Bcl2及Bak1重组表达腺病毒对MG63细胞的影响

目的研究Bcl2、Bak1重组表达腺病毒载体单独或共转染对MG63细胞活性及结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、Runx2、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响。方法收集对数期MG63细胞,分为4组:A组:空载腺病毒干预组;B组:Bcl2重组表达腺病毒转染组;C组:Bak1重组表达腺病毒转染组;D组:Bcl2、Bak1重组表达腺病毒共转染组。A组给予空载腺病毒转染,B、C组分别给予Bcl2重组表达腺病毒、Bak1重组表达腺病毒转染,D组给予Bcl2、Bak1重组表达腺病毒共转染,MTT法检测细胞活性,碱性磷酸酶(alkaline phosphates,ALP)活性检测试剂盒检测ALP活性,流式细胞仪检测钙离子浓度,Western Blot检测CTGF、Runx2、OPN、TNF-α的表达。结果与A组相比,B组细胞活性、ALP活性升高,钙离子浓度降低,CTGF、OPN、Runx2蛋白相对表达量均升高,TNF-α表达量则降低,差异有统计学意义(P0.05);C组细胞活性、ALP活性降低,钙离子浓度升高,各蛋白相对表达趋势与B组相反,差异有统计学意义(P0.05);D组细胞活性、ALP活性、钙离子浓度升高,CTGF、Runx2相对表达量升高,OPN、TNF-α相对表达量降低,但差异均无统计学意义(P0.05)。(2)B组、C组、D组各检测指标组间比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 Bcl2重组表达腺病毒载体转染MG63细胞可增强细胞活性及钙化能力,促进骨形成。     

宫颈癌患者术后应对方式的调查分析

宫颈癌治疗仍以手术为主.手术和麻醉对患者而言是一种强烈的应激源[1].Koh和Gorgun等[2]指出,选择手术治疗的宫颈癌患者面临着生理丧失和女性特征丧失.根据ROY的适应模式,人在面对压力时会产生适应反应,而且人们的生理调节和心理调节是通过适应方式的应对行为表现出来.     

中药五倍子乌梅汤保留灌肠预防内镜下肠息肉摘除术后复发的效果研究

目的探讨肠息肉术后中药五倍子乌梅汤保留灌肠对肠息肉术后复发的预防效果。方法采用随机数表法将接受内镜下肠息肉摘除术的84例患者分为对照组和观察组,各42例。2组术后均实施外科常规护理,对照组于术后第8天口服马来酸曲美布汀胶囊治疗,观察组由中药房统一煎制五倍子乌梅汤给予中药保留灌肠治疗,2组均持续治疗4周并随访12个月。观察2组治疗前后腹痛、腹胀、大便泄泻等主要症状积分变化并评估中医证候疗效,比较2组术后6、12个月的复发情况。结果治疗后,2组腹痛、腹胀、大便泄泻积分均低于治疗前,且观察组积分低于对照组,差异有统计学意义(P 0. 05);观察组中医证候的治疗总有效率97. 62%高于对照组80. 95%,差异有统计学意义(P 0. 05);随访6个月时,2组肠息肉复发率比较,差异无统计学意义(P 0. 05),随访12个月时,观察组复发率7. 14%低于对照组23. 81%,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论中药五倍子乌梅汤保留灌肠能有效改善肠息肉患者术后临床症状,降低术后复发风险。     

补肾健脾活血方干预过表达DKK1骨细胞对细胞活性及BMP2的影响

目的用补肾健脾活血方干预过表达的DKK1腺病毒转染的成骨细胞,通过观察细胞的活性及BMP2的表达,研究补肾健脾活血方治疗骨质疏松的分子生物学机制。方法将培养细胞分成NC对照组,Ad-DKK1组两组。NC对照组由空载腺病毒转染;Ad-DKK-1组由包装过表达的DKK1腺病毒转染。每组分别用含药血清和空白血清干预。采用CKK-8检测细胞增殖,蛋白印记法检测BMP2的表达。结果各组细胞活性变化:空白血清和含药血清干预均能提高细胞活性。与空白血清分别干预的两组比较,含药血清分别干预后的两组,在24 h,48 h,72 h的细胞活性的增加倍数都较多;在采用蛋白印记法检测后,BMP2在含药血清分别干预的两组的相对表达量较空白血清分别干预的两组的相对表达量高(P0.01,P0.01),在NC对照组中含药血清干预与空白血清干预无明显差异。结论补肾健脾活血方含药血清可以提高细胞活性,提高BMP2的相对表达量,有利于成骨细胞的矿化,尤其在过表达DKK1干预后。补肾健脾活血方可能通过调控DKK1进而影响成骨细胞的代谢。     

