越鞠甘麦大枣汤增强突触可塑性产生抗抑郁样作用＊

目的 研究越鞠甘麦大枣汤的抗抑郁样作用并分析其对小鼠海马突触可塑性的影响。方法 昆明小鼠随机分为对照组和越鞠甘麦大枣汤组，给药24 h和7 天后进行悬尾测试（Tail suspension test，TST）和强迫游泳测试（Forced swimming test，FST）。运用电生理（electrophysiological experiment）技术检测小鼠海马区Schaffe侧枝-CA1的长时程增强（long term potentiation，LTP），利用western blot方法分析海马脑区α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体（α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionicacid receptor，AMPAR）和N-甲基-d-天冬氨酸受体（N-methyl-D-aspartate receptor， NMDAR）相关突触蛋白的表达水平。结果 给药24 h和7天后，与对照组小鼠相比，越鞠甘麦大枣汤给药组小鼠在TST（P <0.001）和FST（P <0.01）中的不动时间均明显降低，氯胺酮在给药24 h后显示出抗抑郁作用，但到第7天不能降低小鼠不动时间，越鞠甘麦大枣汤显示出更持久的抗抑郁样作用。电生理实验中，越鞠甘麦大枣汤可增强小鼠海马区的LTP（P < 0.001）。Western blot结果显示，GluR1、NR2B以及NR1的表达水平在给药后均明显增加（P < 0.05）。结论 越鞠甘麦大枣汤可能通过增强昆明小鼠海马脑区LTP，以及增加AMPA和NMDA受体相关突触蛋白的表达水平以提高突触传递效能，从而产生抗抑郁样作用。     

COPD伴抑郁障碍小鼠模型的建立及加味温胆汤的干预作用

目的?建立一种烟熏诱导的小鼠慢性阻塞性肺疾病（COPD）伴抑郁障碍模型,并评价加味温胆汤对COPD伴抑郁障碍小鼠的治疗作用及其机制。方法?将小鼠随机分为正常组与模型组,模型组每天烟熏4次。烟熏满15周后,测试正常组与模型组糖水消耗,观察二者气道和肺组织的病理改变等,在确认COPD伴抑郁障碍小鼠模型成功后,将模型组小鼠随机分为模型组、加味温胆汤高剂量组、加味温胆汤低剂量组及阳性药组,连续给药3周,给药结束后,测试各组小鼠的糖水消耗、悬尾不动时间,检测肺功能,并检测小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞数,观察气道和肺组织病理改变等。结果?与正常组相比,模型组小鼠在烟熏满15周时,体质量下降,糖水消耗比例降低,增强呼吸间歇（Penh）升高。连续给药3周后,与模型组相比,加味温胆汤组小鼠体质量增加,糖水消耗升高,悬尾不动时间减少,说明其抑郁样症状减轻;显著降低模型组小鼠吸气阻力（RI）,升高肺动态顺应性（Cdyn）;显著降低总白细胞数与中性粒细胞数;降低肺泡灌洗液以及海马组织中炎症因子等。结论?用烟熏法所建立的COPD伴抑郁障碍小鼠模型较为符合本病的病程发展及临床特征,中药复方加味温胆汤对COPD伴抑郁障碍小鼠具有疗效,能够改善其病理与功能的改变,其机制可能与降低外周及中枢炎症有关。      

中西医临床医学专业分子生物学实验教学实践

分子生物学是中西医临床医学专业学生重要的专业基础课,分子生物学实验课程是分子生物学理论课的配套课程。文章对中西医临床医学专业分子生物学实验课程设置特点及教学过程中存在的问题进行了探讨,并就实验教学总体思路和目标、教学方式和内容、考核评价体系等方面提出一些改革措施,为提高分子生物学实验的教学质量,培养中西医临床医学专业创新型人才提供参考。     

