基于纳米金探针和蛋白芯片高灵敏检测肺癌CEA和CYFRA21-1标志物

目的 构建基于纳米金探针和蛋白芯片的快速、多肿瘤标志物高灵敏检测体系.方法 将待检测的肿瘤标志物捕获抗体(捕获待测抗原)结合在醛基化修饰的玻片上;用检测抗体制备纳米金探针;经过免疫反应形成三明治夹心结构(蛋白芯片-目标蛋白-纳米金探针).利用纳米金沉积的方法进行染色,通过肉眼或显微镜观察显色结果.结果 该蛋白检测体系在1h内可检测两种肿瘤标志物,其中CEA可检测到最低浓度为45 pg/mL,CYFRA21-1可检测到90 pg/mL,与传统的酶联免疫吸附法(ELISA)相比,检测灵敏度大大提高.并利用此体系,检测肺癌患者及正常人血清,结果与临床所用电化学分析方法一致.结论 该检测体系操作简单、方便、快速,同时具有高灵敏度、多指标联合检测等优点,在临床蛋白检测中具有重要的价值和应用前景.     

中药外敷治疗扭伤110例

扭伤是临床上最常见的疾病。笔者采用中药外敷治疗 ,疗效满意。现简述如下。1　方剂组成及用法红花、栀子、桃仁各 10 g,乳香、没药各 5 g。将上药共研细末 ,加入葱白根须 4～ 5枚 (打烂 ) 75 %酒精 (或白酒 )适量 ,面粉少许 ,微火加温调匀成糊状 ,再把温热糊状中药摊于纱布块上。使用方法 :上肢任何部位扭伤 ,敷患侧掌心 ,下肢各部位扭伤 ,敷患侧足心 ;胸、腹、腰部位扭伤 ,敷局部。外加绷带包扎 ,为防止药物污染衣被 ,可用塑料纸包裹局部 ,每晚敷 1次 ,第 2天取下干涸药物再次捣碎调匀再敷直至肿消痛止 ,功能恢复。2　病例资料本文 110例…     

一种基于酶标纳米金探针的蛋白质检测方法

目的研究酶标纳米金探针的制备条件,并构建利用酶标纳米金探针检测蛋白质的检测体系,实现对蛋白质的高灵敏度检测。方法首先标记捕获抗体的磁珠探针、抗原及标记检测抗体和辣根过氧化物酶（Streptavidin—peroxidase,SA．HRP）的纳米金探针（AuNP probes）进行免疫反应形成三明治结构,然后利用磁力分离器收集三明治结构,再加入四甲基联苯胺（Tetrabenzidine,TMB）溶液发生酶促显色反应,最后在450nm处进行分光光度检测,从而间接测定蛋白质含量。结果通过一系列优化实验建立检测体系,具体为：纳米金探针重悬液确定为50mmol Tris（pH7．8,1．25％蔗糖,0．2％BSA,0．05％PEG,0．05％PVP,0．15％Tween20）：检测体系中纳米金的最适加入量为3μl;2步孵育最适时间依次为1h和45min。使用该方法检测并绘制癌胚抗原（CEA）标准曲线,表明CEA浓度在250pg／ml—25ng／ml区间时线性关系良好,R^2为0．991。通过灵敏度实验表明该检测体系的最低检测灵敏度为25pg／ml,而传统ELISA方法的检测灵敏度仅为1．65ng／ml。结论酶标纳米金探针检测体系实现了通过普通光学仪器进行高灵敏度蛋白质检测的目标,是一种很有发展前景的蛋白质检测技术。     

徐晓东治疗久咳

徐晓东认为,气阴不足型久咳多以＂无痰＂＂白痰＂＂黄痰＂为特点,病因不外有内外合邪和正虚邪恋两端。临证以祝味菊＂激发人体自然疗能＂学术思想为指导,以调整机体气阴不足为本,以冯楚瞻名方全真一气汤为基础方,酌以利咽、化痰、止咳,并配合活血化瘀之法,治疗久咳,能咳止痰消。     

围产期抑郁病因研究进展

<正>虽然抑郁症在女性一生的各个时段都令人担忧,但发生在产前和(或)产后的抑郁症尤其值得人们关注。Alvarez-Segura等[1]发现,围产期抑郁除了对母亲有潜在的负面影响外,它可能有损孩子生理和心理健康。围产期抑郁不仅会影响孕产妇的健康和婚姻家庭关系,而且会对母婴关系,婴幼儿的情绪、行为、智力、认知能力的发展带来不良影响,严重者甚至有伤害婴儿及自杀的倾向,影响社会安定。正因为围产期抑郁给妇女、儿童、家庭、乃至社会带     

