70例脑梗患者CYP2C19基因多态性与中医证型分布的相关性

目的： 探究脑梗患者CYP2C19*2、CYP2C19*3和CYP2C19*17基因多态性与中医证型分布的相关性。方法： 将我院2017年4月-2019年7月中医科的脑梗患者根据中医证型进行分型,并且采集其静脉血,提取基因组DNA,然后进行扩增及结果判定,观察CYP2C19*2、CYP2C19*3和CYP2C19*17基因位点多态性与中医证型分布的相关性。结果： 某院中医科的脑梗患者根据中医分型,分为阴虚风动型、气虚血瘀型、痰热腑实型和风痰瘀阻型,其中,气虚血瘀型占比50%,占比明显高于其他证型（P<0.05）。基因检测分析发现,脑梗患者CYP2C19基因的突变易发于2、3位点,CYP2C19*2突变等位基因频率为0.307 2;CYP2C19*3突变等位基因频率为0.085 7;CYP2C19*17突变等位基因频率为0.021 5。其中,气虚血瘀型患者中CYP2C19*2基因突变率最高,并且CYP2C19*2突变型比率高于野生型（P<0.05）。结论： 脑梗患者的中医证型分布与CYP2C19*2基因多态性具有显著的相关性;气虚血瘀证型为脑梗患者的主要分型,并且气虚血瘀证型脑梗患者大多数存在CYP2C19*2基因突变,并且呈正相关。     

沉默MPR1基因的壳聚糖/siRNA纳米粒的制备与初步表征

摘要：目的:构建一种能够沉默肿瘤多药耐药相关基因MPR1的小干扰RNA（siRNA）的基因转染载体。方法:采用天然来源的高分子材料壳聚糖（CS）作为沉默MPR1的siRNA递送载体材料,以三聚磷酸钠（TPP）作为交联剂,制备了CS与siRNA静电结合的交联纳米粒-CS/siRNA。同时制备不经TPP交联的CS与siRNA简单静电结合物CS-siRNA作为对照。分别对其进行理化性质表征、稳定性、体外释药、细胞毒性及细胞摄取研究。结果:与CS-siRNA相比,CS/siRNA具有更小的粒径、更高的药物包封率、更少的药物释放和更好的血清稳定性,对siRNA的缩合保护作用更好,且CS/siRNA的放置稳定性显著优于CS-siRNA。所制备的空白载体、CS/siRNA和CS-siRNA均无明显的细胞毒性。CS/siRNA的细胞摄取率和胞内分布均显著优于CS-siRNA。结论:本研究所制备的CS/siRNA有望提供一个有潜力的siRNA转染载体。     

基于网络药理学探讨甘露消毒汤治疗新型冠状病毒肺炎的作用机制

目的:基于网络药理学的研究方法,探讨甘露消毒汤治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的可能机制。方法:采用SPSS Clementine 12.0软件对甘露消毒汤中所有药材的性味归经进行网络关联规则分析;通过中药系统药理学数据库和分析平台、中药系统药理学成分分析平台、中医药综合数据库等数据库,获取甘露消毒汤的活性成分和相对应的作用靶点;通过Gene Cards、人类孟德尔遗传综合数据库,查询物种为"Homo sapiens"对应COVID-19的相关基因,导入软件构建甘露消毒汤-COVID-19-靶点网络;采用STRING数据库,制作活性化合物作用靶点蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein Interaction,PPI)网络,采用R语言中Bioconductor程序包对作用靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,以预测其作用机制。结果:甘露消毒汤中的药材以性微寒,味辛苦,归心、肺、脾、胃经为主;甘露消毒汤中共得到219个药物靶点,COVID-19中共得到259个疾病靶点,最终取交集获得治疗关键靶点25个;GO功能富集得到74条GO条目;KEGG通路富集得到145条信号通路;PPI网络分析发现,EGFR、IL-6、MAPK8、CASP3、FOS、RELA、CASP8、NOS3、PPARG及ICAM1等靶蛋白可能是甘露消毒汤防治COVID-19疾病的潜在关键靶点。结论:甘露消毒汤中的槲皮素、木犀草素、汉黄芩素及山奈酚等成分可能为其治疗COVID-19的有效成分,其机制可能与上述成分作用于多个靶点来发挥抗炎、抗病毒,同时调节免疫等综合作用相关。     

