人肽脱甲酰基酶基因pdf与肿瘤细胞生长的相关性

目的：研究人肽脱甲酰基酶（HsPDF）基因pdf在不同肿瘤细胞系中的表达情况并探讨该基因与肿瘤细胞生长的相关性。方法：体外培养肿瘤细胞，采用半定量RT-PCR方法检测不同肿瘤细胞系中pdf mRNA的水平；用HsPDF抑制剂Actinonin处理细胞并通过细胞形态学、MTT法、RT-PCR及凝胶电泳等技术检测pdf基因与肿瘤细胞生长的相关性。结果：RT-PCR结果表明，该基因在13种不同来源的人肿瘤细胞系和正常组织中的表达具有显著差异。其中，在Hela、MDA-MB-231、K562等肿瘤细胞系中高表达，而在人正常肺组织中低表达（P〈0．001）。体外试验显示，Actinonin可显著地抑制肿瘤细胞的生长．使细胞中pdf基因表达量相应的下降，且呈明显的浓度依赖性；同时，光镜观察结果显示Actinonin对肿瘤细胞有诱导凋亡的作用。结论：pdf是一种广泛分布于不同组织的基因，它与肿瘤细胞的生长增殖间存在着显著的相关性。     

CAR-T制备工艺中PD-1表达的动力学研究

目的 研究嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)制备工艺中抗CD3/CD28磁珠和慢病毒对T细胞中程序性死亡因子1(PD-1)蛋白表达的影响,为改善其体内抗肿瘤活性研究提供理论依据.方法 筛选高表达PD-1细胞系,添加CAR-T制备工艺中抗CD3/CD28磁珠和慢病毒(CAR-GFP、CAR-CD19、CAR-CD30),流式细胞术检测T细胞系PD-1蛋白的变化.利用PD-1刺激剂研究CAR-T制备中PD-1的表达.结果 流式细胞分析显示,抗CD3/CD28磁珠和CAR-CD30慢病毒能显著刺激Jurkat中PD-1蛋白表达[(63.5±4.9)％和(63.0±5.3)％,P?0.01].Jurkat添加0.5:1抗CD3/CD28磁珠刺激后,PD-1表达量在48 h为最大值,之后随时间增加PD-1蛋白表达下降,144 h时下降到(4.5±0.3)％以内.CAR-CD30慢病毒以MOI=3感染复数刺激Jurkat后PD-1蛋白表达比较稳定.T淋巴细胞中添加抗CD3/CD28磁珠能提高约3倍PD-1的表达.结论 低浓度抗CD3/CD28磁珠能短暂性刺激T细胞中PD-1蛋白表达且不影响其活率.     

尤曼桉叶总黄酮的测定方法和品质鉴别研究

目的研究尤曼桉叶总黄酮的测定方法和品质鉴别方法。方法用紫外分光光度法、三氯化铝比色法、硝酸铝比色法对四川引种的尤曼桉叶总黄酮进行测定并和高效液相色谱法测定结果进行比较。结果引种的尤曼桉存在叶片甲醇提取液A259/A364≈1.71和A259/A364≈2.34的两种品质不同的植株,经液相色谱分析其芦丁含量和化学成分有明显区别。A259/A364≈1.71的植株4种方法测定结果差异不大,而A259/A364≈2.34的植株硝酸铝比色法的测定结果分别高出高效液相色谱法和三氯化铝法46.4%,39.9%。结论A259/A364≈2.34植株可能含有干扰硝酸铝比色法的成分。三氯化铝比色法测定尤曼桉叶总黄酮优于紫外分光光度法和硝酸铝法;采用热水提取、紫外分光法和高效液相色谱能很容易地将两类植株的叶片鉴别。     

药物制剂工程课堂教学体会

药物制剂工程是药剂学和工程学交叉之后产生的一门新兴学科。根据该课程内容特点,对在课堂教学过程中应采用的适宜教学方法和教学手段进行阐述和讨论。     

人SMYD3基因原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达

构建人SMYD3基因原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达。通过PCR方法从重组质粒pcD-NA-SMYD3中扩增得到SMYD3基因,将其克隆入pGEX-6P-1原核表达载体。将重组质粒转化入E.coli Rosetta(DE3)中,以IPTG诱导融合蛋白表达。表达产物用SDS-PAGE及Western blotting分析鉴定。酶切鉴定和测序结果证明成功构建了重组表达载体pGEX-SMYD3。SDS-PAGE及Western blotting鉴定结果表明人SMYD3基因在大肠杆菌中获得了良好的表达。实验成功地构建了SMYD3基因原核表达载体并在大肠杆菌中获得良好表达,为进一步研究SMYD3蛋白功能奠定了基础。     

