抗Pgp/抗CD3双特异双链抗体的生物学活性研究

目的　研究抗Pgp 抗CD3双特异双链抗体介导的特异性靶向杀伤活性。方法　采用亲和层析法分离纯化本室构建的抗Pgp 抗CD3双特异双链抗体可溶性表达产物 ,并用SDS PAGE、Westernblot及抗活细胞间接免疫荧光法鉴定纯化产物 ;采用51 Cr释放试验测定其介导的体外靶向杀伤活性。结果　纯化的抗Pgp 抗CD3双特异双链抗体具有与Jurkat细胞 (CD3 )和K5 6 2 A0 2 (Pgp )细胞结合的活性 ;抗Pgp 抗CD3双特异双链抗体具有介导激活的T淋巴细胞杀伤Pgp表达阳性的耐药肿瘤细胞的作用 ,杀伤作用的强弱显示出效靶比和剂量依赖关系 ,且可被CD3ScFv或PgpScFv特异性的阻断。结论　抗Pgp 抗CD3微型双功能抗体有望成为治疗耐药肿瘤 ,特别是肿瘤残留灶和微小转移灶的治疗的一种新策略。     

NEOPLASMS

Objective: Using monoclonal antibody PHMA02, we determined the expression of Pgp in 148 patients with cancers. The specificity of PHMA02 concordance rate between detectability and clinical outcome and accuracy of prognosis were evaluated.     

氯霉素通过线粒体途径诱导白血病多药耐药细胞凋亡

多药耐药（MDR）是影响白血病治疗效果的主要障碍,因耐药机制的复杂性或耐药逆转药物临床应用的不良反应,致使目前尚未解决这一难题.研究发现多药耐药细胞可以阻断半胱天冬酶（caspase）途径介导的细胞凋亡，而线粒体介导途径可以绕过线粒体以上的耐药作用位点，完成凋亡过程。我们初步研究发现，线粒体蛋白合成抑制剂氯霉素具有抑制白血病细胞及白血病多药耐药细胞生长及周期阻滞作用，为此我们探讨了氯霉素诱导白血病多药耐药细胞凋亡的作用及其机制。     

白血病患者多药耐药相关蛋白基因和多药耐药基因mdr1的表达及其临床意义

应用半定量逆转录－多聚酶链反应技术检测了２９例白血病患者骨髓细胞中多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因的表达，同时用间接免疫荧光法检测了每例患者的Ｐ糖蛋白（Ｐｇｐ）的表达。发现临床耐药组Ｐｇｐ过度表达占４５．５％，ＭＲＰ过度表达占６３．６％；临床不耐药组分别占５．５６％和１６．６７％。根据上述结果提出了多药耐药的判断标准并应用临床流行病学方法对该标准进行了评价     

089 银杏提取物EGb 761对大鼠肝细胞色素P450及对大鼠和人类固醇代谢和排泄的影响

一些对大鼠的体内、体外试验显示，服用银杏提取物可能影响肝的异生物体代谢和引起药物相互作用，而在人体试验未获得该提取物能调节细胞色素P450（CYP450）酶活性的证据。     

3种紫杉醇衍生物的细胞毒、抗病毒和免疫调节活性以及对细胞有丝分裂的影响

作者研究了3个紫杉醇衍生物，即10-去乙酰基-浆果赤霉素Ⅲ（1）、甲基[N-苯甲酰基-（2’R，3’5）-3’-苯基异丝氨酸酯]（2）和N-苯甲酰基-（2’R，3’5）-3-苯基丝氨酸（3）的细胞毒、体内外抗病毒和免疫调节活性，以及对细胞有丝分裂的影响。     

白细胞介素6的信号传导机制及临床前相关研究进展

白细胞介素６（ＩＬ－６）是一种具有广泛生物学活性的多功能细胞因子，能在造血干细胞分化，机体免疫调节，应激反应及防御系统中起关键作用。本文着重介绍了ＩＬ－６的信号传导途径以及它在多发性骨髓瘤的发生中的作用机制，提示ＩＬ－６在临床上具有潜在的应用价值。     

PHⅡ-7 作用于慢性粒细胞白血病细胞k562 的机制研究(摘要)

目的： PHⅡ-7是以靛玉红为模板合成的一种抗肿瘤药物,并有显著逆转耐药作用。实验室前期研究发现在人慢性粒细胞白血病k562细胞中,PHⅡ-7可与烯醇化酶ENO1相结合。本研究旨在探究PHⅡ-7通过ENO1对k562细胞体外抑癌作用机制。方法构建ENO1表达稳定干扰细胞株k562-shENO1和对照细胞株k562-shCON。通过MTT法检测PHⅡ-7对k562-shCON和k562-shENO1细胞株的生长抑制作用;通过细胞计数法检测k562-shCON和k562-shENO1细胞株生长差异;采用流式细胞仪测定细胞凋亡水平。采用逆转录PCR,实时荧光定量PCR和免疫印迹技术检测相关基因表达水平。结果通过real-time-PCR和免疫印迹实验验证k562-shCON和k562-shENO1干扰细胞株成功建立。k562-shENO1和k562-shCON细胞株体外生长无显著差异,PHⅡ-7对k562-shENO1和k562-shCON细胞株IC50无显著性差异。PHⅡ-7可诱导k562-shENO1和k562-shCON细胞株凋亡,并可激活caspase3、caspase9和PARP等凋亡相关蛋白。与k562-shCON相比较,k562-shENO1细胞对高浓度PHⅡ-7诱导凋亡作用更敏感。结论烯醇化酶ENO1与PHⅡ-7在人慢性粒白血病k562细胞中作用密切相关,干扰ENO1表达能在一定程度上增强PHⅡ-7的抑癌作用。     

嵌合抗CD20抗体Fab片段在大肠杆菌中表达及活性鉴定

目的 :构建抗CD2 0 嵌合抗体Fab片段表达载体 ,并在大肠杆菌中进行高效可溶性分泌表达。方法 :利用PCR方法从抗CD2 0 单链抗体 (ScFv)表达载体上扩增抗CD2 0 抗体轻链可变区基因 (VL)、重链可变区基因 (VH) ,然后将VH、VL 基因重组到Fab表达载体pYZF中 ,构建抗CD2 0 Fab表达载体pYZF1cd2 0 ,并在 2 7C7菌中高效表这。结果 :经Fab表达载体转化的 2 7C7菌株 ,进行表达培养 ,经分离纯化获得具有CD2 0 特异结合活性的Fab片段 ,竞争性免疫荧光抑制实验表明 ,表达产物Fab片段能竞争性抑制鼠源性抗CD2 0 抗体HI47和CD2 0 表达细胞Raji细胞结合。结论 :在大肠杆菌中高效可溶性分泌表达有活性的抗CD2 0 嵌合抗体Fab片段。     

靶向肿瘤坏死因子的炎性肠病治疗研究进展

肿瘤坏死因子在介导炎性肠病(IBD),特别是在克罗恩病的炎症过程中发挥着重要作用。现在已有多种以肿瘤坏死因子为靶点的药物用于临床或正在进行临床研究。