巯基乙酸对小鼠成熟卵母细胞皮质颗粒分布和MAPK活性的影响

背景与目的:探讨巯基乙酸(thioglycolic acid ,TGA)对小鼠卵母细胞胞浆成熟和相关生化指标的影响.材料与方法:以不同浓度TGA(0.2、1.0、2.5 mmol/L)体外培养小鼠卵母细胞,并设M16培养液对照组,培养16 h后在体视显微镜下,观测卵母细胞生发泡破裂和第一极体排出情况,用免疫荧光染色方法对皮质颗粒(cortical granules,CGs)进行标记,采用western blot方法对p44/42MAPK进行检测.结果:各组生发泡破裂率均达到90%左右,各组间差异无统计学意义(P＞0.05).随着TGA剂量的增加,第一极体排出率下降,各剂量组和对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05).各剂量组均可观察到CGs在细胞膜下的线状排列,但随着TGA吼剂量的增加,质膜下CGs的密度降低,胞浆中CGs的密度有增加的趋势.对照组卵母细胞中有非常明显的无皮质颗粒区(cortical granules free domain,CGFD)形成,0.2 mmol/L组也形成了CGFD,但1.0 matol/L和2.5 mmol/L两个剂量组未观察到CGFD.1.0 mmol/L和2.5mmol/L TGA可抑制p44/42MAPK的活化.结论:TGA可影响小鼠卵母细胞细胞质成熟和MAPK的活性,具有一定的生殖毒性.     

巯基乙酸对孕酮诱导爪蟾卵母细胞体外成熟过程中MAPK和MPF激酶活性的影响

背景与目的:探讨巯基乙酸(TGA)对孕酮诱导爪蟾卵母细胞体外成熟过程中丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)和成熟促进因子(MPr)蛋白激酶活性的影响.材料与方法:用0、5、25和125 μg/ml浓度的TGA分别处理经孕酮诱导的体外培养爪蟾卵母细胞,另设不含孕酮的阴性对照组,于处理4 h和8 h收集卵母细胞进行Western Blotting检测,观察p-Erkl/Erkl蛋白、p-RSK蛋白、Cdc2、p-Cdc2和Cyclin BI蛋白的表达情况.结果:TGA处理爪蟾卵母细胞4 h后,Erkl蛋白的磷酸化水平(即MAPK的活性水平),较对照组明显增加(P＜0.05);MAPK的活性底物p-RSK蛋白的表达也增加(P＜0.05);同时伴随着p-fAc2表达水平的下降和Cyclin B1蛋白表达的增强(P＜0.05).TGA处理8 h后Erkl蛋白磷酸化水平和p-RSK蛋白含量与对照组相比无明显差异(P＞0.05),但此时TGA组p-Cdc2水平明显增加(P＜0.05),Cyclin BI蛋白的表达降低(P＜0.05).结论:在孕酮诱导的爪蟾卵母细胞体外成熟早期,TGA可促进MPF和MAPK蛋白激酶及其底物p-RSK的活化;在成熟的晚期,TGA对MAPK活性无明显影响,但明显抑制MPF活性.TGA影响MPF活性的可能机制是降低Cyclin B1蛋白水平.     

麦麸中的降血脂成分

饮食治疗是高脂血症治疗的基础。麦麸是小麦加工副产品,含有小麦中主要营养物质,其中多种营养物质如膳食纤维、烟酸、维生素E、硒、镁、植物化合物都有降血脂的功能。对麦麸的降血脂功能进行深入的研究,将有利于充分利用资源,促进人群健康。     

2型糖尿病患者生存质量相关因素的研究

目的探讨影响2型糖尿病患者生存质量的相关因素，为制定针对患者的干预措施提供依据。方法采用糖尿病人生存质量特异性量表(DSQL)及相关因素调查表对210名2型糖尿病患者进行问卷调查，并进行简相关和逐步回归分析。结果糖尿病生存质量与生理、心理、社会多种因素有关。逐步回归分析表明，应对倾向、学历、饮食控制、主观支持、病程、支持利用度被选入回归方程。结论应加强对2型糖尿病患者生存质量各种影响因素的干预，努力提高其生存质量。     

叶酸对小鼠卵母细胞体外成熟的影响

背景与目的： 探讨叶酸(folic acid, FA) 对小鼠卵母细胞体外成熟的影响。 材料与方法： 实验设次黄嘌呤(hypoxanthine,Hx)处理小鼠体外卵母细胞的卵母细胞成熟抑制模型组(Hx 4 mmol/L＋M16培养液)、FA组(500 μmol/L FA ＋4 mmol/L Hx ＋M16培养液)和M16培养液组,各组卵母细胞培养24 h后,在体视显微镜下观测卵母细胞生发泡破裂(germinal vesicle breakdown, GVBD)和第一极体(the first polar body, PB1)排出情况,采用免疫荧光染色方法观察染色体和纺锤体的形态结构。 结果： M16培养液组、Hx模型组和FA处理组的GVBD率分别为98％、22.2％、40.1％,其PB1排出率分别为77.7％、15.5％、27.6％,各组间的差异均具有统计学意义(P<0.05);次黄嘌呤和叶酸对染色体的形态没有影响,而次黄嘌呤使正常的纺锤体变长、变宽、面积变大,FA组较Hx模型组增大的纺锤体有所恢复,并接近于正常水平。 结论： 叶酸可促进小鼠卵母细胞体外减数分裂的重启和成熟。     

以整合理念构建预防医学本科专业实验教学课程体系

传统的学科式预防医学实验课程设置存在许多弊端,需进行整合式课程改革。整合学科教学实验室和实验教学师资队伍,构建多层级、多模块和多种教学方法有机整合的实验教学体系,提高了实验教学质量。然而,实验教学整合式课程改革能否成功、持久,学校及学院顶层设计是关键。     

