三唑磷降解的研究进展

随着近年来我国农业上三唑磷使用量的增加,由其带来的环境污染问题也日益突出,因此,三唑磷残留及降解问题成为当前农药污染研究的一个热点.该文从三唑磷的生物降解方面,就其降解菌株的筛选、改造、降解途径等研究内容进行了简明阐述.此外,从水解和光解的角度简述了三唑磷的降解反应动力学和降解机制的研究进展.     

高良姜中的抗白念珠菌化学成分

目的 研究高良姜抗白念珠菌的活性成分。方法 以生物活性追踪结合色谱分离，用纸片扩散法检测抑菌作用，以各种色谱柱层析，包括制备高效液相色谱，得到单体化学成分，用波谱技术鉴定各化合物的结构，测定各化合物的抗菌效价。结果 高良姜三氯甲烷提取物的抑菌活性最强。从三氯甲烷提取物中分离得到6个有抑菌活性的化合物，分别鉴定为2个黄酮类化合物：高良姜素（galangin）和芹菜素（apigenin）；3个二芳基庚烷类化合物：7-（4-羟苯基）-1-苯基-4-烯-3-庚酮、5-羟基-1-（4-羟苯基）-7-苯基-3-庚酮，和1-（4-羟基-3-甲氧基苯基）-7-（4-羟苯基）-3，5-庚醇；1个半日花型二萜类化合物：16-醛-8（17），12-半日花二烯-15酸。结论 抗白念珠菌实验表明，这6个化合物对白念珠菌均有一定的抑菌活性。     

藏药川西獐牙菜的质量标准研究

目的:建立川西獐牙莱药材的质量标准.方法:采用薄层色谱法对川西獐牙菜药材进行定性鉴别,采用高效液相色谱法测定主要活性成分獐牙莱苦苷、芒果苷、当药醇苷和齐墩果酸的含量.色谱柱为Diamonsil C18(4.6 mm ×250 mm,5μm),检测獐芽菜苦苷、芒果苷和当药醇苷的流动相甲醇-0.02％磷酸水(45:55),检测波长254 nm,检测齐墩果酸的流动相乙腈-甲醇-0.2％冰醋酸水(65:15:20),检测波长210 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃.结果:川西獐牙菜药材的薄层色谱鉴别特征明显,专属性强;獐牙菜苦苷、芒果苷、当药醇苷和齐墩果酸的HPLC含量测定线性范围分别为0.075～0.75μg(r=0.999 9),0.05 ～0.5 μg(r=0.999 7),0.032～0.32 μg(r=0.999 3),0.116～11.6 μg(r=0.999 4),平均回收率分别为98.91％ (RSD 0.77％),99.61％ (RSD1.38％),100.35％ (RSD 0.69％),99.26％(RSD 0.40％),并根据10批药材中相应成分的含量初步制定了其含量限度.结论:川西獐牙菜定性定量测定方法简单准确,能够为川西獐牙菜药材的质量控制提供有效依据.     

RNAi抑制PI3Kp85α蛋白活性对人乳腺癌细胞系MCF-7生长抑制的体外研究

目的:探讨敲低PI3Kp85α表达对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞生长的影响和机制.方法:用靶向PI3Kp85α的siRNA转染人乳腺癌细胞系MCF-7,使用Real-time PCR法鉴定转染PI3Kp85α表达水平;MTT法评价PI3Kp85α siRNA对乳腺癌细胞系MCF-7生长的影响;流式细胞术检测转染后细胞周期分布和凋亡;采用免疫荧光染色及Western blot方法观察IA型PI3K/AKT通路主要成员的表达.结果:Real-timePCR结果显示PI3Kp85α siR-NA转染导致PI3Kp85α表达下调;MTT结果显示PI3Kp85α siRNA转染抑制肿瘤细胞生长;流式细胞术检测可见PI3Kp85α siRNA转染组细胞周期存在G_0/G_1期阻滞而且凋亡率显著高于对照组与空载体组(F=19.255,P=0.002).结论:应用PI3Kp85α siRNA转染人乳腺癌细胞系MCF-7细胞,可抑制其增殖和诱导细胞凋亡,因此PI3Kp85α可以作为人乳腺癌基因治疗的候选靶点.     

HPLC法同时测定藏茵陈胶囊中7种有效成分

目的 建立同时测定藏茵陈胶囊中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、芒果苷、当药醇苷、1-羟基-3,4,5-三甲氧基呫吨酮和齐墩果酸的反相高效液相色谱(RP-HPLC)法.方法 采用Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.02％磷酸水溶液,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温为30℃;獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、芒果苷、当药醇苷和1-羟基-3,4,5-三甲氧基呫吨酮的检测波长为254 nm,齐墩果酸的检测波长为210 nm.结果 獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、龙胆苦苷、芒果苷、当药醇苷、1-羟基-3,4,5-三甲基呫吨酮和齐墩果酸分别在2.8～56.0、1.2～24.0、0.6～12.0、2.0～40.0、1.2～24.0、0.6～12.0、12.0～240.0 μg/mL与色谱峰面积呈良好线性关系;加样回收率分别为98.9％、101.2％、96.5％、98.6％、96.9％、97.8％、99.3％,RSD依次为1.14％、1.72％、1.31％、1.25％、1.37％、1.78％、2.23％.结论 该方法简便、准确,重复性好,为藏茵陈胶囊的质量控制提供实验依据.     

