生脉对鼠病毒性心肌病心肌线粒体能量代谢的保护作用

目的：观察生脉注射液对实验性病毒性心肌病小鼠心肌线粒体能量代谢的影响,探讨线粒体能量代谢变化在病毒性心肌病发病中的作用。方法：取Balb／C小鼠,用柯萨奇病毒B3m反复增量感染之,建立心肌病动物模型,生脉干预组小鼠于实验的第60d开始,给予生脉注射液灌胃。存活小鼠：心肌病组（30只）、生脉干预组（36只）。另设正常对照组（13只,给予生理盐水腹腔注射）。104d处死全部小鼠。分别检测3组小鼠心功能及以荧光分光光度计比色法检测其心肌线粒体细胞色素C氧化酶（CCO）活力。结果：病毒性心肌病组小鼠心输出量（CO）[（1.37±0．06）ml／min：（2．13±0．09）ml／min,]、线粒体氧化磷酸化标志CCO活性[（3．06±0．76）k／min·mg：（4．53±1．19）k／min·mg],较正常对照组明显下降（P均〈0．01）;生脉注射组小鼠CO[（1．58±0．07）ml／min：（1.37±0．06）ml／min],CCO活性[（3．98±0．96）k／min·mg：（3．06±0．76）k／min·mg]较心肌病组明显提高（P均〈0．01）。结论：心肌线粒体能量代谢障碍是病毒性心肌病的重要病理生理基础,生脉注射液具有保护线粒体能量代谢作用。     

柯萨奇病毒心肌病动物模型研究

目的 研究反复增量柯萨奇病毒B3m(CVB3m)感染对小鼠心肌的影响,建立病毒性心肌病动物模型.方法 80只3~4周龄雄性Balb/c小鼠,随机分为心肌病组、单次感染组和正常对照组,于首次感染病毒后第120 d处死小鼠,应用阻抗微分法测定心输出量,病理及组织化学技术分析心肌病理损伤和胶原系统改变,计算胶原容积分数.结果...     

人组织因子途径抑制物基因在兔颈动脉损伤血栓形成中的作用

Objective To observe the effects of tissue factor pathway inhibitor(TFPI) on thrombosis formation in rabbit carotid arteries after ballon injury. Methods Fouty rabbits with the weight 2.5-3.0 kg were respectively divided into 4 groups, Ad-TFPI, Ad-LacZ, PBS and normal control groups. The normal control group was not given any treatment and other 3 groups were given 0.2 ml Ad-TFPI, Ad-LacZ or PBS reproduced by the Dispatch catheter respectively after the PTCA balloon iniury on the right carotid arteries. Ten days after gene transfer the repeated balloon injury was performed in the 3 groups, and the first balloon injury was performed in the normal control group by the same method. The carotid blood flow was recovered immediately after the injury. Thirty minutes later all the animals were sacrificed. The injured carotid arteries and one part of contralateral normal artery were cut down, scissored along the long axis, flattened and fixed in the 2% glutaral. The platelet aggregation and thrombosis formation on the luminal surfaces was observed under electron microscope. Results The electron microscope results showed that the vascular endothelial cell structure was integrated and lined up in order in the nomal artery which had no any injury. After the balloon injury in the normal control group, the structure of the endothelial cell was disintegrated, and there was some platelet aggregation but no fibrosis formation. A large amount of platelet aggregated but no fibrosis formed in Ad-TFPI group after the repeated balloon injury. A large amount of fibrosis formed and red cells piled up in the Ad-LacZ and PBS group. The positive rate of thrombosis formation among groups had siginificant differences(χ2=14.95, P<0.01). The positive rate in Ad-TFPI group(20%) was lower than that in Ad-LacZ group(80%, χ2=7.20, P<0.01) and PBS group(70%, χ2=5.05, P<0.05), but was higher than that in the normal control group(10%, χ2=0.39, P>0.05). The positive rate in Ad-LacZ group(80%) was higher than in the normal control group(10%, χ2=9.90, P<0.01) and in the PBS group(70%, χ2=0.27, P> 0.05). The positive rate in PBS group(70%) was higher than that in the normal control group(10%, χ2=7.50, P< 0.01). Conclusions The repeated balloon injury method can cause a large amount of fibrosis formation in the rabbit carotid. TFPI gene inhibits thrombosis formation in balloon-injured rabbit carotid arteries.     