盐酸丁螺环酮治疗阿尔茨海默病伴发抑郁焦虑障碍患者的效果分析

目的 分析阿尔茨海默病伴发抑郁焦虑障碍患者采用盐酸丁螺环酮治疗的效果。方法 60例阿尔茨海默病伴发抑郁焦虑障碍患者,随机分为对照组和试验组,每组30例。对照组患者采用常规治疗,试验组患者在对照组基础上采用盐酸丁螺环酮治疗。比较两组患者临床疗效及汉密尔顿抑郁焦虑综合评分、Zung心理抑郁焦虑综合评分、康耐尔痴呆抑郁量表(CSDD)评分。结果 试验组患者临床总有效率为93.33%,高于对照组的40.00%,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,试验组患者汉密尔顿抑郁焦虑综合评分、Zung心理抑郁焦虑综合评分、CSDD评分分别为(51.50±3.01)、(49.20±3.32)、(7.50±0.37)分,均低于对照组的(72.80±3.18)、(71.40±3.31)、(9.10±0.72)分,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 采取盐酸丁螺环酮治疗阿尔茨海默病伴发抑郁焦虑障碍患者的效果显著,能够显著改善患者的临床症状,值得推广。     

越鞠丸合甘麦大枣汤加减对谷氨酸诱导的HT22细胞损伤模型的神经保护作用

目的:探讨越鞠丸合甘麦大枣汤加减(YJGZ)对谷氨酸诱导的小鼠海马神经元细胞系(HT22)细胞损伤的神经保护作用。方法:HT22细胞系无菌培养,以高浓度谷氨酸建立细胞损伤模型,并制备YJGZ水提液和含药血清,分为正常组,模型组,YJGZ含药血清组(1%,5%,10%),YJGZ水提液组(166 mg·L~(-1)),尼莫地平组(100μmol·L~(-1))。噻唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞存活率;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测乳酸脱氢酶(LDH)释放率及细胞内活性氧自由基(ROS)的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马N-甲基-D-天冬氨酸受体亚单位2B蛋白(NR2B),环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB),磷酸化CREB(p-CREB),细胞外调节蛋白激酶(ERK),磷酸化ERK(p-ERK)的蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组细胞存活率显著下降(P 0. 01),乳酸脱氢酶(LDH)释放率明显增加(P 0. 05),细胞内活性氧(ROS)水平明显增加(P 0. 05),NR2B蛋白的表达明显升高(P 0. 05),CREB,p-CREB,ERK,p-ERK蛋白表达水平明显降低(P 0. 05);与模型组比较,YJGZ水提液组和尼莫地平组均能显著提高谷氨酸模型条件下HT22细胞的存活率(P 0. 01),减少细胞损伤,减少LDH的释放率,降低细胞内ROS水平(P 0. 05,P 0. 01),降低NR2B蛋白的表达水平(P 0. 05),增加CREB,p-CREB,ERK,p-ERK蛋白的表达(P 0. 05); YJGZ含药血清组与模型组比较,HT22细胞存活率并没有提高。结论:YJGZ水提液对谷氨酸诱导的HT22细胞损伤具有显著的保护作用。     

孕前皮质酮诱导对小鼠产后抑郁行为及AKT/mTOR信号通路的作用

目的观察孕前慢性皮质酮诱导产后抑郁(PPD)模型小鼠行为改变及其分子机制。方法C57BL/6N母鼠进行皮质酮注射,造模4周,然后与正常公鼠交配,分娩后分为空白组和孕前皮质酮诱导组,于造模4周和分娩3周时进行行为学测试。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠海马中蛋白激酶B(AKT)、雷帕霉素靶蛋白(m TOR)总蛋白及磷酸化蛋白的表达。结果小鼠造模后和产后体重均明显下降(P0.01),悬尾测试不动时间(TST)均显著增加(P0.01);强迫游泳测试(FST)结果中模型组小鼠在造模4周时不动时间明显增长(P0.01),产后3周时无明显差异(P0.05);陌生环境摄食测试结果中模型组首次进食潜伏时间显著增加(P0.01),在摄食总量上,造模4周时明显下降(P0.01),产后3周时无明显差异(P0.05)。Western blot结果显示,模型组小鼠海马中总AKT、总mTOR蛋白表达无明显变化(P0.05),p-AKT(P0.05)、p-mTOR(P0.01)表达显著下降。结论慢性皮质酮孕前注射可诱导C57BL/6N小鼠出现产后抑郁表型,其发病机制可能与AKT-mTOR信号通路活性下降有关。     

