竹节参鲨烯环氧酶基因的克隆及生物信息学分析

目的 克隆竹节参Panax japonicus鲨烯环氧酶基因（squalene epoxidase,PjSE）的全长cDNA序列,进行生物信息学分析和原核表达。方法 设计特异性引物,从竹节参中克隆得到PjSE序列;以PjSE基因序列作为输入数据,利用多序列同源比对等生物信息学分析工具进行序列分析;构建重组原核表达载体pCold-PjSE,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行蛋白诱导表达;采用实时荧光定量PCR技术分析该基因在竹节参不同组织中的相对表达量。结果 PjSE基因开放阅读框长度为1884 bp,编码627个氨基酸,PjSE蛋白相对分子质量为68 639.49,初步预测其具有跨膜结构域,可能定位在叶绿体上;聚丙烯凝胶电泳结果显示诱导表达蛋白的相对分子质量大小与预期结果一致;该基因在竹节参叶中表达量最高,须根次之,根中表达量最低。结论 PjSE基因的克隆、生信分析及原核表达研究,不仅有助于丰富竹节参中该类功能蛋白的种类和数量,完善竹节参皂苷类成分的生物合成途径,也为后期开展竹节参皂苷的异源合成提供了可供选择的关键基因元件。     

UDP-糖基供体在中药苷类成分生物合成中的应用及研究进展

尿苷二磷酸（UDP）-糖基供体是三萜、黄酮和蒽醌等中药活性成分糖基化修饰的重要组成前体。近年来，通过代谢工程策略合成苷类化合物已取得一定进展，但UDP-糖基供体在不同类型的底盘细胞中产量普遍偏低，极大地限制了中药苷类化合物的高效生物合成。作者从UDP-糖基供体的生物合成、循环再生以及代谢合成途径中关键基因调控、代谢模块优化等方面，重点综述了UDP-糖基供体在苷类成分合成中供应的研究进展，并展望了UDP-糖基供体在生物合成中的挑战和发展方向，以期为今后苷类成分的生物合成相关研究提供借鉴。     

白藜芦醇对高脂饮食诱导的认知障碍的保护作用及机制研究

目的观察白藜芦醇(RV)对高脂饮食(HFD)诱导的认知功能障碍的影响。方法 60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、高脂喂养组(HFD组)、HFD+30 mg/kg RV组(30 mg/kg RV组),HFD+67. 5 mg/kg RV组(67. 5 mg/kg RV组)和HFD+135 mg/kg RV组(135 mg/kg RV组),每组10只,共干预7个月。于干预结束后,检测小鼠的体质量和血脂水平。采用Morris水迷宫和新物体识别实验评价学习记忆水平。采用ELISA检测海马区IL-1β、TNF-α、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平。采用Western boltting法检测海马区沉默信息调节因子1(SIRT1)通路表达。采用免疫荧光染色检测海马CA1区SIRT1蛋白水平。结果 (1)与HFD组比较,30 mg/kg RV组第4～6个月体质量及三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著降低,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著增高(P 0. 05～0. 01); 67. 5 mg/kg RV组第4～6个月体质量及总胆固醇(TC)、TG、LDL-C水平显著降低,HDL-C水平显著增高(均P 0. 01); 135 mg/kg RV组第2～7个月体质量及TC、TG、LDL-C水平显著降低,HDL-C水平显著增高(P 0. 05～0. 01)。与135 mg/kg RV组比较,30 mg/kg RV组TC、TG、LDL-C水平显著增高,HDL-C水平显著降低(均P 0. 01);67. 5 mg/kg RV组TC、TG水平显著增高(均P 0. 05)。与67. 5 mg/kg RV组比较,30 mg/kg RV组TC、TG、LDL-C水平显著增高,HDL-C水平显著降低(P 0. 05～0. 01)。(2)与HFD组比较,30 mg/kg RV、67. 5 mg/kg RV、135 mg/kg RV组相对识别指数(DI)、穿越平台次数、第5 d进入平台时间显著升高(P 0. 05～0. 01)。与135 mg/kg RV组比较,30 mg/kg RV组DI显著降低(P 0. 01)。与67. 5 mg/kg RV组比较,30 mg/kg RV组DI显著降低(P 0. 01)。(3)与HFD组比较,30 mg/kg RV、67. 5 mg/kg RV、135 mg/kg RV组TNF-α、IL-1β、MDA水平显著降低,SOD水平显著增高(P 0. 05～0. 01)。与135 mg/kg RV组比较,30 mg/kg RV组TNF-α、IL-1β水平显著增高(均P 0. 01)。与67. 5 mg/kg RV组比较,30 mg/kg RV组TNF-α、IL-1β水平显著增高(均P 0. 05)。(4)与HFD组比较,30 mg/kg RV、67. 5 mg/kg RV、135 mg/kg RV组SIRT1水平显著升高,乙酰化p53(Ac-p53)、乙酰化核因子-κB(Ac-NF-κB)和乙酰化Forkhead转录因子(Ac-FoxO1)水平显著降低(P 0. 05～0. 01)。与135 mg/kg RV组比较,30 mg/kg RV组SIRT1水平显著降低,Ac-p53、Fox O1和AcNF-κB水平显著升高(P 0. 05～0. 01)。与67. 5 mg/kg RV组比较,30 mg/kg RV组Ac-p53水平显著升高(P 0. 05)。结论 RV具有浓度效应,可以减少小鼠HFD引起的认知障碍损伤,其机制可能与抑制炎症和氧化应激反应,以及促进SIRT1通路的表达有关。     

Orem自护模式对我国精神分裂症患者幸福感影响的Meta分析

目的：采用Meta分析的方法评估奥瑞姆（Orem）自护模式对我国精神分裂症患者幸福感的影响。方法检索中国生物医学文献数据库（CBM ）、维普中文科技期刊全文数据库（VIP）、中国期刊全文数据库（CNKI）和万方数据库（Wan Fang Data）从建库至2013年12月发表的以“幸福感”为关键词的文献。纳入以 Orem 自护模式干预精神分裂症患者的随机对照试验,由2人独立进行数据提取和文献质量评价（Jadad 评分）。采用 RevMan 5．2软件进行 Meta 分析。结果共纳入3篇文献,包括3项研究,其中一项研究的 Jadad 评分超过3分。 Meta 分析显示,Orem 自护模式干预组幸福感得分显著高于常规护理组[均数差（MD）＝16．29,95％ CI（14．54～18．05）,P＜0．05]。结论 Orem 自护模式有利于提高精神分裂症患者的幸福感。另外,国内现有研究数量较少、质量不高,需要进一步开展高质量大样本研究来揭示 Orem 自护模式对我国精神分裂症患者幸福感的影响。