毛细管电泳法分离血清中乳酸脱氢酶同工酶

目的利用还原型辅酶I（NADH）在340nm波长处特异性吸收峰，建立用毛细管区带电泳在线检测人血清中乳酸脱氢酶（LDH）同工酶的方法。方法实验中采用未涂层毛细管，长60cm，内径75μm，pH9．4（23℃）二氨基二甲基1，3丙二醇（AM2P）缓冲液含20mmol/L氧化型辅酶I（NAD^＋）、51，6mmol/L乳酸锂。结果在25min内完成电泳分离，乳酸脱氢酶同工酶1（LDH1）、乳酸脱氢酶同工酶5（LDH5）纯品各自均可得到较好峰形，而且LDH1、LDH2纯品的混合物亦可得到完全分离，在分析正常人血清与肝癌患者血清时，其结果与美国Helena公司REP全自动琼脂糖电泳结果一致，取得满意效果。结论该法快速、低耗，具有较好的推广应用价值。     

纳米金标记p53抗体探针在p53蛋白检测中的应用

目的利用纳米金粒子静电吸附抗体和与巯基修饰的寡核苷酸以Au-S键共价结合的特点制备多功能纳米金探针,结合免疫磁珠探针技术建立一种新的、高灵敏的免疫检测体系。方法纳米金探针表面标有两种蛋白分子和一种寡核苷酸链:检测抗体(免疫检测中结合待测抗原);辣根过氧化物酶(HRP,信号扩增作用);巯基化DNA链(作为"桥梁"连接纳米金颗粒和HRP分子)。捕获抗体(捕获待测抗原蛋白)修饰的微型磁珠探针作为p53蛋白检测固相支撑物。目标蛋白p53存在时,通过抗原抗体反应形成三明治结构(磁珠探针—目标蛋白—纳米金探针)。结果最佳条件下,该蛋白检测体系可检测到最低浓度为30 pg/ml的p53蛋白,与酶联免疫吸附剂测定(ELISA)方法相比,检测效果较好。结论该法操作过程简单,灵敏度高、重复性较佳,费用低廉,在临床微量蛋白检测中具有重要的应用价值。     

两种纳米金标记p53抗体探针的制备、表征和性质研究

目的制备IgG-Au-HRP和IgG-Au-DNA-HRP两种纳米金标记p53抗体探针,并对其进行生物学特征表征和性质研究。方法利用纳米金粒子与蛋白质非共价吸附和与巯基修饰的寡核苷酸以Au-S键共价结合的特点,将辣根过氧化物酶(HRP)直接或通过寡核苷酸链间接标记在纳米金表面,制备两种多功能纳米金生物探针(IgG-Au-HRP和IgG-Au-DNA-HRP探针);应用透射电镜、紫外-可见光光谱等对纳米金探针性能进行表征,对纳米金探针表面HRP酶活性进行分析,并通过酶免疫标记技术(enzyme linked immuncsorbent assay,ELISA)优化探针制备条件和比较两种探针标记效率。结果①两种新型探针具有良好的单分散性,大小均一,粒径约10nm;②p53蛋白检测效果对IgG-Au-HRP和IgG-Au-DNA-HRP探针制备条件优化结果表明:制备IgG-Au-HRP探针时,HRP分子和p53抗体的最佳比例为10:1;制备IgG-Au-DNA-HRP探针时,DNA和p53抗体的最佳比例为2.5:1;③HRP分子定量检测显示:一个IgG-Au-HRP探针可标记HRP数量约11个,IgG-Au-DNA-HRP探针可标记HRP数量为20个;④两种探针结合ELISA法初步检测p53蛋白判定IgG-Au-DNA-HRP探针比IgG-Au-HRP探针检测蛋白灵敏度高。结论两种新型纳米金探针制备简单,可作为一种新型探针应用于微量蛋白的高灵敏检测。     

p53基因突变的检测方法及临床应用

p53基因与通常的抑癌基因不同,突变后具有癌基因作用[1].它是迄今为止发现的与人类肿瘤相关性最高的基因.最初的研究发现,p53突变后其表达的核蛋白功能丧失与Li-Fraumeni综合征(LFS)相关.     

控制微流控芯片电泳中的蛋白质吸附

目的 探讨抑制微流控芯片电泳中蛋白质的吸附，以提高芯片电泳蛋白质的分离效率及重现性。方法 以蛋白质标准品、临床尿液标本为实验对象，通过提高缓冲液的pH值、在缓冲液中加入适当的添加剂等方法，进行芯片蛋白电泳，并与常规琼脂糖电泳结果进行比较。结果 使用pH值10．5硼酸缓冲液，转铁蛋白连续进样出峰时间的变异系数（CV）为5．22％；在pH值10．5硼酸缓冲液中加入1％的乙胺，能提高芯片电泳检测尿液蛋白的分离度、重现性，电泳结果与REP全自动电泳仪结果一致。结论 使用该方法可有效地抑制芯片泳道壁对蛋白质的吸附，分离效率大为提高。