越鞠丸加四君子汤快速上调BDNF蛋白表达产生抗抑郁作用研究

目的观察越鞠丸加四君子汤(YS)的抗抑郁作用及其分子机制。方法将100只ICR雄性小鼠随机分成YS(高、中、低剂量3个组)、阳性对照西药氯胺酮(Ket)组和空白对照组,运用小鼠悬尾实验(TST)和强迫游泳实验(FST),检测药物的抗抑郁作用;运用蛋白印迹表达方法检测小鼠海马中的脑源性神经营养因子(BDNF)以及调控其表达的垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)蛋白表达变化情况。结果与空白组相比,YS和Ket组小鼠悬尾和强迫游泳的不动时间显著降低(P0.01),海马中的BDNF和PACAP的蛋白表达量显著上调(P0.05,P0.01)。结论 YS通过快速增加小鼠海马中的BDNF和PACAP蛋白的表达而产生抗抑郁的作用。     

越鞠丸石油醚部位潜在的快速抗抑郁作用与BDNF、TrkB蛋白表达的上调相关北大核心CSCD

目的研究越鞠丸石油醚部位是否具有快速抗抑郁潜力,并对其有效剂量及潜在的生物学机制进行了探讨。方法将44只昆明种♂小鼠随机分成空白组(生理盐水组)、越鞠丸石油醚部位(YJ-PE)高、中、低剂量组及氯胺酮组。单次给药后30 min对昆明小鼠进行小鼠悬尾行为绝望测试。再将24只昆明种♂小鼠分成空白组、筛选出有效的越鞠丸石油醚部位低剂量组和氯胺酮组,单次给药24 h后进行小鼠悬尾行为绝望测试。利用Western blot实验分别检测给药后30 min及24 h小鼠海马区BDNF和TrkB蛋白的表达变化。结果单次给药越鞠丸石油醚部位从30 min到24 h均能对其小鼠悬尾的行为绝望行为产生抗抑郁作用。给予越鞠丸石油醚部位30 min后小鼠海马中的BDNF及其受体TrkB的表达明显上调,且这种抗抑郁的作用机制可持续到24 h。结论越鞠丸石油醚部位(低剂量)具有快速抗抑郁的药物潜力,且这种潜在的快速抗抑郁作用与BDNF及其受体TrkB的激活相关。     

环孢菌素A合成酶及其遗传改造研究进展

环孢菌素A是从真菌中提取的一种新型免疫抑制剂,可选择性作用于T细胞,抑制其活化,现主要应用于器官移植时的排斥反应。环孢菌素A是由环孢菌素A合成酶通过模块指导依次合成并环化成环肽。环孢菌素家族已有2000多种,应用到免疫,抗病毒肝炎等许多领域。本文简要介绍环孢菌素A合成酶的结构及合成环孢菌素A的机制,以及对其实施遗传工程改造方面的研究进展。     

加味补阳还五汤对防治动脉粥样硬化的ApoE-/-小鼠Toll样受体4及其下游主要元件的影响

目的:探究加味补阳还五汤对于载脂蛋白E基因敲除小鼠的Toll样受体4(TLR4)及髓样分化因子88(My D88),肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6),核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响,讨论加味补阳还五汤对于动脉粥样硬化的防治机制。方法:将30只雄性载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为模型组,阿托伐他汀组,加味补阳还五汤组,每组10只,以10只C57BL/6J小鼠设空白组。除空白组正常饮食饮水外,每组给予高脂饲料喂养8周。空白组及模型组每日给与0.9%Na Cl溶液灌胃,阿托伐他汀组及加为补阳还五汤组每日以相应药物灌胃。第9周后采用生化检测方法检测血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)。采用苏木素-伊红(HE)染色方法观察,并测量斑块所占管腔面积之比。以实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测TLR4及My D88,TRAF-6,NF-κB的mRNA表达;蛋白质印迹(Western blot)法测定其蛋白表达的变化。结果:血脂水平方面,与模型组比较加味补阳还五汤组与阿托伐他汀组均能降低载脂蛋白E基因敲除小鼠TC,TG,HDL-C,LDL-C水平,同时升高HDL-C水平(P0.01);镜下观察加味补阳还五汤组与阿托伐他汀组均能较模型组斑块有所减少,主动脉血管细胞排列较整齐,炎性细胞浸润减轻,小鼠的主动脉斑块在血管的占比均有不同程度地降低(P0.01)。mRNA与蛋白水平上与模型组比较加味补阳还五汤与阿托伐他汀组均能有效降低TLR4及My D88,TRAF-6,NF-κB mRNA与蛋白的表达(P0.05,P0.01)。结论:加味补阳还五汤对于AS的发生发展有预防作用,其机制可能与抑制TLR4及其下游信号转导通路主要元件有关。