LC-MS/MS法测定抑郁症患者晨尿中9种氨基酸类内源性物质的浓度

目的:建立测定人体尿液中5-羟基吲哚乙酸、谷氨酰胺、马尿酸、庚二酸、脯氨酸、酪氨酸、色氨酸、酪胺、缬氨酸浓度的方法。方法:采集抑郁症患者的晨尿,加入内标可的松,以乙腈处理后取上清液进行浓缩,采用液相色谱-质谱串联法(LC-MS/MS)进行分析。色谱柱为XTerra RP18;流动相A相为0.1%乙酸-水,流动相B相为0.1%乙酸-乙腈(梯度洗脱);柱温为40℃;流速为0.45mL/min;采用电喷雾离子源(ESI),以多反应监测方式(MRM)进行定量分析,5-羟基吲哚乙酸、谷氨酰胺、马尿酸、庚二酸、脯氨酸、酪氨酸、色氨酸、酪胺、缬氨酸和内标可的松在正离子模式下定量分析离子对分别为质荷比(m/z)192.2→146.1、147.2→130.0、180.1→105.1、161.1→125.2、116.1→70.2、205.2→188.2、138.2→121.1、182.0→123.0、118.2→72.1、361.2→163.0。结果:5-羟基吲哚乙酸、谷氨酰胺、缬氨酸、庚二酸、脯氨酸、酪胺的检测质量浓度范围为10.00~3 200 ng/mL(r=0.993 8~0.998 9,n=6),定量下限为10 ng/mL;色氨酸、酪氨酸、马尿酸的检测质量浓度范围为1 600~51 200 ng/mL(r=0.999 2~0.999 7,n=6),定量下限为1 600ng/mL,准确度试验结果为86.29%~98.65%(n=6),日内、日间精密度试验的RSD均不高于14.65%(n=6),基质效应的CV为6.18%~14.37%(n=6),提取回收率为86.21%~98.14%(n=6),稳定性试验的RE均<14.71%(n=3~6)。结论:该方法灵敏、准确,可用于测定人体内上述9种物质的浓度。     

武汉地区314 例消化系统疾病患者 CYP2C19 基因多态性分析

目的 分析武汉地区消化系统疾病患者CYP2C19 基因的多态性。方法 选取2016 年1 月— 2017 年12 月于湖北省武汉市第三医院行CYP2C19 基因多态性检测的无血缘关系汉族消化系统疾病患者314 例。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测质子泵抑制剂代谢相关酶CYP2C19 基因型,根据基因型判断代谢表 型,并分析性别、年龄及消化系统疾病临床分型与CYP2C19 基因多态性的相关性。结果 该研究共检测到8 种基因型：CYP2C19 *1*17、*1*1、*1*2、*1*3、*2*17、*3*17、*2*2 及*2*3 ;4 种代谢表型：超快代谢型 为0.96%,快代谢型型为36.94%,中间代谢型型为45.54%,慢代谢型型为16.56%。不同年龄、性别及消化系统 疾病临床分型患者CYP2C19 基因型比较,差异无统计学意义（P >0.05）;不同性别、消化系统疾病临床分型 患者代谢表型比较,差异无统计学意义（P >0.05）;不同年龄患者代谢表型比较,差异有统计学意义（P <0.05）。 结论 武汉地区消化系统疾病患者CYP2C19 基因具有多态性,其等位基因频率和代谢表型分布情况与亚洲 人群接近,与欧洲等其他国家人群存在明显差异。     

