人红细胞-兔VX2肿瘤细胞融合疫苗的制备及其对兔VX2肿瘤复发转移的影响

目的:制备一种新型肿瘤疫苗,观察其抗肿瘤效应.方法:PEG法制备人红细胞-兔VX2细胞融合疫苗,MTT法检测疫苗体外刺激兔单核细胞增殖的作用,观察疫苗治疗对兔VX2肿瘤复发转移的影响.结果:融合疫苗体外显著刺激单核细胞增殖,后者能特异性杀伤VX2靶细胞,疫苗治疗能显著降低VX2肿瘤的复发转移率.结论:人红细胞-兔VX2细胞融合疫苗体内外均可诱导特异性抗肿瘤免疫效应,该疫苗为研究人肿瘤细胞融合疫苗提供了支持.     

小鼠乳腺癌细胞系Ca761-03的建立及其生物学特性研究

目的：建立体外培养的小鼠乳腺癌细胞系，明确其生物学特性。方法：利用乳腺癌移植瘤组织，进行体外原代培养，并对其纯化和反复传代，进行生长曲线，倍增时间，软琼脂集落形成，细胞周期，染色体众数，免疫组织化学染色及体内成瘤率，转移率等鉴定。结果：建立了一个小鼠乳腺癌细胞系，命名为Ca761-03。其生长迅速，呈贴壁生长。倍增时间为25．98h；平均软琼脂克隆形成率为5．39％；G1期31.8％，S期57.3％，G2＋M期10．9％；CK染色为阳性，ER，PR均为阴性；体内移植成瘤率100％，肺转移率100％，未见淋巴结转移。结论：成功建立了小鼠乳腺癌细胞系．并对其生物学特性进行了较系统的观察与研究。     

Axl受体酪氨酸激酶对肝癌细胞生长的影响及其机制的研究

目的 研究受体酪氨酸激酶Axl对肝癌细胞生长的影响及其相关的作用机制.方法 体外培养肝癌细胞(hepatom a carcinoma cell,HepG2),用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)干扰HepG2细胞的Axl表达,生长曲线法检测干扰前后HepG2细胞生长情况;Wester...     

人喉癌细胞系的建立及生物学特性研究

目的建立2种人喉癌细胞系,确定其生物学特性。方法取喉癌患者原发病灶和淋巴结转移灶组织,用组织块培养法进行原代培养。20代后观察细胞形态,绘制生长曲线图,用免疫组织化学染色方法鉴定细胞分子特征,测定细胞周期和软琼脂集落形成率。结果建立了2个人喉癌细胞系,分别命名为CCC-HLS和CCC-HLSLN,已传至第25代。CCC-HLS细胞形态以梭形为主;CCC-HLSLN细胞呈多形性,少数细胞有细长的突起,末端有分叉。2种细胞角蛋白(CK)免疫组织化学染色均为阳性。2种细胞传代后,2~4 d为对数生长期,第7天开始死亡,CCC-HLS细胞倍增时间为33.9 h,CCC-HLSLN细胞倍增时间为30 h。细胞周期分析表明CCC-HLS细胞G0/G1期为54.7%,G2/M期为5.2%,S期为40.1%。CCC-HLSLN细胞G0/G1期为50.6%,G2/M期为27.4%,S期为22.0%。CCC-HLS细胞软琼脂集落形成率为1.23%,CCC-HLSLN软琼脂集落形成率为2.58%。结论建立的2种人喉癌细胞系可用于喉癌的基础研究。     

情绪因素及抗焦虑药物对肿瘤休眠及复发的影响

目的：研究情绪因素以及通过药物控制情绪因素对肿瘤休眠状态的维持与打破及后续复发转移的影响。方法：利用肿瘤休眠模型，附加单笼饲养和不定时空瓶刺激联合诱导小鼠产生焦虑、愤怒等应激情绪的小鼠慢性情绪应激模型。通过灌胃给予常规抗焦虑药物地西泮来控制焦虑情绪，探讨情绪及抗焦虑药物对肿瘤休眠状态的维持及防止肿瘤复发的作用。实验分为五组，分别为休眠对照组、单纯给药组、诱导焦虑组、焦虑给药组和外伤刺激组。以500个小鼠乳腺癌细胞Ca761—03接种于小鼠左腿肌肉。休眠对照组、单纯给药组和外伤刺激组常规饲养，其中外伤刺激组在第1个月末切除右爪作为外伤刺激，单纯给药组每天定量灌胃给予地西泮溶液。诱导焦虑组和焦虑给药组以单笼饲养和不定时空瓶刺激联合诱导小鼠产生焦虑、愤怒等应激情绪，其中焦虑给药组每天定量灌胃给予地西泮溶液。连续观察2个月，观察小鼠焦虑情况，观察肿瘤休眠打破（肿瘤发生）及肿瘤转移发生情况。结果：各组肿瘤休眠率分别为70％、100％、60％、90％和40％。各组成瘤率分别为30％、0、40％、10％和60％。各组的肺转移率分别为20％、0、30％、0和60％。结论：本项研究结果证实，长期负面情绪会促进肿瘤休眠状态的打破，加速肿瘤的生长、复发及转移。抗焦虑药物可以明显减少焦虑行为，并有利于肿瘤休眠状态的维持，减少肿瘤的复发。     

肿瘤干细胞研究进展

肿瘤干细胞是存在于肿瘤组织中的一小部分具有干细胞性质的细胞群体,它具有自我更新的能力,是形成不同分化程度肿瘤细胞和肿瘤不断扩大的源泉.人们对肿瘤干细胞的认识开始于研究肿瘤组织的克隆起源,通过镶嵌性联同工酶标记,已证实了肿瘤细胞的单克隆源性[1],进而逐渐形成肿瘤干细胞的概念.随着干细胞研究的不断深入,有关知识的不断积累,又为肿瘤干细胞理论注入了很多新的观念.目前对肿瘤干细胞的研究越来越热,很多实验证实肿瘤干细胞的存在,人们也在不断探索肿瘤干细胞的起源.通过这些方面的研究,人们对肿瘤发生发展过程的认识将会提高到一个新的阶段,对肿瘤的诊断和治疗以及预后判断将产生深远影响,将为战胜这一顽疾提供新的方法.     

