miR-3195对人喉癌Hep-2细胞增殖的抑制作用及其机制

目的：探讨miR-3195对喉癌Hep2细胞增殖的影响及其分子机制。方法：选取2008年1月至2012年8月期间在南华大学教学医院郴州市第一人民医院耳鼻喉科收治的29例喉癌患者的喉癌组织及其相应的癌旁组织标本，采用qPCR检测miR-3195在喉癌和癌旁组织中的表达；构建miR-3195在喉癌Hep-2细胞中稳定高表达的细胞株，采用MTT法观察miR-3195稳定高表达组和对照组的增殖情况；建立裸鼠移植瘤模型，观察miR-3195稳定高表达的人喉癌细胞株Hep-2在裸鼠体内增殖的情况。利用生物信息学预测 miR-3195 的靶基因，构建 TBX1 3''UTR 的荧光素酶载体，双荧光素酶检测系统检测其荧光素酶活性；Western blotting检测稳定高表达miR-3195组和对照组细胞株的TBX1蛋白表达水平。结果：miR-3195在喉癌组织中的表达明显低于癌旁组织（P<0.01）；miR-3195上调可抑制Hep-2细胞的增殖（P<0.01），且可明显抑制裸鼠移植瘤瘤体的生长（P<0.05）；双荧光素酶报告基因检测结果表明miR-3195可能与TBX1靶向结合（P<0.05），同时Western blotting法验证了miR-3195能够抑制TBX1蛋白的表达（P<0.05）。结论：miR-3195对Hep2细胞有明显的增殖抑制作用，其分子机制可能与负性调控TBX1的表达有关。