甲状腺素对仔鼠脑NAPOR基因表达的影响

目的研究甲状腺素对仔鼠脑成纤维母细胞瘤凋亡相关的RNA结合蛋白(neuroblastoma apoptosis-related RNA-binding protein,NAPOR)基因表达的影响。方法以丙基硫氧嘧啶灌胃复制孕鼠甲状腺功能低下模型,采用逆转录-聚合酶链反应检测仔鼠出生后第1、5、10天仔鼠皮层NAPOR的表达,年龄匹配的正常仔鼠为对照组。结果NAPOR在甲状腺功能低下孕鼠所产仔鼠表达均高于正常对照组;在出生后一段时期内,随着鼠龄增长表达降低。结论转录后水平的调节机制可能参与甲状腺素对脑基因表达的影响。     

新生大鼠小脑内发育相关基因的筛选

为筛选脑发育相关的基因,应用新发展的抑制消减杂交技术,以新生大鼠小脑mRNA逆转录cDNA作为测试者(tester),成年大鼠小脑mRNA逆转录cDNA作为驱动者(driver),进行消减杂交,克隆制备成新生大鼠小脑高表达的cDNA文库.挑选出50个重组质粒,测序得到37个不同基因片段序列.再次用反Northern杂交确认有意义的差异表达基因.同时将测序结果与GenBank注册序列进行同源性比较,20个大鼠中首次测得的基因表达序列标签(EST)已被GenBank收录(BG695726-BG695745).     

鸟类发育缺陷增强因子基因的克隆及同源性比较

目的　克隆家鸽、鹌鹑与人类发育缺陷增强因子 (enhancerofrudimentary ,e(r) )基因。方法　依据来源于家鸽的e(r)基因同源EST片段设计引物。提取家鸽与鹌鹑脑组织RNA ,逆转录为cDNA。通过RACE方法克隆家鸽e(r)基因全长序列。依据家鸽序列设计引物 ,通过PCR方法扩增鹌鹑e(r)同源基因的编码区。依据人类e(r)基因序列设计引物 ,利用人类脑组织RNA扩增人类e(r)基因编码区。测定 3种基因的DNA序列 ,并进行同源性比较。结果　自家鸽克隆得到 776bp的e(r)基因全长cDNA序列、自鹌鹑与人类克隆得到 312bp的e(r)基因编码区序列。经同源性比较证实 ,三者序列高度同源 ,其氨基酸序列同源性分别为 99% ,99%和 10 0 %。结论　根据e(r)基因的引物已成功克隆出家鸽、鹌鹑和人类的e(r)基因 ,且同源性很高。     

甲状腺激素调节仔鼠脑基因差异表达的研究

目的　研究甲状腺激素调节仔鼠脑基因的分子机制。方法　丙基硫氧嘧啶灌胃制备孕鼠甲状腺功能减退模型 ,部分胎鼠出生后予以 T4 替代治疗 ,采用消减抑制杂交技术构建甲状腺激素调节仔鼠脑基因的差异表达文库 ,对部分重组克隆进行序列分析。结果　随机测序 10个表达序列标签 ,同源性分析表明 5个表达序列标签未发现明确的同源物 ,其它表达序列标签与 CDC10 ,酸性核糖体蛋白 P0 ,actin等有较高同源性。结论　甲状腺激素调节仔鼠脑基因的差异表达谱的获得对阐明甲状腺激素对脑发育的分子机理有十分重要的意义     

慢性萎缩性胃炎的中医病机研究

慢性萎缩性胃炎 (ＣｈｒｏｎｉｃＡｔｒｏｐｈｙＧａｓｔｒｉｔｉｓ ,ＣＡＧ)属于中医胃痞范畴。西医学认为 ,ＣＡＧ的发生主要是 :急性胃炎、慢性浅表性胃炎的演变、幽门螺杆菌感染、遗传因素、免疫因素及饮食因素(如饮酒、暴饮暴食 )、吸烟、药物刺激等。中医对ＣＡＧ病机的认识文献屡有报道。我们总结各医家理论 ,结合 2 0年临床研究及大量病例分析 ,认为ＣＡＧ病机虽然繁杂多变 ,但总不离气 (气机郁滞 )、湿 (湿浊中阻 )、热 (热毒蕴结 )、瘀 (瘀血停滞 )、虚 (阴液亏虚 ) 5种。病变脏腑在胃腑 ,肝、脾在病机中起重要作用 ,胆与胃也与之…     

