者同时采用T-SPOT.TB试剂盒进行平行检测。结果Elispot反应阳性率结核组为83.79%,显著高于健康组的16.54%（P〈0.001）;AFB（＋）肺结核病人阳性率为89.89%,AFB（—）肺结核病人阳性率为81.06%,两者差异无显著性意义（P〉0.05）。T-SPOT.TB与Elispot平行检测阳性率比较,差异无显著性意义（P〉0.05）。结论结核菌特异性IFN-γElispot检测技术在结核诊断中显示出较好的特异性和敏感性,可作为临床结核病诊断的辅助手段。     

结核分枝杆菌潜伏感染早期两种检测方法的比较分析

目的比较结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）特异性IFN-γ酶联免疫斑点法（Elispot）和结核菌素皮试（TB—PPD皮试）在MTB潜伏感染早期诊断的优异。方法采用自主研制的Elispot试剂盒（简称Elispot）对100例健康志愿者进行检测,并和TB—PPD皮试进行平行比较。结果100例健康志愿者中有50例TB—PPD皮试阳性（占50％）,Elispot检测阳性20例（占20％）。两种方法检测结果差异有统计学意义（x^2=20．45,P〈0．005）。结论MTB特异性IFN-γ Elispot试剂盒在健康人群中检测阳性率比传统的TB-PPD皮试要低,Elispot检测体外IFN-γ 应答反应在诊断MTB潜伏感染的价值优于TB—PPD皮试,在MTB潜伏感染早期诊断有较好的发展前景。     

涂阳活动性肺结核患者HRCT评分与细菌学及免疫学相关性分析

目的探讨HRCT评分标准在诊断活动性肺结核中的应用价值。方法对42例痰涂阳性肺结核患者,进行HRCT检查和评分,每侧肺组织划分为为三个区域,分别对各类型CT征象所累及范围进行评分;分析评分结果与痰细菌学检查结果和外周血结核菌特异性IFN—y水平之间的相关性。结果根据结核菌涂片结果分为4组,其中,AFB（＋）12例、AFB（＋＋）11例、AFB（＋＋＋）10例、AFB（＋＋＋＋）9例,相关性分析显示（1）HRCT总评分与痰阳性分级有正相关性（r=0．9661 P〈0．0001）：（2）HRCT总评分与结核菌抗原ESAT6、P4-6、P8．10特异性IFN—y释放水平均呈正相关（r=0．4805,P=0．0017,r=0．4451,P=0．0083,r=0．4211,P=0．0131）。结论以活动性肺结核患者复杂的CT征象的范围为基础的HRCT评分标准与细菌学及免疫学均呈正相关,表明该HRCT评分标准对临床诊断治疗和疗效判定具有一定指导意义。     

深圳市2013年门诊结核病人流行病学调查分析

目的了解深圳市门诊结核病流行情况,分析现有临床检查对于在临床结核诊断中的应用情况。方法收集深圳市第三人民医院2013年1月至2013年12月就诊肺科门诊的病人的各项检查结果资料,回顾性分析各项诊断指标对结核病人诊断中的实际应用价值和效果。结果 2013年深圳市第三人民门诊病人为7726例,门诊诊断为结核病4378,阳性率为56.5%。其中3842例诊断为肺结核病人,各项检查结果阳性率分别为:痰培养27.2%,痰涂片10.6%,结核杆菌PCR 18.8%,结核杆菌抗体测定58.3%,IFNγELISPOT检测53.2%。536例诊断为肺外结核确诊病人,各项检查结果阳性率分别为:痰培养21%,痰涂片7.6%,结核杆菌PCR 13.8%,结核杆菌抗体测定62.2%,IFNγELISPOT检测63.1%。肺外结核病人中,按不同感染部位进行分类,结核杆菌抗体测定和IFN-γElispot检测仍然有较高的检出率。结论各项实验室检查只能为医生对结核病诊断提供一个参考初筛。面对大量门诊病人和各种疾病,还需要医生结合病情作出诊断。     

肺结核患者外周血单个核细胞中CD32和CD64的表达及意义

目的检测CD32和CD64在肺结核患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,探讨其在结核病发病中的作用及诊断价值。方法应用Illumina Solexa高通量测序技术和荧光定量PCR检测健康者(HD),结核潜伏感染者(LTBI)和肺结核患者(TB)PBMC中CD32和CD64的表达情况。结果肺结核患者PBMC CD32和CD64表达明显高于健康人和结核潜伏感染者。结论肺结核患者PBMC高表达CD32和CD64,CD32和CD64可能在抗结核免疫中起到重要作用。     