人组织因子途径抑制物腺病毒表达系统的构建及体内表达

目的构建携载人组织因子途径抑制物(tissuefactorpathwayinhibitor,TFPI)基因的重组腺病毒载体,为基因治疗提供实验基础。方法利用基因重组技术,将人TFPI基因连接到穿梭质粒pDC316中,然后将腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1,3Cre以及重组穿梭质粒pDC316-TFPI共转染293细胞,并在其中发生Cre重组酶介导的位点,特异性重组及腺病毒包装,扩增后进行滴度测定。将包装成功的携带人TFPI基因的重组腺病毒(Ad-TFPI)转染兔颈动脉,并用携带LacZ报告基因的重组腺病毒(Ad-LacZ)作为对照,3d后RT-PCR、ELISA法检测人TFPImRNA、蛋白的表达。结果得到了携带人TFPI基因的重组腺病毒,包装的病毒蚀斑形成单位(plaqueformationunit,PFU)滴度为7.6×1012/L。在Ad-TFPI转染兔颈动脉后3d,RT-PCR法和ELISA法均检测出TFPI表达,Ad-LacZ转染后未测到人TFPI的表达。结论成功构建了人TFPI腺病毒表达载体,为下一步的基因治疗提供了基础。     

心肌梗死急性期坏死心肌内的细胞移植研究

近年来,为了逆转心肌梗死后心力衰竭的发生,学者们尝试将细胞移植技术应用于心血管领域来修复受损的心脏、替代坏死的心肌细胞。本实验旨在通过大鼠急性心肌梗死模型探讨体外培养的胚胎心肌细胞在急性心肌坏死内存活的可能及其衍变。一、材料与方法1.实验动物:纯种系Wistar大鼠(雄性,体重2 5 0～3 0 0 g) ,购自哈尔滨医科大学第二临床医学院动物实验中心。2 .实验试剂:DMEM培养基、胎牛血清、胰蛋白酶(Gibco公司) ;5 溴脱氧尿核苷(BrdU )、抗BrdU单克隆抗体(Br dU Ab ,Sigma公司)。3 .实验分组:大鼠平均分为3组。移植组与空白组:开胸…     

心脏离体灌流装置观察细胞移植对心脏功能的影响

目的观察胚胎心肌细胞移植到大鼠急性心肌梗死区后对大鼠心脏功能的影响及其存活情况。方法100只成年大鼠随机分成2组。移植组开胸结扎大鼠冠状动脉后在梗死区内注射培养的胚胎心肌细胞悬液;对照组结扎冠状动脉后在与移植组相同的部位注射等量的细胞培养液。各组分别在移植后的48h、72h、1周、2周收集心脏标本,HE染色及抗5鄄溴脱氧尿核苷(5鄄BrdU)免疫组化染色。Langendorff心脏离体灌流装置测定移植术后第2周各组大鼠的心脏功能。结果移植组大鼠心脏左室收缩峰压(LVSP)、左室内压最大上升与下降速率( dp/dtmax,-dp/dtmax)与对照组相比明显升高,差异有非常显著意义(P<0.01),左室舒张期末压(LVEDP)明显降低,与对照组相比差异也有非常显著意义(P<0.01)。在移植组心肌梗死区内可以看到存活的胚胎心肌细胞,对照组未发现。结论胚胎心肌细胞移植能够改善大鼠的心脏功能,并且可以在大鼠的心肌梗死区内存活及分化。     

病毒性心肌病小鼠心肌线粒体能量代谢变化研究

目的：观察实验性病毒性心肌病小鼠心肌线粒体能量代谢变化情况，探讨线粒体能量代谢变化在病毒性心肌病发病中的作用。方法：用柯萨奇病毒B3m反复增量感染BALB／C小鼠，建立心肌病动物模型，以荧光分光光度计比色法检测其细胞色素C氧化酶活力。结果：病毒性心肌病组小鼠线粒体氧化磷酸化标志酶细胞色素C氧化酶活力较对照组明显下降（P〈0．05）。结论：心肌线粒体能量代谢障碍是病毒性心肌病的重要病理生理基础。     