制药工程专业建设和发展的总结

从历史沿革、学科支撑、课程设置、人才培养方案和实践教学体系等方面总结天津科技大学生物工程学院在制药工程专业建设中彰显生物制药特色、突出创新和实践能力培养的情况。提出专业建设发展中要紧密结合区域产业、不断优化和完善课程体系、加强实践和创新能力训练、构建科学的教学管理体系的研究思路,为今后制药工程专业的发展奠定良好基础。     

抗菌肽研究进展

文章归纳并讨论了抗菌肽的来源及分类、作用及其分子机制、应用领域、基因表达策略和应用前景等。     

利拉鲁肽对高血脂小鼠血脂的影响

目的 研究利拉鲁肽对高血脂小鼠体质量和血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)及高密度脂蛋白(HDL-C)的影响。方法 将40只小鼠,随机分为对照组、模型组、阳性组及利拉鲁肽低、高剂量组。对照组饲喂基础饲料,其余4组均饲喂高脂饲料。对照组和模型组均ip生理盐水,阳性组ig辛伐他汀,利拉鲁肽低、高剂量组每日分别ip 200、400μg/kg利拉鲁肽1次,连续4周。实验结束处死小鼠,称质量,检测各组小鼠给药前后血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C水平,并计算动脉粥样硬化指数(AI)和抗动脉粥样硬化指数(AAI)。结果 与对照组相比,模型组小鼠体质量及血脂指标明显升高;与模型组相比,阳性组、利拉鲁肽低、高剂量组小鼠体质量及血脂指标明显降低,且利拉鲁肽的效果明显优于辛伐他汀;与模型组相比,利拉鲁肽低剂量组的AI显著性降低,利拉鲁肽高剂量组的AAI显著升高。结论 利拉鲁肽能具有很好的调血脂、抑制动脉粥样硬化的功效,在预防心血管疾病方面具有很好的应用前景。     

六株乳杆菌胃肠道定植能力分析

目的分析确定Lactobacillus Acidophilus(L.acidophilus)1.1等六株乳杆菌胃肠道定植能力强弱。方法通过模拟人体胃酸环境(pH 3)和高胆盐环境(胆盐含量:0.1%～0.3%),及用胶原蛋白和人结肠癌细胞SW-480模拟人肠道黏附环境,利用MTT法分别测定六株乳杆菌在酸性和高胆盐环境下37℃作用4 h后的存活菌率及与黏附介质作用1 h后的黏附率。结果六株乳杆菌均具有一定的耐酸和耐胆盐能力,以及不同程度的胶原蛋白及肠道细胞黏附能力,其中以L.acidophilus 1.2相对最为突出。结论 L.acidophilus 1.2等六株乳杆菌均能够不同程度的黏附定植在胃肠道中,发挥其益生作用,是较为理想的胃肠道微生态制剂候选菌株。     

发酵桔梗活性成分分析及抗氧化能力研究

目的 筛选有助于提高桔梗发酵液活性成分的优势菌株,研究微生物发酵前后桔梗抗氧化能力的变化。方法 以分离得到的来源于新鲜桔梗根部土壤的巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium ZY2104、人参芽孢杆菌B.ginsengisoli ZY2103,来源于桔梗泡菜的类肠膜魏斯菌Weissella paramesenteroides ZY2101、绿色魏斯菌W.viridescens ZY2102,以及实验室已有的鼠李糖乳杆菌Lactobacillus rhamnosus sw01、枯草芽孢杆菌B.subtilis RZ001、啤酒酵母Saccharomyces pastorianus S5、酿酒酵母S.cerevisiae AY12和S.cerevisiae BY14作为实验菌对桔梗进行发酵,检测发酵前后桔梗中总多酚、总黄酮、总多糖含量的变化;通过测定桔梗皂苷D含量、总抗氧化能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除率、羟基自由基清除率、还原能力分析微生物发酵对桔梗提取液体外抗氧化能力的影响。结果 在温度37 ℃、时间72 h、接种量2%的条件下,相较于其他菌株及未发酵组,巨大芽孢杆菌ZY2104发酵的桔梗提取液中总多酚、总黄酮、总多糖的质量浓度显著提高,分别为（5.06±0.05）、（5.83±0.06）、（8.96±0.14）mg·mL^–1。抗氧化活性实验结果表明,相对于未发酵组,巨大芽孢杆菌ZY2104发酵组具有较强的总抗氧化能力、DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率及还原能力（P<0.05）。结论 筛选得到巨大芽孢杆菌ZY2104可作为发酵桔梗的优势菌株,可以显著提高桔梗提取液中主要活性成分含量和抗氧化能力。