结核患者外周血PBMC中T-bet和Eomes表达的检测

目的初步探讨T-bet和Eomes的表达与结核病发生的关系。方法分析比较结核患者(TB)与健康对照(HC)、结核菌潜伏感染者(LTBI)以及细菌性肺炎患者(PN)外周血PBMC中T-bet和Eomes的m RNA表达水平,并观察结核患者在抗结核治疗前及抗结核治疗3、6、9和12个月后,外周血PBMC中T-bet和Eomes的m RNA表达水平的变化。结果结核患者(TB)外周血PBMC中T-bet和Eomes的m RNA表达水平显著低于健康对照(HC)、结核菌潜伏感染者(LTBI)以及细菌性肺炎患者(PN)(P0.05)。同时,在抗结核治疗12个月后,T-bet的表达水平较治疗前显著升高(P0.05),Eomes的表达水平较治疗前升高,但差异无统计学意义(P0.05)。结论 T-bet和Eomes两个基因表达水平的下降可能与结核病的发生有关。     

活动性肺结核患者支气管肺泡灌洗液免疫细胞分析

目的 探讨活动性肺结核患者的免疫功能状态,为临床免疫治疗提供理论依据。方法 收集活动性肺结核患者35例,并根据年龄、镜下分型和支气管CT评分对上述患者进行分组,同期选择12例健康志愿者作为健康对照组,分析两组研究对象支气管肺泡灌洗液T细胞、CD4细胞、CD8细胞、单核细胞和B细胞比例的差异。结果 活动性肺结核患者的CD4细胞和CD8细胞的比例分别为（54.76±17.44）%和（41.24±15.65）%,与健康对照组的（65.43±10.00）%和（32.3±8.69）%比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。活动性肺结核组单核细胞比例（9.38±8.1）%高于健康对照组（2.15±2.52）%,差异有统计学意义（P<0.05）。与健康对照者相比,炎性浸润型患者和瘢痕狭窄型患者的CD4细胞比例降低,CD8细胞比例升高,CD4细胞/CD8细胞降低,且具有统计学意义（P<0.05）,另外,炎性浸润型患者的单核细胞高于健康对照者（P<0.05）。溃疡坏死型患者的单核细胞和B细胞均高于健康对照者（P<0.05）;CT评分高的组单核细胞比例显著高于低CT评分组（P<0.05）。结论 支气管肺泡灌洗液免疫细胞水平的检测有助于阐明肺结核的免疫致病机理,同时也可为临床免疫治疗提供理论依据。     

结核患者治疗过程中外周血T细胞和B细胞亚群的动态变化

目的 探讨T和B细胞及其各亚型淋巴细胞的数量在结核患者治疗过程中的动态变化,为抗结核疗效判断提供理论依据。方法 纳入对象包括40例活动性结核患者、65例结核潜伏感染者、94例健康对照者。以流式细胞术检测外周血CD3⁺T细胞、CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD8⁺T细胞的绝对计数,CD19⁺B细胞百分比及绝对数和B细胞各亚群的百分比。结果 治疗前活动性结核患者、健康对照者和潜伏感染者CD3⁺细胞绝对计数和百分比例分别为（796±243）个/μL和（68.35±8.94）%、（1 213±449）个/μL和（65.58±6.07）%、（1 391±538）个/μL和（66.75±6.54）%;CD3⁺CD4⁺分别为（438±153）个/μL和（37.91±7.47）%、（630±254）个/μL和（38.88±6.06）%、（709±242）个/μL和（34.62±3.79）%;CD3⁺CD8⁺T分别为（280±112）个/μL和（23.83±7.33）%、（456±208）个/μL和（23.51±6.52）%、（530±253）个/μL和（25.01±5.90）%;CD19⁺B细胞绝对计数和百分比例分别为（111±50）个/μL和（7.32±2.96）%、（163±69）个/μL和（7.91±2.95）%、（188±99）个/μL和（8.59±3.96）%。治疗前活动性结核患者CD3⁺T、CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD8⁺T细胞的绝对计数比健康对照者和潜伏感染者均低,差异均有统计学意义（P<0.001）。活动性结核患者治疗前、治疗3个月和6个月CD3⁺、CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺T细胞绝对计数和百分比例稍增加,但差异无统计学意义（P>0.05）。结核患者未成熟B细胞及记忆性B细胞较健康者及潜伏感染者比较均减少,差异有统计学意义（P<0.05）。结核患者外周血初始B细胞较潜伏感染者增加,差异有统计学意义（P<0.01）,与健康者比较无差异。结核患者外周血浆细胞较健康者比较增加,差异有统计学意义（P<0.05）。结核患者治疗3月记忆性B细胞明显增加,差异有统计学意义（P<0.001）。结核患者治疗过程中,浆细胞进行性减少,差异有统计学意义（P<0.001）。结论 结核患者外周血T、B细胞稳态被打乱,随肺结核患者的治疗及治疗时间的延长,被破坏的T、B细胞稳态将逐渐恢复,动态观察T、B细胞亚群的变化对结核病的诊断和疗效转归的判断有一定的指导意义。