红景天苷对老龄大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察红景天苷(salidroside,Sal)对老龄大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法:采用线栓法制备老龄大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,观察红景天苷对老龄大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经功能障碍,脑水肿及脑梗死范围以及对脑缺血2h再灌注24h缺血脑组织能量物质ATP、葡萄糖无氧酵解产物以及体内自由基清除剂SOD、GSH和脂质过氧化产物MDA等生化物质的影响。结果:脑缺血2h再灌注24h腹腔注射Sal40,20,10mg.kg-1可明显减轻神经功能障碍(P<0.05,P<0.01),减轻脑水肿(P<0.05,P<0.01)及缩小脑梗死范围(P<0.05)。同时Sal40,20,10mg.kg-1组与缺血再灌注组相比,缺血脑组织内SOD活性和GSH活力明显增高(P<0.05,P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.05,P<0.01),大鼠脑组织内ATP含量显著升高(P<0.05,P<0.01),脑组织内LA含量明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:红景天苷对老龄大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有良好的保护作用。其机制与其改善缺血脑组织能量代谢、降低自由基损伤有关。     

红景天苷对脑缺血再灌注大鼠行为及脑梗塞范围的影响

目的观察红景天苷（Sal）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响。方法采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,再灌注同时各给药组腹腔注射相应的药物Sal和Nim,对大鼠进行神经功能评分,观察脑梗塞范围并测定脑含水量。结果模型组大鼠脑缺血2h再灌注24h后神经功能评分2．13&#177;0．31,Sal大、中剂量组神经功能评分显著升高（均P〈O．01）。模型组脑梗塞范围达（29．7&#177;6．3）％,脑含水量为（86．55&#177;0．45）％,Sal大、中剂量组脑梗塞范围显著缩小（P〈0．01,P〈0．05）,脑含水量显著减少（P〈0．01,P〈0．05）。结论红景天苷对局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用。     

星点设计-效应面法优化PLGA-PEG纳米粒的处方工艺

摘要：目的:采用星点设计-效应面法优化载体基质为PLGA-PEG的siRNA纳米粒的制备工艺。方法:采用复乳法制备载药纳米粒,以二氯甲烷体积、吐温-80的质量分数和复乳的超声时间为试验因素,纳米粒的平均粒径、包封率和突释量为考察指标,根据星点设计原理安排实验和处方工艺优化。结果:成功制备了纳米粒。最佳工艺为二氯甲烷体积13 ml,乳化剂吐温-80的质量分数为3.1%,复乳的超声时间为2.8 min;按优化处方工艺制备的纳米粒的平均粒径（101.5±6.3）nm,包封率（57.6±4.8）%,体外48 h累积释放度高于80%。结论:星点设计-效应面法适用于PLGA-PEG纳米粒的工艺优化,所建立的数学模型预测性良好。     

红景天苷对大鼠脑缺血再灌注损伤抗氧化活性的实验研究

目的观察红景天苷(Salidroside,Sal)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,观察红景天苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经功能障碍,脑水肿及脑梗塞范围以及对脑缺血2 h再灌注24 h缺血脑组织能量物质ATP、葡萄糖无氧酵解产物以及体内自由基清除剂SOD、GSH和脂质过氧化产物MDA等生化物质的影响。结果脑缺血2 h再灌注24 h腹腔注射Sal 24.5 mg.kg-1和60 mg.kg-1可明显减轻神经功能障碍(P<0.05),减轻脑水肿(P<0.05)及缩小脑梗塞范围(P<0.05)。同时Sal 24.5 mg.kg-1组和60 mg.kg-1组与缺血再灌注组相比,缺血脑组织内SOD活性和GSH活力明显增高(P<0.05,P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.05,P<0.01),大鼠脑组织内ATP含量显著升高(P<0.05,P<0.01),脑组织内LA含量明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论红景天苷对局灶性脑缺血再灌注损伤有良好的保护作用。其机制与其改善缺血脑组织能量代谢、降低自由基损伤有关。     

1例儿童肝豆状核变性并发肝损害的药物治疗分析和药学监护

目的 分析总结1例儿童肝豆状核变性(WD)并发肝损害的药物治疗，为WD患儿的药学服务提供借鉴。方法 通过梳理患儿疾病治疗过程，基于文献调研分析药物治疗方案，寻找临床药学服务切入点，进行药学监护、用药指导和健康教育。结果 患儿在临床药师参与的多学科照护下，肝功能逐渐恢复正常，最后病情好转出院。结论 临床药师应积极参与罕见病儿童患者治疗，提供高质量临床药学服务。