心律平妥卡律合用治疗难治性室性早搏36例

<正> 笔者自1996年以来合用心律平与妥卡律治疗难治性室性早搏36例,疗效显著,且不良反应轻微,现报告如下。 1 临床资料 1.1 一般资料:本组36例,其中男22例,女14例;年龄19～72岁,平均46岁。病程最短1个月,最长10年。均为频发室早(平均每分钟大于10次),11例伴有短阵室速。其原发病为冠心病10例,心肌病8例,心肌炎8例,风心病6例,病因不明4例。所有病例均无明显心衰、Ⅱ度以上房室传导阻滞及严重肝、肾功能不全。所有患者在接受本治疗前均曾先后使用过1～4种抗心律失常药,其中22例单独用过妥卡律,10例用过心律平治疗,疗效均不明显。     

SSH法获取大鼠小脑特异表达cDNA片段

目的获取大鼠小脑特异表达的cDNA序列,比较SSH方法的特点。方法以大鼠大脑和脑干mRNA逆转录cDNA作为driver(驱动)cDNA,大鼠小脑mRNA逆转录cDNA作为Tester(测试)cDNA,经抑制性消减杂交法,去除与大脑及脑干相同的cDNA,从而获得大鼠小脑特异表达基因.然后克隆制备成大鼠小脑特异表达cDNA文库.结果经消减杂交、克隆,挑选出32个阳性质粒.最后用反Northern杂交去除假阳性,筛选出8个有意义的差异表达cDNA基因片段.同时,将测序结果进行同源性比较,发现其中6个cDNA是新EST序列.结论用SSH方法筛选差异表达序列非常有效,特异表达序列分析有助于从分子水平探讨小脑功能.     

甲状腺素对胎鼠脑bcl—2和bax基因表达的影响

目的　研究甲状腺素对胎鼠脑bcl 2和bax基因表达的影响。方法　采用丙基硫氧嘧啶灌胃制备甲减孕鼠模型 ,出生后小鼠即为先天性甲减鼠 ,另一组出生后即日起用腹腔注射T4,剂量为 2 μg/ 10 0g·d-1(替代组 ) ,采用逆转录 -聚合酶链反应检测胎鼠出生后 1、5、10d胎鼠bcl 2和bax基因的表达。结果　bax基因在甲减胎鼠脑第 1天表达最高 ,随着鼠龄增长 ,表达降低 ;正常第 1天胎鼠及替代组胎鼠脑未检测到bax表达 ;bcl 2基因在第 1天甲减胎鼠表达高于正常对照组 ;第 5天、第 10天降低 ;bcl 2在替代组鼠脑中表达较甲减组高。结论　甲状腺激素对bcl 2和bax基因表达的不同影响 ,在脑细胞凋亡中有重要的作用。     

甲状腺素对幼鼠脑TNF-α和TNFR1基因表达的影响

目的研究甲状腺素(T4)对幼鼠脑TNF-α和TNFR1基因表达的影响.方法采用丙基硫氧嘧啶灌胃制备甲状腺功能低下(甲低)孕鼠模型,出生后小鼠为先天性甲低鼠,另一组出生后即日起用腹腔注射T4,剂量为20 μg/(kg*d)(替代组),采用逆转录-聚合酶链反应检测出生后1,5,10 d幼鼠TNF-α和TNFR1基因的表达.结果在出生后第1 d甲低幼鼠脑TNF-α和TNFR1基因表达最高,随着鼠龄增长,表达降低;正常出生后第1 d幼鼠及替代组TNF-α和TNFR1基因表达较甲低组低.结论甲状腺素对TNF-α和TNFR1基因表达的影响在脑细胞凋亡中有重要的作用.     

MTT法检测丙烯酰胺对神经细胞的毒性作用

目的介绍一种用四氮唑蓝（ＭＴＴ）为底物的酶反应定量比色分析法。方法用ＭＴＴ法测定了丙烯酰胺对体外培养的大鼠胚胎中脑神经细胞的毒性。结果在１×１０４～４×１０５／ｍｌ细胞浓度范围内，吸光值与细胞数呈良好的线性关系；丙烯酰胺对神经细胞有明显的细胞毒性作用，其半数生长抑制浓度（ＩＣ５０）为８６μｇ／ｍｌ。结论ＭＴＴ法用于测定细胞毒性作用具有快速、正确等优点。