蛋白激酶Cζ在银屑病发病中的意义

目的 探讨蛋白激酶Ｃζ在银屑病发病的作用。方法 通过原位杂交和免疫组化的方法，研究了１２例寻常银屑病患者皮损区，非皮损区和５例正常人表皮中蛋白激酶Ｃζ的ｍＲＮＡ和蛋白的表达及分布特点。结果 银屑病皮损区表皮中的ＰＫＣζ的ｍＲＮＡ和蛋白表达均较非皮损区和正常表皮中的表达明显增强，正常人表皮ＰＫＣζ的ｍＲＮＡ表达分布于表皮上层，而银屑病皮损区ＰＫＣζ的ｍＲＮＡ表达几乎分布于表皮全层，结论 ＰＫＣζ在角     

佛波酯对人胃癌细胞Ha-ras基因启动子及启动子结合蛋白的影响

目的探讨佛波酯（PMA）对人胃癌细胞BGC-823 Ha—ras基因启动子活性及启动子结合蛋白活性的影响。方法通过RT-PCR和运用自行构建的真核表达载体prasEYFP转染细胞进行荧光细胞检测，并应用凝胶电泳移动检测、Southwestern blotting等方法检测PMA（100μg／L）处理BGC-823细胞72和96h后，对Ha—ras基因表达水平、Ha—ras基因启动子活性以及对Ha—ras启动子结合蛋白的影响。结果经PMA（100μg／L）处理72和96h，与未处理细胞相比，BGC-823细胞中Ha—ras基因表达显著降低，Ha—ras基因启动子活性分别被抑制65．2％和71．8％；同时两个Ha-ras启动子结合蛋白活性也显著降低，经检测，其分子量分别约为18kD，35kD。结论PMA长期处理通过降低人胃癌细胞中Ha—ras启动子结合蛋白活性使Ha—ras启动子活性被抑制，从而在转录水平上调节Ha—ras基因表达。     

钙调素对微管组装的调节作用

利用我们建成的钙调素表达可调细胞模型－ＲＣ３细胞，对ＣａＭ高表达时微管组装行为进行了研究，当用生理剂量的地塞米松处理ＲＣ３细胞，细胞内ＣａＭ水平提高，而管蛋白浓度没有变化，造成钙调素／管蛋白比值上升，ＭＴ解聚，但同时加入ＣａＭ拮抗剂三氟拉嗪处理时，则可抑制ＭＴ的解聚，Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２转化细胞ＣａＭ含量的增加是引起ＭＴ解聚的主要因素，ＴＦＰ处理可恢复ＭＴ组装。ＲＣ３细胞ＣａＭ高表达导致ＭＴ解聚的实     

小鼠Friend红白血病(FL)在诱导分化与TPA抑制分化过程中c-myc、p53、c-fos的表达

观察了DMSO(二甲基亚砜)、DMF(二甲基酰胺)、HMBA(hexomcthy-lene bisacetamide)对小鼠Friend红白血病诱导分化及TPA阻断分化效应和在此过程中一些癌基因的表达反应。区分了细胞分化过程中关于停止细胞增殖与分化因子表达这两种因素的分别作用。以特异性联苯胺反应为指标,在1.5％DMSO、1％DMF和smM HMBA的作用下,诱导分化     

平阳霉素(博菜霉素A5)对同步化的CHO细胞的敏感周期时相的研究

平阳霉素(博莱霉素A₅)作用于同步化的各个周期时相的CHO细胞。结果用集落形成率来表示。研究表明平阳霉素对M期细胞最为敏感,其敏感顺序为M>G₂>S>G₁。实验使用的细胞同步化方法是用有丝分裂选择法收集M期细胞;用2 mMTdR双阻断法获得S期同步化细胞,再由M期和S期细胞分别向后推移1.5～2小时和7小时以获得G₁期和G₂期的同步细胞,并附以有丝分裂指数(MI)和标记指数(LI)检测各周期时相细胞的同步化程度。     

复方中药白龙对G1期人胃癌细胞中抑癌基因的影响及与PKA信号通路的相关性

目的：探讨复方中药白龙对人胃癌ＢＧＣ８２－３Ｇ１期细胞周期蛋白激酶抑制因子（ＣＫＩ）ｐ１６＾ＩＮＫ４ａ，ｐ２１以及Ｒｂ，ｃ－ｍｙｃ等基因转录的影响和ｃＡＭＰ－ＰＫＡ信号通路的调节关系。方法：通过实验室常规分子生物学手段（细胞同步化，分子杂交－Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交，Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交等）检测相关基因的表达变化。     

反义PKCζ对角质形成细胞增殖的调节

目的:探讨角质形成细胞中,反义蛋白激酶Cζ与磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和细胞外信号调节激酶ERK1/2信号转导网络以及与核因子NF-κB的相互作用关系。方法:通过细胞原位杂交、间接免疫荧光和激酶活性测定方法,研究反义PKCζ抑制角质形成细胞增殖的信号转导机制。结果:表达反义PKCζ的角质形成细胞中,PI3K的基因表达显著下调,ERK1/2和NF-κB的核内表达水平以及ERK1/2的激酶活性明显降低。结论:表达反义PKCζ可通过下调PI3K和ERK1/2信号通路抑制角质形成细胞的增殖。     

CKIp15INK4B相关新基因p15rs对HeLa细胞增殖影响的初探

目的　探讨新克隆的CKIp15 INK4B 相关基因p15rs对细胞增殖的作用。　方法　克隆p15rs编码区cDNA ,通过基因转染技术将其导入HeLa细胞 ,检测细胞的生长曲线 ,细胞周期和集落形成能力。　结果　构建了p15rs高表达的细胞模型HPS2 1,发现p15rs高表达可使HeLa细胞增殖被显著抑制 ,细胞生长速率下降 ,倍增时间延长 ,G1 期细胞增加 ,S期细胞减少 ,集落形成能力下降。　结论　新基因p15rs具有抑制癌细胞增殖和对细胞周期进程进行负调节的作用。     

蛋白激酶Cα对人正常肝和肝癌细胞周期及G1期相关调控因子cyclinD1、cyclinE的影响

目的 探讨蛋白激酶Cα(PKCα)对人正常肝和肝癌细胞周期的作用和对G1期相关调控因子的影响。方法通过细胞转染技术将PKCα cDNA正向插入的真核表达质粒PXJ41-PKCα导入正常肝细胞(L-02)，并利用本室已构建的表达反义PKCα的BEL-7402细胞(HT6)检测细胞的生长曲线，细胞周期以及细胞对G1期相关调控因子cylinD1和cyclin E的影响。结果 构建了稳定过表达PKCα的人正常肝细胞模型(LT3)，过表达PKCα可促进L-02细胞增殖，促进细胞由G1期向s期的过渡；cyclinD1和cyclinE的蛋白水平上升，反之表达反义PKCα的BEL-7402细胞(HT6)增殖被抑制，阻抑细胞由G1期向S期的过渡，cyclinD1和cyclinE的蛋白水平下降。结论 从正反两个方面表明，PKCα可通过作用于G1期相关周期蛋白的水平影响G1／S期的进程。