佛波酯对人胃癌细胞Ha-ras基因启动子及启动子结合蛋白的影响

目的探讨佛波酯（PMA）对人胃癌细胞BGC-823 Ha—ras基因启动子活性及启动子结合蛋白活性的影响。方法通过RT-PCR和运用自行构建的真核表达载体prasEYFP转染细胞进行荧光细胞检测，并应用凝胶电泳移动检测、Southwestern blotting等方法检测PMA（100μg／L）处理BGC-823细胞72和96h后，对Ha—ras基因表达水平、Ha—ras基因启动子活性以及对Ha—ras启动子结合蛋白的影响。结果经PMA（100μg／L）处理72和96h，与未处理细胞相比，BGC-823细胞中Ha—ras基因表达显著降低，Ha—ras基因启动子活性分别被抑制65．2％和71．8％；同时两个Ha-ras启动子结合蛋白活性也显著降低，经检测，其分子量分别约为18kD，35kD。结论PMA长期处理通过降低人胃癌细胞中Ha—ras启动子结合蛋白活性使Ha—ras启动子活性被抑制，从而在转录水平上调节Ha—ras基因表达。     

钙调素对微管组装的调节作用

利用我们建成的钙调素表达可调细胞模型－ＲＣ３细胞，对ＣａＭ高表达时微管组装行为进行了研究，当用生理剂量的地塞米松处理ＲＣ３细胞，细胞内ＣａＭ水平提高，而管蛋白浓度没有变化，造成钙调素／管蛋白比值上升，ＭＴ解聚，但同时加入ＣａＭ拮抗剂三氟拉嗪处理时，则可抑制ＭＴ的解聚，Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２转化细胞ＣａＭ含量的增加是引起ＭＴ解聚的主要因素，ＴＦＰ处理可恢复ＭＴ组装。ＲＣ３细胞ＣａＭ高表达导致ＭＴ解聚的实     

平阳霉素(博菜霉素A5)对同步化的CHO细胞的敏感周期时相的研究

平阳霉素(博莱霉素A₅)作用于同步化的各个周期时相的CHO细胞。结果用集落形成率来表示。研究表明平阳霉素对M期细胞最为敏感,其敏感顺序为M>G₂>S>G₁。实验使用的细胞同步化方法是用有丝分裂选择法收集M期细胞;用2 mMTdR双阻断法获得S期同步化细胞,再由M期和S期细胞分别向后推移1.5～2小时和7小时以获得G₁期和G₂期的同步细胞,并附以有丝分裂指数(MI)和标记指数(LI)检测各周期时相细胞的同步化程度。     

复方中药白龙对G1期人胃癌细胞中抑癌基因的影响及与PKA信号通路的相关性

目的：探讨复方中药白龙对人胃癌ＢＧＣ８２－３Ｇ１期细胞周期蛋白激酶抑制因子（ＣＫＩ）ｐ１６＾ＩＮＫ４ａ，ｐ２１以及Ｒｂ，ｃ－ｍｙｃ等基因转录的影响和ｃＡＭＰ－ＰＫＡ信号通路的调节关系。方法：通过实验室常规分子生物学手段（细胞同步化，分子杂交－Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交，Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交等）检测相关基因的表达变化。     

小鼠Friend红白血病(FL)在诱导分化与TPA抑制分化过程中c-myc、p53、c-fos的表达

观察了DMSO(二甲基亚砜)、DMF(二甲基酰胺)、HMBA(hexomcthy-lene bisacetamide)对小鼠Friend红白血病诱导分化及TPA阻断分化效应和在此过程中一些癌基因的表达反应。区分了细胞分化过程中关于停止细胞增殖与分化因子表达这两种因素的分别作用。以特异性联苯胺反应为指标,在1.5％DMSO、1％DMF和smM HMBA的作用下,诱导分化     

蛋白激酶Cζ在银屑病发病中的意义

目的 探讨蛋白激酶Cζ在银屑病发病中的作用.方法 通过原位杂交和免疫组化的方法,研究了12例寻常型银屑病患者皮损区、非皮损区和5例正常人表皮中蛋白激酶Cζ的mRNA和蛋白的表达及分布特点.结果 银屑病皮损区表皮中PKCζ的mRNA和蛋白表达均较非皮损区和正常表皮中的表达明显增强,正常人表皮中PKCζ的mRNA表达分布于表皮上层,而银屑病皮损区PKCζ的mRNA表达几乎分布于表皮全层.结论 PKCζ在银屑病表皮中的过表达提示,PKCζ可能与银屑病表皮细胞的过度增殖相关.     

过表达蛋白激酶CβⅠ亚类导致人胚肺成纤维细胞表型转化的研究

灰探讨ＰＫＣ亚类在细胞增殖与转化中的可能作用，用稳定的过达蛋白激酶Ｃ（Ｐｒｏｔｅｉｎｋｉ－ｎａｓｅＣ，ＰＫＣ）βⅠ亚类的人胚肺成纤维细胞２ＢＳ（ＢＳ－ＰＫＣ３）为模型，研究了ＰＫＣβⅠ亚类对２ＢＳ细胞生长与化的影响，结果，过表达βⅠ的２ＢＳ细胞形态发生变化，单层培养时出现堆积生长，表明丧失接触抑制。进一步观察到实验组细胞中血清生长依赖性下降，贴壁依赖性降低，在软琼脂中可形成集落，同时细胞中微丝发生     

复方中药白龙对人胃癌BGC82-3细胞恶性增殖表型的影响

目的：观察复方中药白龙（简称白龙）对人胃癌ＢＧＣ８２－３细胞恶性增殖表型的逆转作用方法：通过测定生长曲线、软玉脂集落及裸鼠致瘤实验，观察人胃癌ＢＧＣ８２－３细胞增殖的变化。结果：（１）生长曲线表明白龙明显３了ＢＧＣ８２－３细胞的增殖到第５天抑制率达８６％。（２）经白龙处理的ＢＧＣ８２－３细胞在软玉脂中形成的集落小且少，与对照组比交集落形成率仅为５２％。（３）白龙明显抑制接种ＢＧＣ８２－３细胞的裸鼠     

CKIp15INK4B相关新基因p15rs对HeLa细胞增殖影响的初探

目的　探讨新克隆的CKIp15 INK4B 相关基因p15rs对细胞增殖的作用。　方法　克隆p15rs编码区cDNA ,通过基因转染技术将其导入HeLa细胞 ,检测细胞的生长曲线 ,细胞周期和集落形成能力。　结果　构建了p15rs高表达的细胞模型HPS2 1,发现p15rs高表达可使HeLa细胞增殖被显著抑制 ,细胞生长速率下降 ,倍增时间延长 ,G1 期细胞增加 ,S期细胞减少 ,集落形成能力下降。　结论　新基因p15rs具有抑制癌细胞增殖和对细胞周期进程进行负调节的作用。