加味升降散对膜性肾病大鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路及自噬的影响

目的:探讨加味升降散对膜性肾病(MN)大鼠的干预作用及相关作用机制。方法:采用大鼠尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)的方法建立MN大鼠模型。设正常组、模型组、加味升降散组(27.3 g·kg-1)和贝那普利组(10 mg·kg-1),分别给予相应剂量药物灌胃,每日1次,连续干预4周。给药结束后检测大鼠24 h尿蛋白(UTP)水平,血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),总蛋白(TP),白蛋白(Alb),肌酐(SCr),尿素氮(BUN)水平;马松(Masson)染色、碘酸六胺银(PASM)染色及透射电镜观察大鼠肾脏病理学变化;免疫荧光观察大鼠肾脏免疫球蛋白(Ig)G沉积;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路相关分子及自噬相关指标LC3和Beclin1的表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠UTP,血清中TC,TG水平均升高,TP,Alb水平明显降低(P0.05);肾小球增大,基底膜出现不同程度的增厚和空泡变性,嗜复红蛋白沉积,肾小球毛细血管袢IgG弥漫性沉积,上皮下可见大小不等的电子致密物沉积,足细胞足突广泛融合;磷酸化(p)-PI3K,p-Akt和p-mTOR蛋白表达均明显增加(P0.05),自噬标志蛋白LC3和Beclin1蛋白表达量均明显下降(P0.05);与模型组比较,加味升降散组和贝那普利组大鼠UTP,血清中TC,TG水平均有不同程度的下降,TP,Alb水平有不同程度的升高(P0.05);大鼠肾组织病理损伤均有所减轻;p-PI3K,p-Akt和p-mTOR蛋白表达量明显下降(P0.05);自噬标志蛋白LC3和Beclin1蛋白表达量明显升高(P0.05)。结论:加味升降散可通过减少尿蛋白,减轻肾脏病理损伤,延缓疾病进展,其作用与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路和激活肾脏自噬有关。     

加味升降散对膜性肾病大鼠Notch信号通路及足细胞凋亡的影响

目的 通过研究加味升降散对膜性肾病（MN）模型大鼠Notch通路信号分子及下游凋亡相关基因的影响，探讨其抑制足细胞凋亡的分子机制。方法 将大鼠随机分为正常组，模型组，加味升降散组和贝那普利组，每组10只。采用尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白（C-BSA）建立MN大鼠模型，加味升降散组和贝那普利组分别以27.3，0.001 g·kg^-1灌胃（ig），正常组、模型组ig等体积生理盐水，连续干预4周。采用双缩脲法检测大鼠24小时尿蛋白（UTP）水平，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和免疫组化（IHC）检测大鼠肾组织中足萼蛋白（Podocalyxin），足细胞裂孔膜蛋白（Nephrin），膜蛋白（Podocin），突触足蛋白（Synaptopodin）mRNA及蛋白表水平，原位末端标记法（TUNEL）检测大鼠肾组织细胞凋亡率，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠肾组织中Notch1，Hes1，B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax），Bcl-2蛋白表达水平。结果 与正常组比较，模型组大鼠UTP水平显著升高，肾组织细胞凋亡明显增多，足细胞标志蛋白Podocalyxin，Nephrin，Podocin，Synaptopodin mRNA和蛋白表达水平明显下降，Notch1，Hes1，Bax蛋白表达量明显增多，Bcl-2蛋白表达量明显减少（P<0.05）；与模型组比较，加味升降散和贝那普利组大鼠UTP水平明显下降，肾组织细胞凋亡明显减少，足细胞标志蛋白Podocalyxin，Nephrin，Podocin，Synaptopodin mRNA和蛋白表达水平明显升高，Notch1，Hes1，Bax蛋白表达量明显减少，Bcl-2蛋白表达量明显升高（P<0.05）。结论 加味升降散可通过抑制Notch信号通路，减少大鼠肾组织足细胞凋亡，减轻MN大鼠肾损伤。     

基于TLR4/NF-κB信号通路探讨加味升降散对膜性肾病大鼠肾组织纤维化的影响

目的:观察加味升降散对膜性肾病(MN)大鼠肾组织纤维化的影响,探讨其防治MN及肾纤维化的作用机制。方法:大鼠尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)复制MN大鼠模型,将造模成功的MN大鼠随机分为模型组、加味升降散组(27.3 g·kg^-1)和贝那普利组(10 mg·kg^-1),分别给予相应剂量药物灌胃,1次/d,连续干预4周。给药结束后,采用马松(Masson)染色,碘酸六胺银(PASM)染色,免疫荧光和透射电镜(TEM)等方法观察大鼠肾脏病理学变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和免疫组化分别检测大鼠肾组织中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),核转录因子-κB(NF-κB),Toll样受体4(TLR4),纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1),转化生长因子-β(1TGF-β1),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMΑ)和Ⅳ型胶原(CollagenⅣ)mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠肾组织纤维化明显,血清中IL-1β,IL-6,TNF-α含量明显升高(P<0.05),肾组织中MCP-1,ICAM-1,NF-κB,TLR4,PAI-1,TGF-β1,α-SMA和CollagenⅣmRNA及蛋白表达量均明显升高(P<0.05);与模型组比较,加味升降散和贝那普利可明显改善大鼠肾脏纤维化,明显降低MN大鼠血清中IL-1β,IL-6,TNF-α含量(P<0.05),明显下调肾组织中MCP-1,ICAM-1,NF-κB,TLR4,PAI-1,TGF-β1,α-SMA和CollagenⅣmRNA及蛋白表达量(P<0.05)。结论:加味升降散可通过下调TLR4/NF-κB信号通路,减少炎症因子的释放和表达,抑制肾纤维化,减轻MN大鼠肾损伤。     

中药复方辅助治疗膜性肾病的系统评价和Meta分析

[目的]系统评价在常规治疗的基础上加用中药复方治疗膜性肾病(MN)的临床疗效.[方法]计算机检索中国知网、万方数据库、维普数据库、中国生物医学数据库、PubMed、Embase、Cochrane数据库,收集中药复方辅助治疗MN的临床研究,删除重复文献,通过阅读题目、摘要及全文剔除不符合纳入与排除标准的文献,对纳入文献进...     

檀金川教授治疗膜性肾病的用药经验挖掘

挖掘檀金川教授治疗膜性肾病的用药经验,总结其用药特点及规律.收集檀金川教授治疗膜性肾病的门诊病历,使用EpiData 3.1软件包进行数据录入,使用Excel 2013、SPSS 19.0和R 3.5软件包对纳入病历中的中药方进行统计分析及数据挖掘.最终纳入中药方353首,其中涉及中药163味,出现总频次为5273次....     

数据挖掘檀金川治疗慢性肾功能衰竭用药经验

[目的] 总结归纳檀金川教授治疗慢性肾功能衰竭的用药特点及规律,挖掘其用药经验。[方法] 采用回顾性研究的方法收集2016年1月—2019年4月檀金川教授治疗慢性肾功能衰竭的门诊有效病历,使用EpiData 3.1软件包进行数据录入,使用Excel 2013、SPSS19.0和R3.5软件包对纳入的中药方剂进行统计分析及数据挖掘。[结果] 共纳入中药方剂433首,使用药物种类155种,总计出现频次7 198次,从数据分析得出常用类方有6组。[结论] 总结出檀金川教授治疗慢性肾功能衰竭以温补脾肾,活血化瘀,泄浊解毒为基本治疗大法。