青蒿琥酯对大鼠肝星状细胞Wnt/β-catenin信号通路相关因子表达的影响

目的:探讨青蒿琥酯抑制大鼠肝星状细胞增殖并可促进细胞凋亡的作用机制。方法:大鼠肝星状细胞体外培养,分别用含梯度质量浓度(0,1,5,12.5,25,37.5μg·ml-1)青蒿琥酯的培养基培养24 h。采用Western blot方法检测青蒿琥酯对大鼠肝星状细胞HSC-T6内Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的影响;采用实时荧光定量PCR方法检测随着药物浓度的变化在RNA水平上的变化。结果:0~37.5μg·ml-1的青蒿琥酯作用大鼠肝星状细胞24 h后蛋白β-catenin和GSK-3β(ser9)逐渐降低(P<0.05)并且有一定的剂量相关性,而GSK-3β逐渐升高(P<0.05)。实时定量PCR结果提示,1~37.5μg·ml-1的青蒿琥酯能抑制β-catenin的表达,且呈剂量相关性。但是GSK-3β在低剂量青蒿琥酯(1~12.5μg·ml-1)的时候并无明显变化(P>0.05),在高剂量青蒿琥酯(12.5~37.5μg·ml-1)抑制GSK-3β的表达(P<0.05)。结论:青蒿琥酯抑制大鼠肝星状细胞与Wnt/β-catenin信号通路相关。     

家兔体内泊那替尼固体脂质纳米粒药代动力学研究

目的探讨泊那替尼固体脂质纳米粒(P-SLN)在体内的药代动力学行为。方法将12只新西兰兔随机分为制剂组和对照组,分别给予等剂量P-SLN和泊那替尼对照品溶液,采用高效液相色谱(HPLC)法检测泊那替尼体内血药浓度,并采用DAS 2. 0药代动力学软件对所得血药浓度数据进行拟合,得出对照组和给药组的药代动力学参数。结果 HPLC法适合于检测泊那替尼血药浓度,给药组药时曲线下面积(AUC)及AUMC分别是对照组的3. 39倍和14. 87倍,清除率为0. 29倍,体内平均滞留时间为4. 55倍,半衰期为4. 44倍。结论 P-SLN在体内缓释效果明显,可显著提高泊那替尼的生物利用度,可作为药物的新剂型。     

泊那替尼原料药两种含量测定方法比较

目的分别建立测定泊那替尼原料药含量的高效液相色谱（HPLC）法与紫外分光光度（UV）法,并进行比较。方法HPLC法中,采用Agilent Zorbax Extend C18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）,乙腈-0．2％三乙胺缓冲液（85：15）为流动相,流速为1．0mL／min,检测波长为280nm,柱温为30℃,进样量为20μL。UV法中,供试品溶于无水乙醇中,于280nm波长处检测。结果HPLC法中,泊那替尼进样检测质量浓度线性范围为1～40μg／mL（r：0．9999）,加样回收率为100．00％,RSD=0．29％（n=9）;UV法测得泊那替尼检测质量浓度线性范围是0．5—20μg／mL（r=0．9999）,加样回收率为99．29％,RSD=0．89％（n=9）。UV法的含量相对误差是HPLC法的1．432～6．102倍。结论HPLC法比UV法测定结果更精确,更适用于泊那替尼原料药的含量分析。     

高良姜素丙烯酸树脂纳米粒的制备及工艺优化

摘要：目的:为改善高良姜素溶解性和提高其生物利用度,研制高良姜素丙烯酸树脂纳米粒（GA-NPs）并进行工艺优化。方法:采用纳米制备法制备GA-NPs,结合超声乳化对制备方法进行优化,以纳米粒粒径、多聚分散指数及Zeta电位为主要指标,通过单因素、正交试验优化制备工艺及处方,并进行验证。结果:优化后的处方工艺为药载比1∶150,有机相和水相比例1∶2,吐温80用量1.0%,超声时间10 min。制备的GA-NPs粒径为（70.98±1.44）nm, PDI为0.181±0.003,Zeta电位为（63.20±1.60）mV,包封率为（97.90±0.58）%。结论:优化的处方工艺制备的高良姜素纳米粒粒径大小适中,分布均匀,包封率较高,适用于GA-NPs制备。     

维生素B1缓释片的制备工艺研究

摘 要 目的：筛选维生素B1（VB1）缓释片的最佳处方及制备工艺。方法: 采用单因素试验对填充剂的种类、骨架材料羟丙基甲基纤维素（HPMC）的型号及用量、阻滞剂的种类及用量、片重及片芯硬度进行考察,并采用正交试验对骨架材料HPMC的用量、阻滞剂乙基纤维素（EC）的用量及片芯硬度进行考察。结果: 确定最佳处方工艺为： HPMC K15M用量占片重50%,EC用量占片重20%,填充剂为乳糖,片重为200 mg,压制片芯硬度为50 N。结论:所制备的VB1缓释片缓释效果显著,为其新剂型的开发提供了理论参考和试验基础。     

