具有靶向免疫抑制作用新型重组融合蛋白B7-2-PE40KDEL真核表达载体的构建及其生物效应

目的:构建B7-2-PE40KDEL的真核表达载体,探讨通过体内表达重组融合蛋白,特异性杀伤高表达CD28 T细胞,阻断B7∶CD28/CTLA4共刺激信号途径诱导免疫耐受的可能性.方法:以原核表达载体pRSETA-B7-2-PE40KDEL质粒为模板,采用PCR及酶切连接的方法构建真核表达载体pcDNA3.1/Zeo( )-B7-2-PE40KDEL.利用RT-PCR、Western 印迹及ELISA法从mRNA、蛋白质水平检测了B7-2-PE40KDEL在RPE-CHO真核细胞中的表达情况.采用MTT法对其特异性杀伤高表达CD28 T细胞的生物活性进行测定.结果:成功构建了pcDNA3.1/Zeo( )-B7-2-PE40KDEL真核表达载体,转染入RPE-CHO细胞后可转录翻译为重组融合毒素蛋白,相对分子质量约为71×103,平均106个转染细胞24 h表达0.23 μg/L.活性测定显示真核载体所表达的B7-2-PE40KDEL可特异性地抑制高表达CD28的人T淋巴细胞系,而对CD28阴性的人白血病细胞系的抑制率较低.结论:真核载体表达的B7-2-PE40KDEL具有良好的靶向性免疫抑制活性,为进一步开展其体内特异性防治移植排斥反应及自身免疫性疾病奠定了基础.     

甲状腺功能亢进患者围手术期整体护理

甲状腺功能亢进症（简称甲亢）是普外科的常见病，中重度者需手术治疗，围手术期护理是甲亢治疗过程中极为重要的一个环节。我科于2000—2097年共手术治疗中重度甲亢56例，经精心的围手术期护理，取得了满意成绩，现报道如下。[第一段]     

具有PR/SET结构域的抑癌基因研究进展

含有 PR/ SET结构域的基因 ,在多种肿瘤中都可见其缺失 ,被认为是一个重要的抑癌基因家族。目前发现含有该结构域的基因具有抑癌基因作用 ,而缺失该结构域的基因具有癌基因的作用 ,即该基因家族有特殊的“阴阳”作用机制。此外含有 PR/ SET结构域的基因可以引起细胞 G2 / M期阻滞和细胞凋亡 ,在调节细胞生长、限制肿瘤发展方面发挥重要作用     

人胆固醇酯转运蛋白的eDNA克隆、原核表达及抗血清制备

目的:克隆人胆固醇酯转运蛋白(CETP)eDNA序列,利用大肠杆菌表达人CETP,制备兔抗人CETP的多克隆抗血清.方法:采用RT-PCR方法,将人CETP基因克隆到pET-30b( )上,构建CETP原核表达载体并转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,切胶纯化蛋白后免疫家兔,制备CETP抗血清,以ELISA、Western blot、细胞免疫荧光方法对抗血清效价及特异性进行鉴定.结果:SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,CETP基因在大肠杆菌BL21(DE3)的包涵体中高效表达,最佳诱导表达时间为4 h.将切胶纯化的蛋白免疫家兔,ELISA法测定的抗血清效价为1∶5.12×105.Western blot及细胞免疫荧光检测结果显示,抗血清可以与CETP原核及真核表达蛋白特异结合.结论:成功地将CETP进行了原核表达并制备了高效价、高特异性的兔抗人CETP抗血清,为进一步研究CETP的结构与功能奠定了基础.     

树鼩胆固醇酯转运蛋白的cDNA和蛋白质结构分析

目的　获得不易感动脉粥样硬化动物树胆固醇酯转运蛋白 (CETP)的cDNA和蛋白质序列 ,分析其结构特点 ,寻找其可能的抗动脉粥样硬化分子机制。方法　以从树肝脏mRNA反转录获得的cDNA一链为模板 ,应用SMART RACE技术 ,获得了树CETP的cDNA序列 ,并推导出其蛋白质氨基酸序列 ,应用分子生物学软件对该蛋白的一级、二级结构进行分析和比较。结果　获得的树CETPcDNA(在GenBank中的注册号为AF334 0 33)长 16 36bp ,编码 485个氨基酸 ,其成熟蛋白由 477个氨基酸组成 ,比人多一个氨基酸 (Gly318) ,该蛋白与人、家兔的同源性分别为 88%和 82 %。序列中与CETP结合和转运中性脂质功能相关的区域均非常保守 ,但在Asn34 2位的N 糖基化位点缺失 ,可能使其转运胆固醇酯的活性增加 ,利于外周组织和血浆中的胆固醇及其酯的清除。通过对不同种属蛋白序列的比较 ,初步分析了树CETP蛋白与功能相关的结构特点。结论　树CETP糖基化的特点有可能是该动物对动脉粥样硬化具有不易感性的分子机理之一     

丁丙氢化可的松霜膏治疗皮炎湿疹类皮肤病的疗效

目的:评价丁丙氢化可的松霜膏治疗皮炎湿疹类皮肤病的疗效和安全性。方法:采用随机对照开放试验,试验组188例,用丁丙氢化可的松霜膏涂于患处,tid,对照组120例用丁酸氢化可的松(尤卓尔)霜涂于患处,tid,疗程3～25d。结果:试验组的临床有效率、痊愈率及不良反应率分别为93.6％,77.7％和7.4％,对照组分别为92.5％,75.0％和8.4％,2组疗效和安全性结果经统计学处理均无显著性差异(P>0.05)。结论:丁丙氢化可的松霜膏治疗皮炎湿疹类皮肤病具有较好临床疗效。     

复方北芪口服液对大鼠大脑中动脉阻塞/缺血再灌流模型细胞凋亡的影响

目的　采用流式细胞仪检测复方北芪口服液对大鼠大脑中动脉阻塞 /缺血再灌流(MCAO/IR)模型细胞凋亡的影响 ,从细胞凋亡的角度探讨该药作用于脑缺血损伤的可能机制。方法　清洁级雄性SD大鼠 18只 ,随机分为模型组、假手术组、治疗组。取新鲜缺血侧脑海马制成单细胞悬液 ,进行凋亡的定量分析。结果　假手术组即可测得凋亡峰 ,模型组、治疗组细胞凋亡百分率明显高于假手术组 ,均有显著性差异 (P <0 .0 1) ;治疗组的百分率较模型组明显降低 ,有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　复方北芪口服液有明显抗凋亡的作用 ,运用补肾益气活血法治疗缺血中风有着普遍的指导意义     

应用Accufuser泵化疗的护理

总结45例消化道恶性肿瘤病人应用Accufuser泵化疗期间的临床护理,详细介绍了化疗泵的使用方法、携泵指导、化疗期间的管理措施和健康教育.全面细致的观察和护理是化疗顺利完成的重要保证,对减轻病人痛苦、改善病人生存质量具有积极意义。     

肺癌病人化疗期护理与健康指导

目的：探讨和总结肺癌病人化疗期的护理与健康指导方法。方法：根据化疗毒副反应的发生率实施相应的护理措施与健康宣教。结果：增进了患者的健康和自我保健技能，使化疗如期进行，改善了生活质量，延长了生存期。     

浅谈社区慢性病人的居家护理要点

本文意在阐明社区护理体系的重要作用；社区慢性病人居家护理准备；社区慢性病人的居家护理要点。