癌症发生、转移的元凶——肿瘤干细胞

肿瘤干细胞是存在于肿瘤组织中的一小部分具有干细胞性质的细胞群体，它具有自我更新的能力，是形成不同分化程度肿瘤细胞和肿瘤不断扩大的源泉。人们对肿瘤干细胞的认识开始于研究肿瘤组织的克隆起源，通过镶嵌性联同工酶标记，已证买了肿瘤细胞的单克隆源性，进而逐渐形成肿瘤干细胞的概念。随着干细胞研究的不断深入，有关知识的     

血液系统肿瘤细胞系中CD34+干细胞特性研究

目的探讨造血系统多种肿瘤细胞系中CD34^＋干细胞是否存在,并对其性质进行研究。方法利用流式细胞检测技术,检测了急性单核细胞白血病细胞THP-1、红白血病细胞MEL、慢性粒细胞白血病细胞K562,急性淋巴细胞白血病细胞MOLT-4,恶性淋巴瘤细胞RAJ1,多发性骨髓瘤细胞RPM18226、SP2／0和树突状细胞肉瘤DCS肿瘤细胞中CD34^＋的肿瘤细胞所占的比例。选取了MOLT-4和K562细胞系,分选出CD34^＋细胞,继续培养,观察CD34^＋细胞比例变化;比较CD34^＋与CD34^＋肿瘤细胞在功能状态、细胞周期、分化状态、耐药性的差异。结果8种不同类型造血系统肿瘤细胞中CD34阳性率依次为2．5％、5．2％、3．1％、2．1％、1．4％、0、0和6．2％。从K562细胞中分选出CD34^＋细胞,继续培养后恢复为原来比例。MOLT-4和K562细胞系中分离出的CD34^＋细胞RNA含量低、细胞处于Gn／G,期的比率较高（81．5％和77．9％）、分化抑制蛋白Id-1表达强阳性／阳性（分化程度低）、多耐药蛋白p-gP高表达（耐药性强）。结论血液系统肿瘤细胞系中有一小部分肿瘤细胞带正常造血干细胞的标记,并且带有这种标记的细胞表现出更为原始的细胞特性,其中包括血液肿瘤细胞干细胞。     

P38MAPK的激活上调SH-SY5Y细胞APP表达及组蛋白H3乙酰化水平

目的研究P38MAPK信号通路的激活对淀粉前体蛋白(APP)表达的影响及其相关表观遗传学机制。方法体外培养神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y),Western blot法检测SH-SY5Y的APP蛋白表达及组蛋白乙酰化酶(HAT)和组蛋白去乙酰化酶(HDAC)的表达;吸光度值法检测组蛋白3(H3)和组蛋白4(H4)整体乙酰化水平。结果 P38MAPK信号通路经特异性激动剂激活SH-SY5Y 72 h后,APP表达明显增高至对照组的1.5倍(0.41±0.09vs0.28±0.08,P<0.01);同时组蛋白H3整体乙酰化水平增高(0.20±0.04vs0.06±0.03,P<0.01),但H4乙酰化水平无明显改变;组蛋白乙酰化酶CBP表达增高至对照组的2.5倍(0.30±0.03vs0.11±0.05,P<0.01),而组蛋白去乙酰化酶HDAC3表达下降至对照组的40%(0.19±0.05vs0.49±0.03,P<0.01)。结论 P38MAPK信号通路可能通过上调组蛋白乙酰化水平增加SH-SY5Y的APP蛋白表达。     

慢性脑血流低灌注对大鼠脑内β-淀粉样肽的影响

目的 研究慢性脑血流低灌注对大鼠脑内β-淀粉样肽(Aβ)及淀粉样前体蛋白(APP)表达和分布的影响. 方法双侧颈总动脉结扎大鼠制作慢性脑血流低灌注动物模型,应用免疫组织化学方法检测皮质和海马CA1区APP、Aβ1-40、Aβ1-42的表达与分布;刚果红染色检测血管的淀粉样变;放射免疫分析法检测手术后10d、30d、90d和180d大鼠脑皮质及海马的Aβ含量;免疫印迹法检测大脑皮质和海马的APP含量. 结果 免疫组织化学染色显示低灌注90d模型组海马CA1区APP、Aβ1-40的表达较对照组明显增加(两者均P<0.05),低灌注180d模型组皮质和海马CA1区APP、Aβ1-40和Aβ1-42的表达均增加(除皮质Aβ1-40P<0.01外,其余均P<0.05);Aβ1-40阳性反应产物均匀分布于胞质内,Aβ1-42阳性反应产物在神经元胞质内呈颗粒状聚集.刚果红染色显示,术后180d脑实质内小血管发生淀粉样改变.放射免疫分析法和免疫印迹法结果显示,大鼠术后90d海马Aβ和APP含量开始增高(两者均P<0.05),180d皮质Aβ和APP的含量增高(Aβ P<0.05,APP P<0.01). 结论 慢性脑血流低灌注可引发大鼠脑内Aβ含量的升高,可能在阿尔茨海默病(AD)早期发病过程中有重要意义.