淫羊藿成分脱水淫羊藿素研究进展

脱水淫羊藿素（anhydroicaritin,AHI）是一种从小檗科多年生植物淫羊藿中提取分离的天然异戊烯基取代的黄酮类化合物,是淫羊藿苷类的一种。AHI具有较强的药理活性,如抗肿瘤、骨保护、抗病毒、抗炎、调血脂等,可以通过淫羊藿苷降解法（蜗牛酶解法、酸解-酶解法、酶解-酸解法及混酸法）及化学合成法制备得到。对近年来AHI的制备方法及药理活性研究进行回顾与整理,为AHI的进一步研究提供参考。     

脱水淫羊藿素对肝癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的:研究异戊烯基类黄酮化合物脱水淫羊藿素（AHI）对人肝癌细胞株MHCC-97H的增殖、迁移和凋亡的影响。方法:体外培养人肝癌细胞株MHCC-97H及人正常肝细胞株L02，分别用0、20、40、80、120、160、200 μg/ml浓度的AHI处理MHCC-97H细胞，用0、25、50、100、150、200、400、500 μg/ml浓度的AHI处理L02细胞。采用CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖情况;划痕实验检测细胞迁移情况;Hoechst33342实验和流式细胞术检测细胞凋亡情况;蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白表达情况。结果:经0、20、40、80、120、160、200 μg/ml AHI处理24 h后，MHCC-97H细胞的存活率分别为（100.00±0.00）%、（97.41±2.10）%、（96.58±3.23）%、（87.72±4.85）%、（78.33±3.76）%、（56.97±2.61）%、（15.25±2.51）%，差异有统计学意义（ F=429.20， P<0.001）;80、120、160、200 μg/ml AHI与0 μg/ml AHI相比，差异均有统计学意义（均 P<0.001）。经0、25、50、100、150、200、400、500 μg/ml AHI处理24 h后，L02细胞存活率分别为（100.00±0.00）%、（96.82±3.79）%、（95.36±3.43）%、（90.79±5.75）%、（77.67±5.66）%、（63.98±5.22）%、（34.22±4.01）%、（33.84±4.41）%，差异有统计学意义（ F=233.20， P<0.001）;100、150、200、400、500 μg/ml AHI与0 μg/ml AHI相比，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。AHI处理L02细胞24 h半抑制浓度（IC 50）为（300.20±17.10） μg/ml，明显大于MHCC-97H细胞IC 50（158.60±5.50） μg/ml，差异有统计学意义（ t=13.65， P<0.001）。经0、120、160、200 μg/ml AHI处理24 h后，MHCC-97H细胞克隆数分别为1 993.00±46.29、1 355.00±54.84、998.33±21.03、218.33±35.95，差异有统计学意义（ F=954.80， P<0.001）;120、160、200 μg/ml AHI与0 μg/ml AHI相比，差异均有统计学意义（均 P<0.001）。经0、120、160、200 μg/ml AHI处理24 h后，MHCC-97H细胞愈合率分别为（51.68±1.93）%、（16.04±0.73）%、（8.88±0.31）%、（-6.94±0.46）%，差异有统计学意义（ F=1 616.00， P<0.001）;120、160、200 μg/ml AHI与0 μg/ml AHI相比，差异均有统计学意义（均 P<0.001）。Hoechst33342实验显示，经0 μg/ml AHI处理的MHCC-97H细胞于倒置显微镜下显示出均匀的暗蓝色，并呈现出完整的细胞核状态;相较于0 μg/ml，120、160、200 μg/ml AHI处理的细胞出现皱缩、破碎的现象，细胞核形态异常，部分细胞核被染为亮蓝色，且该情况随着浓度的增加愈为明显。经0、120、160、200 μg/ml AHI处理24 h后，MHCC-97H细胞凋亡率分别为（10.51±0.56）%、（42.23±0.87）%、（61.92±0.52）%、（72.05±0.74）%，差异有统计学意义（ F=4 677.00， P<0.001）;120、160、200 μg/ml AHI与0 μg/ml AHI相比，差异均有统计学意义（均 P<0.001）。经0、120、160、200 μg/ml AHI处理的MHCC-97H细胞Bax、Cleaved Caspase-3/Caspase-3、Cleaved Caspase-9/Caspase-9、Bcl-2蛋白相对表达量差异均有统计学意义（ F=30.43， P<0.001;F=212.80， P<0.001;F=475.30， P<0.001;F=10.75， P=0.004）;160、200 μg/ml AHI Bax蛋白表达与0 μg/ml AHI相比，均显著升高（均 P<0.001）;120、160、200 μg/ml AHI Cleaved Caspase-3/Caspase-3、Cleaved Caspase-9/Caspase-9蛋白表达与0 μg/ml AHI相比，均显著升高（均 P<0.001）;120、160、200 μg/ml AHI Bcl-2蛋白表达与0 μg/ml AHI相比，均显著降低（均 P<0.05）。 结论:AHI可抑制人肝癌细胞株MHCC-97H的增殖、迁移，并促进其凋亡。