饲料钙不足通过抑制骨骼肌PGC-1α表达影响大鼠血糖血脂的研究

目的 研究饲料钙不足对大鼠血糖血脂的影响并对其可能的机制进行探讨。方法 SD雄性大鼠20只（7周龄）,适应性喂养1周后按体重随机分为2组,即对照组（n=10,饲料含钙量0.5%）、钙不足组（n=10,饲料含钙量0.15%）。每日记录摄食量,每周称量体重,第16周末处死大鼠,采集血清测定血糖（glucose, GLU）、总胆固醇（total cholestrol, TC）、甘油三酯（triglyceride, TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol, LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol, HDL-C）;采集骨骼肌检测PGC-1α mRNA和蛋白的表达水平并分析其与血糖血脂的相关性。结果 与对照组相比,钙不足组大鼠摄食量及体重均无差别（均有P>0.05）,但血清GLU、TC、LDL-C水平升高,HDL-C/LDL-C比值降低（均有P<0.05）,TG和HDL-C虽没有统计学差异但是有升高趋势;钙不足组大鼠骨骼肌内调控糖脂代谢及线粒体功能的关键因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α（proliferator-activated receptor γ coactivator-1α,PGC-1α） mRNA和蛋白的表达水平均降低（均有P<0.05）。大鼠骨骼肌PGC-1α表达水平与TC、LDL-C等水平呈负相关（均有P<0.05）。结论 饲料钙不足虽未影响大鼠体重,但可通过抑制PGC-1α的表达从而引起大鼠血糖血脂紊乱。     

UPLC/Q-TOF MS/MS技术评价防腐剂硼酸和叠氮化钠对尿液代谢物的影响

目的：在基于超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱（UPLC/Q-TOF MS/MS）的尿液代谢组学研究中,确定硼酸和叠氮化钠两种防腐剂是否适用于尿液样品的处理,并确定其适宜的浓度范围。方法：收集6名健康志愿者的晨尿,等量混匀后分装,根据处理方式不同,分为对照组、叠氮化钠组和硼酸组。对照组样品不添加任何防腐剂,叠氮化钠组在尿液中分别添加终浓度为0.1、1和10 mmol/L的叠氮化钠,硼酸组在尿液中分别添加终浓度为2、20和200 mmol/L的硼酸。应用UPLC/Q-TOF MS/MS技术对样品进行检测,采用主成分分析、偏最小二乘判别分析和正交偏最小二乘判别分析等化学计量学方法进行数据处理,比较不同处理组间的代谢图谱。结果：偏最小二乘判别分析得分图显示,3个浓度的叠氮化钠处理组以及2 mmol/L硼酸处理组与对照组间无明显分离趋势;200 mmol/L硼酸处理组与对照组分离趋势明显,两组尿液代谢物存在差异。结论：0.1~10 mmol/L叠氮化钠和2 mmol/L硼酸适用于基于UPLC/Q-TOF MS/MS技术的尿液代谢组学研究。     

巯基乙酸对爪蟾卵母细胞体外核成熟的影响

背景与目的:探讨巯基乙酸(thioglycolic acid,TGA)对孕酮诱导的爪蟾卵母细胞核成熟的影响.材料与方法:用不同浓度的TGA(5、25、125 μg/ml)在体外预处理爪蟾卵母细胞2 h后,再用孕酮诱导成熟,实验并设不经TGA预处理的对照组.在培养过程中观察卵母细胞的外观和核形态,以判断生发泡破裂(GVBD)情况;在培养结束时(加入孕酮后8 h),收集卵母细胞进行荧光染色.观察染色体的状态. 结果:经不同浓度TGA处理后卵母细胞的GVBD50 明显缩短,与对照组比较均具有统计学意义(P均<0.05),说明TGA加快卵细胞GVBD的发生;荧光染色观察GV期卵母细胞未见凝集的染色体,第一次减数分裂中期细胞可见赤道板形成,第二次减数分裂中期细胞除染色体赤道板外,还可见第一极体(PB1).经25 mg/ml和125 mg/ml浓度的TGA处理后,排出PB1的爪蟾卵母细胞比例明显降低(P<0.05),即抑制了MI-MII转变和第一极体的释放.结论:TGA可抑制孕酮诱导的爪蟾卵母细胞体外成熟.     

经皮染毒巯基乙酸对昆明小鼠排卵及体内卵母细胞成熟的影响

背景与目的:探讨巯基乙酸(thioglycolic acid,TGA)对昆明小鼠排卵以及卵母细胞体内成熟的影响. 材料与方法:选取昆明小鼠12只,按体重随机分成4组,每组3只,分别为对照组和TGA高(151.25 mg/kg)、中(75.625 mg/kg)、低(37.812 5 mg/kg)3个剂量组.给小鼠皮肤染毒TGA的同时腹腔注射10 IU人绒毛膜促性腺激素(hCG),14 h后,处死小鼠收集卵母细胞进行小鼠排卵计数,采用免疫荧光染色法观察成熟卵母细胞内纺锤体与皮质颗粒(conical germinal,CG)的分布. 结果:TGA高、中剂量组排卵数明显低于对照组及低剂量组(P<0.01及P<0.05);对照组和低剂量组小鼠卵母细胞纺锤体呈双极状,中、高剂量组纺锤体逐渐呈桶状,形态发生了明显改变,且随着TGA剂量的增加,纺锤体的面积有增加趋势;TGA对cG的膜下分布以及无皮质颗粒区(cortical germinal freedomain,CGFD)的形成在形态上没有明显影响.结论:经皮肤给TGA能抑制小鼠排卵,并对卵母细胞成熟有一定影响.