补肾健脾活血方对去卵巢大鼠BMP2/Smad信号通路的影响

目的:研究补肾健脾活血方对去卵巢大鼠骨形态发生蛋白2(BMP2)/Smad信号通路的影响。方法:72只6月龄雌性SD大鼠,随机分为假手术组(24只),手术组(48只),双侧卵巢切除法造模,术后3个月两组各随机选取12只检测骨密度验证造模成功。手术组剩余的36只大鼠随机分为双侧卵巢切除模型组(OVX),补肾健脾活血方组(BSJPHX,给药剂量2.979 g·kg~(-1)),阿仑膦酸钠维D3片(Ⅱ)组(ALN,给药剂量1.02 mg·kg~(-1)),假手术组,OVX组给与等体积生理盐水灌胃。12周后处死各组大鼠,双能X射线法检测大鼠全身骨密度,生物力学试验进行胫骨三点弯曲试验,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测BMP2,Smad1,Runt相关转录因子2(Runx2),骨保护素(OPG)基因的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测BMP2,p-Smad1,Runx2,OPG蛋白的表达。结果:造模3个月后,与假手术组比较,OVX组大鼠骨密度明显降低,最大载荷及刚度均降低,BMP2,Smad1,Runx2,OPG基因和蛋白表达水平显著降低(P0.05);给药3个月后,与OVX组比较,BSJPHX组,ALN组骨密度均明显增高,最大载荷及刚度均增加,能显著提高BMP2,Smad1,Runx2,OPG基因和蛋白表达水平(P0.05)。结论:补肾健脾活血方既能通过调控BMP2/Smad通路的信号转导,又能上调OPG的表达,这可能是补肾健脾活血方防治绝经后骨质疏松症的机制之一。     

实施糖尿病教育的做法及体会

现将我们在临床实践中开展糖尿病(DM)教育的作法及体会报道如下. 1具体做法 1.1定期开办DM知识讲座:面向社会人群每月后两周四下午定期在我院举行宣传讲课,并负责发放有关科普资料,年受益人数1000人次,包括DM患者、健康人、及基层医护人员.     

沉默DKKl、Sost重组腺病毒载体的构建及其对MG63 细胞增殖、ALP活性和钙离子浓度影响研究

目的 构建Wnt信号通路抑制因子Dickkopfl(DKKl)、骨硬化蛋白Sclerostin( Sost)基因沉默重组腺病毒载体，观察其对MG63细胞增殖、碱性磷酸酶（ALP)活性和钙离子浓度影响作用。方法设计出特异性针对DKKl、Sost和无关对照序列 (Scr),构建DKKl、Sost沉默重组腺病毒载体，用qPCR法和蛋白印记（Western blot)法选出沉默效率最好的扩增DKK1、Sost沉默重组腺病毒载体，并用荧光显微镜观察计算病毒滴度。MG63细胞被分成空白对照组、沉默DKKl(Ad-shDKKl)组、沉默 Sost(Ad-shSost)组、沉默DKK1 + Sost( Ad-shDKKl + Ad-shSost)组4组，分别用优选出的沉默效率最好的shDKKl和shSost腺病毒载体转染MG63细胞，采用四甲基偶氮唑蓝微量酶反应比色法（MTT)检测观察细胞增殖、考马斯亮蓝蛋白定量法测定ALP 活性、流式分析法测定钙离子浓度。结果 ①DKK1 pAd-shDKKl-1和Sost pAd-GFP-shRNA-2沉默效率最高；②与空白对照组对比，沉默DKK1组、沉默Sost组、沉默DKK1 + Sost组的细胞光吸收值（OD)、ALP活性测定值均升高，而钙离子浓度均降低， 以沉默DKK1 +Sost组变化最明显，组间比较具有统计学差异（P<0.01和P<0.05)。结论 DKK1、Sost沉默可促进MG63细胞增殖、提高ALP活性，降低钙离子浓度，尤以二者同时沉默时的作用最强。     

多烯磷脂酰胆碱注射液（进口）与复方氨基酸注射液（6AA）存在配伍禁忌

多烯磷脂酰胆碱注射液（进口）英文名称为：Polyene Phosphatidycholine Inject，每安瓶含多烯磷脂酰胆碱232．5mg（天然多烯磷脂酰胆碱含有大量不饱和脂肪酸，主要为亚油酸），辅料有苯甲醇、核黄素、脱氧胆酸、氯化钠、氢氧化钠、注射用水。本品为黄色澄明液体，用于各种类型的疾病，如慢性肝炎、肝坏死、肝硬化、肝性脑病（包括前期肝性脑病）、     

补肾健脾活血方对成骨细胞增殖分化及BMP-2、Smad5影响的研究

目的:研究中药复方补肾健脾活血方对大鼠成骨细胞增殖分化及骨形成蛋白-2 (BMP-2)、Smad5表达的影响。方法:将60只3月龄雌性SD大鼠随机分为空白组、补肾健脾活血方组、阿仑膦酸钠组,每组20只。制备对应的含药血清后分别干预成骨细胞,采用细胞计数法(CCK-8)检测成骨细胞增殖活性,碱性磷酸酶染色(ALP)检测成骨细胞分化能力,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测BMP-2、Smad5 m RNA表达,蛋白免疫印迹法检测BMP-2、Smad5蛋白表达。结果:干预12 h、24 h、48 h时,各组细胞活性逐渐增强,干预48 h后各组细胞活性均降低。干预48 h时,与空白组、阿伦磷酸钠组比较,补肾健脾活血方组细胞活性最强(P0.05)。补肾健脾活血方组成骨细胞ALP染色最深,明显深于空白组和阿仑膦酸钠组。与空白组比较,补肾健脾活血方组BMP-2、Smad5蛋白及mRNA表达升高(P0.05);阿仑膦酸钠组BMP-2 mRNA表达降低(P0.05)。与阿仑膦酸钠组比较,补肾健脾活血方组BMP-2、Smad5蛋白及mRNA表达升高(P0.05)。结论:中药复方补肾健脾活血方可以促进大鼠成骨细胞增殖分化,提高BMP-2、Smad5 mRNA和蛋白表达。