乳腺不同级别导管癌和不典型增生病变基因组DNA拷贝数变化及其意义初探

  目的   研究乳腺不同级别导管内癌、浸润性导管癌和不典型增生病变基因组DNA拷贝数的变化,探索从分子遗传学角度解释乳腺癌的发生发展机制。   方法  采用比较基因组杂交技术检测导管上皮不典型增生、高低级别导管内癌和浸润性导管癌45例,以分析其遗传物质的增益和缺失情况,并分析比较共同的染色体异常区段。   结果  低级别癌的染色体平均增益数、缺失数及总的变化数均明显低于高级别癌,但是与浸润性癌之间无显著性差异。不典型增生样本中染色体异常水平明显高于癌组织样本,与低级别癌样本有共同的变化位点。高级别原位癌和浸润性癌具有相同的染色体及其位点的遗传学异常,有多个共同的缺失位点。   结论  不典型增生的细胞遗传学变化先于形态学上的改变,可能与低级别癌发生存在密切的遗传学联系;同级别导管内癌和浸润性导管癌可能有共同的遗传学变化和演变途径。      

高低分级乳腺癌及导管上皮不典型增生γ-tubulinNek2 mRNA表达分析及其意义

  目的  研究不同分级乳腺癌及不典型增生病变中心体γ-tubulin和调控因子Nek2 mRNA表达情况及其意义。  方法  选取正常乳腺、导管上皮不典型增生、高低级别导管内癌、高低级别浸润性导管癌6组样本, 采用原位杂交定性及半定量检测180例γ-tubulin和Nek2 mRNA表达情况, 采用实时定量RT-PCR测定80例γ-tubulin和Nek2 mRNA表达水平, 并行统计学分析。  结果  各组癌γ-tubulin mRNA、Nek2 mRNA表达均明显高于正常组织（P均 < 0.01）; 各组间差异具有统计学意义（χ2=37.519、36.912, P < 0.001）; 在不同癌组织之间, γ-tubulin或Nek2表达的两两比较, 差异无显著性（P均>0.05）; 在各组中两指标mRNA表达无显著性差异（P均>0.05）; 两指标各自定量和半定量表达总体变化趋势具有一致性; 原位杂交分析显示导管上皮不典型增生中γ-tubulin或Nek2 mRNA表达与低级别癌比较无统计学差异（χ2分别为1.200、0.659、1.148、2.700, P值分别为0.273、0.417、0.284、0.100）; 但在定量分析显示导管上皮不典型增生与低级别癌比较有显著差异（P均 < 0.01）。  结论  γ-tubulin及Nek2 mRNA过表达及协同作用, 与乳腺上皮细胞的异常增殖、不典型增生向低级别乳腺癌恶变转化可能具有相关性。      

RNAi下调AKT1、PI3K P85表达抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖

目的：探讨RNAi（RNA interference）技术抑制乳腺癌MCF7细胞中AKT1和PI3K P85亚基的表达对MCF7细胞增殖和侵袭等的影响。方法：将包含AKT1、PI3K P85两种siRNA开放阅读框的短发夹RNA（shRNA）重组腺病毒质粒表达载体rAd5siAKT1siPI3K转染至乳腺癌MCF7细胞。应用realtime PCR和Western blotting检测转染后目的基因mRNA和蛋白的表达水平,并用Western blotting检测目的基因被沉默后PCNA、cyclin D1和P53的表达情况。应用MTT法、流式细胞术、2D和3D Matrigel实验检测MCF7细胞转染前后的细胞增殖周期和侵袭能力。结果：重组腺病毒质粒表达载体rAd5siAKT1siPI3K介导的靶向〖STBX〗AKT1, PI3K P85 shRNA可以有效抑制目的基因AKT1和PI3 Kp85的mRNA和蛋白表达;下游相关因子PCNA、cyclin D1的表达亦下调,P53表达则上调。MTT法结果显示rAd5siAKT1siPI3K组细胞生长抑制率>50%,与未转染组和rAd5siCtrl转染组比较,出现明显的G1/G0细胞周期阻滞;2D和3D Matrigel实验显示,未转染组和rAd5siCtrl转染组细胞呈正常形态,而rAd5siAKT1siPI3K 转染组细胞贴壁生长能力明显减低,细胞团块明显缩小。结论：靶向AKT1、PI3K P85亚基的shRNA技术可以抑制MCF7细胞中AKT1、PI3K P85亚基的表达,抑制MCF7细胞的体外增殖。     

高良姜的化学成分及药理作用

高良姜是具有重要药用价值的中药之一，主要化学成分包括挥发油、二芳基庚烷类、甾醇类和黄酮类化合物，具有较强的抗溃疡、抗腹泻、利胆、镇痛、抗炎、降糖、抗氧化、抗菌等多种药理活性。