Preβ-1高密度脂蛋白与心血管疾病关系的研究进展

动脉粥样硬化是心血管疾病重要的病理生理基础,延缓和防治动脉粥样硬化对于减少和降低心血管疾病的发病率及死亡率具有重要意义。HDL(high density lipoprotein,HDL)通过参与介导胆固醇逆向转运(reverse cholesterol transport,RCT）在抗动脉粥样硬化的形成和进展中发挥了重要作用。Preβ-1高密度脂蛋白（Prebeta-1 high density lipoprotein,preβ1-HDL）作为HDL的一种亚类,是外周细胞移出胆固醇的最初接受体,直接参与了胆固醇逆向转运的起始步骤,并在随后胆固醇酯化及转运中起着重要作用。本文就preβ1-HDL的结构、代谢及其与心血管病的关系作一简要综述。     

人组织因子途径抑制物基因在兔颈动脉损伤血栓形成中的作用

目的 观察人组织因子途径抑制物(tissue factor pathway inhibitor,TFPI)基因在兔颁动脉损伤血栓形成的作用.方法 大耳白兔40只,体质量2.5～3.0 kg.将白兔按体质量随机分为4组:腺病毒介导的TFPI基因(Ad-TFPI)转染组、腺病毒介导的LacZ基因(Ad-LzcZ)转染组、磷酸盐缓冲液(PBS)组和对照组,每组10只.对照组不进行任何处理,另3组用PTCA球囊导管对白兔右侧颈动脉进行损伤,损伤处分别用DisDatch转基因导管按组别局部注射转染Ad-TFPI、Ad-LacZ液和PBS各0.2 ml.转染10 d后,采用相同方法对白兔颈动脉损伤处进行二次损伤,对照组进行第1次损伤,损伤后立即恢复血流.30 min后处死白兔,分别取出损伤侧和对侧颈总动脉,沿长轴剪开、展平,2%戊二醛固定,扫描电镜下观察4组白兔损伤处动脉管壁血小板聚集及纤维素(血栓)形成情况.结果 扫描电镜下,正常未经任何损伤的颈动脉管腔内可见血管内皮细胞结构完整,排列整齐;对照组在球囊损伤后血管内皮不完整,有部分血小板聚集,血管肇上无纤维素生成;Ad-TFPI组在二次损伤后血小板聚集增加,但血管壁上未见纤维素形成;Ad-LacZ组和PBS组可见皿管壁上有大量的纤维素形成和红细胞堆积.血管壁血栓形成阳性率组间比较差异有统计学意义(χ2=14.95,P<0.01);其中Ad-TFPI组(20%)低于Ad-LacZ组(80%,χ2=7.20,P<0.01)和PBS组(70%,χ2=5.05,P<0.05),高于对照组(10%,χ2=0.39,P>0.05);Ad-LacZ组(80%)高于对照组(10%,χ2=9.90,P<0.01),也高于PBS组(70%,χ2=0.27,P>0.05);PBS组(70%,)高于对照组(10%,χ2=7.50,P<0.01).结论 二次球囊损伤法可造成大量血栓形成;腺病毒表达载体TFPI可以抑制动脉损伤后纤维素沉积.     

冠状动静脉瘘致异常Q波一例

患者女性 ,36岁。因体检中发现心电图异常Q波收入我院。无胸痛、胸闷、心悸、气短等不良主诉。查体 :血压10 0 / 6 0mmHg(1mmHg=0 133kPa) ,无颈静脉怒张 ,双肺呼吸音清。心界不大 ,心率 71次 /min ,心律齐 ,于胸骨左缘 3、4肋间可闻及Ⅲ级收缩期吹风样杂音。腹部无压痛 ,肝、脾未触及。双下肢无水肿。入院后行下列辅助检查 :心电图示Ⅱ、Ⅲ、aVF异常Q波 ;超声心动图示各腔室大小正常 ,瓣膜结构正常 ,室间隔和左室后壁厚度正常 ;X线胸片示心、肺无异常 ;心肌酶学和肌钙蛋白均在正常范围 ;心内膜下心肌活检示 :心肌细胞排列整齐 ,未见心…