北柴胡皂苷生物合成途径关键酶IPPI的全长cDNA克隆及其序列分析

目的克隆北柴胡皂苷生物合成途径关键酶异戊烯基焦磷酸异构酶(EC 5.3.3.2,isopentenyl diphosphate isomerase,IPPI)的全长cDNA,为研究柴胡皂苷的生物合成与基因调控奠定基础。方法 PCR矩阵法快速筛选北柴胡全长cDNA文库。结果获得了北柴胡IPPI的全长cDNA(GenBank No.gq433719),其核苷酸序列长1 117bp,编码319个氨基酸的蛋白。NCBI Blastx结果显示与胡萝卜Daucus carotasubsp.sativus(abb52064)的IPPI氨基酸序列相似性最高,一致性为92%,相似度为97%。保守结构域搜索显示含有IPPI共有的催化活性位点、金属结合位点及Nudix基序。TargetP1.1和SignalP3.0分析表明北柴胡IPPI N端含有长26 bp的叶绿体信号肽。结论首次克隆了北柴胡IPPI的全长cDNA,将促进后续北柴胡IPPI基因表达特性及其在柴胡皂苷合成代谢中功能的研究。     

中国南海短指软珊瑚Sinularia sp.化学成分研究

目的研究采自中国南海的短指软珊瑚Sinularia sp.的化学成分。方法利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱等方法进行分离纯化,并根据MS、NMR等波谱数据对化合物的结构进行鉴定。结果从短指软珊瑚的乙醚提取物中分离得到11个化合物,分别鉴定为胆固醇(1)、3β-羟基胆甾-5-烯-7-酮(2)、3β-羟基麦角甾-5,24(28)-二烯-7-酮(3)、菜油甾醇(4)、24-亚甲基胆固醇(5)、过氧化麦角甾醇(6)、axinysterol(7)、麦角甾醇(8)、(3β,4α,5α,8β)-4-甲基麦角甾-24(28)-烯-3,8-二醇(9)、花生四烯酸(10)、花生四烯酸甲酯(11)。结论化合物1~9属于3种不同类型的甾醇,而化合物10和11属于不饱和脂类。其中,化合物7和11为首次从该属中分离得到。     

桂枝茯苓微丸的质量标准研究

目的:建立桂枝茯苓微丸的质量标准。方法:采用薄层色谱法对丹皮、赤芍、茯苓进行了定性鉴别,采用高效液相色谱法测定了微丸中芍药苷的含量,采用Lichrospher C18柱(5μm,200mm×4.6mm);检测波长230nm;流动相:乙腈-水-磷酸(15:85:0.1);流速:1.0mL/min;柱温:室温。结果:此法线性范围1.506~2.550μg,Y=64.3537924X 145.99898,r=0.9996;芍药苷的平均回收率为97.04%,RSD为2.03%。结论:该方法稳定、可靠,可作为该制剂的质量控制方法。     

北柴胡二代新品种“中柴2号”和“中柴3号”的选育研究

目的:选育整齐度高、商品性好、皂苷含量高的北柴胡二代新品种。方法:从北柴胡一代品种"中柴1号"群体中筛选优良种质,单株选择法,选育优良品种。以形态性状、农艺性状和品质性状为指标,考察历代选育材料,开展品系比较试验和区域试验。结果:选育的北柴胡新品种"中柴2号"和"中柴3号"的整齐度显著提高,深色根比率分别达83.2%,89.9%,柴胡皂苷含量分别达到1.3%,1.0%。结论:选育的"中柴2号"和"中柴3号"具有整齐度高、根色深、有效成分含量高等优点,达到了选育目的。