基于雌激素应答元件转录调节的药物筛选模型的建立

目的 :建立靶向雌激素应答元件 (ERE)的药物筛选模型 ,为筛选雌激素受体 (ER)配体奠定基础。方法 :构建重组报告基因载体 pERE-TAL-SEAP ,与对照载体 pCMVβ瞬时共转染表达人ERα或ERβ的Hela细胞株 ,观察化合物对SEAP报告基因表达活性的影响。结果 :雌二醇 (E₂ )诱导表达人ERα或ERβ的Hela细胞株SEAP的表达 ,EC₅₀分别为 (80.5 8± 8.51) pmol·L^-1和 (10 3.90± 5.29) pmol·L^-1,最大效应浓度为 10nmol·L^-1;金雀黄素 (Gen)也诱导表达人ERα和ERβHela细胞株SEAP的表达 ,EC₅₀ 分别为 (39.38±2.26)nmol·L^-1和 (10.86±0 .75 )nmol·L^-1;最大效应浓度为 1μmol·L^-1;E₂ 和Gen诱导SEAP表达的最大水平较对照孔细胞高 7～ 14倍。ER拮抗剂ICI182 ,780可完全抑制E₂ 和Gen对SEAP的诱导作用。结论 :利用此模型检测化合物诱导报告基因的表达水平可筛选和发现ER配体。     

表达人红细胞生成素裸质粒治疗肾性贫血的实验研究

目的：观察表达人红细胞生成素(EPO)基因裸质辛立通过电脉冲转移法导入大鼠和猕猴体内治疗腺嘌呤所致的肾性贫血的效果。方法：实验选择了喂含腺嘌呤饲料所致大鼠和猕猴的肾性贫血模型，电脉冲转移法把质粒导入动物股四头肌。实验分正常组、模型组、表达大鼠EPO基因裸质粒对照组(仅在大鼠肾性模型中)和不同剂量表达人EPO基因裸质粒组。动态检测血细胞比容(HCT)水平；提取给药部位肌肉组织总RNA进行逆转录PCR，检测EPO基因在肌细胞当中的表达；用EPO酶联免疫(ELISA)试利盒测定血清EPO水平。结果：电脉冲肌肉转移表达EPO裸质粒可在局部有效表达和分泌。在大鼠模型中，给药后第2～5周，表达大鼠EPO基因裸质粒对照组和表达人EPO基因裸质粒组的HCT水平明显高于模型组。在猕猴模型中，表达人EPO基因裸质粒组在给药后第4～5周HCT水平明显高于模型组。在大鼠模型中，表达人EPO基因裸质粒组的血清有明显的中和活性，可抑制BEF-2细胞的增殖。结论：电脉冲转移表达EPO基因裸质粒对腺嘌呤所致猕猴肾性贫血和大鼠肾性贫血具有明显的治疗作用。     

壮阳冲剂的药理学实验研究

目的 :为了研究壮阳冲剂对去势大鼠、小鼠附性器官重量的影响。方法 :取未成年雄性大鼠、成年雄性小鼠 ,切除双侧睾丸后灌服壮阳冲剂 ,15d后观察附性器官重量的变化。结果 :壮阳冲剂对未成年去势大鼠的包皮腺 ,成年去势小鼠的精液囊、包皮腺的重量具有明显的增加作用。结论 :壮阳冲剂对去势大鼠、小鼠的附性器官具有促进增长作用。