Tie2介导的基因导入系统转导p53基因对肺癌的抑制作用

目的：探讨Tie2介导的基因导入系统体内靶向转导p53基因治疗肺癌的效果。方法：应用双功能交联剂SMCC将Tie2配体寡肽GA3与PEI连接构建靶向Tie2的基因载体。体外试验将GA3-PEI/luciferase导入Tie2表达阳性的SPC-A1肺癌细胞与Tie2表达阴性的SMMC7721肝癌细胞中,24 h后检测luciferase活性。体内导入试验将GA3-PEI/β-gal复合物注射SPC-A1细胞裸鼠种植瘤周围皮下,同时设立PEI/β-gal组为对照;24 h后牺牲裸鼠,检测心、肝、脾、肺、肾和瘤体的β-gal表达。另外将另一批四周龄SPC-A1肺癌种植瘤裸鼠随机分为5组：（1）NS;（2）GA3;（3）p53;（4）PEI/p53;（5）GA3-PEI/p53;每组6只;皮下注射GA3-PEI/p53基因复合物,隔2天1次,并测量肿瘤长短径,计算瘤体积及抑瘤率。结果：GA3-PEI/luciferase组的luciferase活性在SPC-A1细胞中明显高于SMMC7721细胞（P〈0.05）。在种植瘤中可见较多蓝染细胞,心、肝、脾、肾组织中几乎不见篮染,肺支气管黏膜除外。与对照组比较,GA3-PEI/p53治疗组对肿瘤生长有明显抑制作用（P〈0.05）,其抑瘤率为61.29%。结论：GA3基因导入系统靶向转导p53基因,显著抑制肿瘤生长。     

酶免疫测定检测抗乙型肝炎表面抗原的抗体

抗乙型肝炎表面抗原的抗体(抗-HBs)的检测,目前一般应用间接血凝法(PHA)。由于血清中抗-HBs大多滴度很低,因此在实际检测中PHA的敏感性不高,仅为放射免疫测定法(RIA)的50％左右。放射免疫测定需一定的设备和条件,试剂的有效期较短,在临床实验室中难于推广。酶免疫测定(EIA)用于检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、抗表面抗原抗体(抗-HBs)、e抗原(HBeAg)     

用合成肽制备乙型肝炎病毒前S_2抗体及其诊断应用

根据乙型肝炎病毒(HBV)前S_2抗原(Pre S_2)氨基酸顺序合成了P120-145多肽,制备抗血清,用于检测乙肝患者血清中Pre S_2,并研究了与HBV DNA及其他HBV标志物的相关性。结果表明:HBeAg阳性77例,Pre S_2阳性74例(96.1％)。抗HBe IgM及PHSA-r阳性23例,血清Pre S_2阳性19例(82.6％)。HBV DNA阳性26例,血清Pre S_2阳性25例(96.2％)。说明血清Pre S_2阳性可以反映HBV复制。     

染色胶乳RPR方法及试剂制备研究

长期来试图用胶乳放大VDRL试验,但未能常规应用[1]。我们用苏丹黑B染色聚苯乙烯(PS)胶乳取代RPR试验中的活性炭制备检测梅毒非螺旋体(NTP)抗体的过筛试验试剂,取得满意的结果。材料和方法1.染色胶乳及其RPR试剂制备　按乳液聚合法制备PS胶乳[2]。苏丹黑B溶于无水乙醇达饱和,以3000r/min离心15min。上清液在搅拌下逐滴加于热至65℃的胶乳内至染成黑色,冷却。离心如前,沉淀加水悬浮至30%(W/V)固体浓度。按美国疾病控制中心(CDC)标准化方法配制USR抗原[3],在其中加染色胶乳至0.3%,即成染色胶乳RPR试剂。2.染色胶乳RPR试验　按CD…     

染料-USR诊断梅毒的方法和试剂制备研究

自ＶＤＲＬ方法和试剂被确定为梅毒诊断手段以来已历经改良，但各有千秋。我们受Ｇｒｉｂｎａｕ［１］等染料免疫测定法（ｄｙｅｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ，ＤＩＡ）的启示，用纺织染料取代ＴＲＵＳＴ法中价格昂贵的邻甲苯胺红调色剂，对它作了改进，取得较满意的效果。材料...     

染料免疫测定法的研究

对染料免疫测定法（ＤＩＡ）中凝集试验和斑点法的试剂制备进行了探讨，并以梅毒抗体及人绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）的检测为模式，对ＤＩＡ的方法学作了研究。３６份梅毒患者血清及９７份献血员血清的ＤＩＡ结果与参考方法一致，凝集抑制法，直接凝集法和斑点检测ｈＣＧ的灵敏度分别为２ＩＵ／ｍＬ，１ＩＵ／ｍＬ和５ＩＵ／ｍＬ。     

微量固相放射免疫法检测HBeAg

自 Magnius 在 HBsAg 阳性血清中发现 HBeAg 后,HBeAg 在肝研究工作中的重要性日益受到重视。近年来,检测方法的进展很快,除特有的琼脂扩散法外,相继有血凝法、酶联免疫吸附法、放射免疫法的报道,为进一步对 e 本质、临床预后、流行病学的研究等提供了条件。我国对 e 系统的研究,大部分采用免疫扩散法(下称 ID),最近已有血凝法检测 e 抗原的报道。本文报道用微量固相放射免疫法(下称 M-SPRIA)检测 HBeAg,并对实验条件和影响灵敏度的因素作一讨论。     

胰高血糖素抗血清制备与放免测定研究初步报告

以DEAE-SephadexA-50纯化胰高血糖素,用40％PVP-胰高血糖素作免疫原制备抗血清,其滴度为1∶5500,亲和常数K为1.35×10~(12).LM~(-1);应用WhatmanCF-11纤维素粉纯化标记抗原纯度达92％;采用PEG分离系统建立了简便、灵敏的血浆胰高血糖素放射免疫分析法,其可测范围为10～2000pg/ml,批内和批间变异系数4.4％和5.3％;方法回收率102％。20例正常人空腹血浆胰高血糖素均值107.8pg/ml,50例糖尿病患者组空腹血浆胰高血糖素均值193.8pg/ml。     

应用国产~(125)I标记胰高糖素的方法探讨

随着标记工作的广泛开展,尤其是对蛋白质及多肽激素的标记,实践中几乎绝大部分均应用放射性核素~(125)Ⅰ与~(131)Ⅰ。由于这些放射性核素作为标记有二个优点:其一标记具有较高的比度;其二普通放射性实验室均能采用该种简单、易行的标记方法。近年来应用核素~(125)Ⅰ标记的化合物不仅在品种上,而且在数量上越来越多。~(125)Ⅰ衰变过程中放出的γ射线可以用一般井型闪烁仪测量,其半衰期为60天,同位素丰度接近100％,而且标记一次制得的产品使用时间较长。然而采用~(125)Ⅰ标记常会遇到一个棘手的问题——利用国产~(125)Ⅰ源取得稳定的高标记率产品比较困难。我们从1979年5月着手对胰高糖素采用国产~(125)Ⅰ标记的反应条件做了一点研究,初步取得了较好的结果。现总结报道如下。     

银强化金标记免疫吸附剂试验的方法学研究

银强化金标记免疫吸附剂试验（ＳＥＧＬＩＳＡ）是一种新的非酶、非放射性免疫测定法，本文以兔抗ＢＳＡ抗体测定为模式，就它的原理、试剂制备和方法学最佳化等进行了研究，并与ＥＬＩＳＡ作了对比试验。