不同频率的周期性压力对兔软骨细胞影响的生物学研究

目的：通过观察不同频率的周期性压力对兔软骨细胞增殖及整合素α1β1分泌量的影响,研究不同频率的力学刺激对软骨细胞产生的生物学影响。方法：取兔四肢关节的软骨细胞,在体外进行培养。表型稳定的第3代细胞进行研究,设置常压培养A组和周期性压力B组,并将B组在压力为172kPa按照加压频率分组,加压频率B1组为0．2Hz,B两组0．5Hz ,B3组1Hz,B4组2Hz,B5组5Hz。 B组每天干预2h,连续干预3d。检测A和B组软骨细胞增殖情况和整合素α1β1的含量。结果：OD值A组为1．08±0．13,B1组为1．19±0．11,B两组为1．23±0．08,B3组为1．35±0．06,B4组为1．45±0．09,B5组为1．37±0．12。加压各组与对照组比较OD值升高,差异有统计学意义。 B组各组间差异有统计学意义,峰值出现在B4组。 A组整合素α1β1水平为3．02±0．26pg/mL,B1组为3．28±0．19pg/mL, B两组为3．43±0．11pg/mL,B3组为3．77±0．24pg/mL,B4组为4．01±00．9 pg/mL,B5组为3．94±0．13pg/mL。加压各组与对照组比较整合素α1β1含量均有升高,差异有统计学意义差异（ P＜0．05）。 B组各组间整合素差异有统计学意义,峰值出现在B4组。结论：相同大小（172kPa）不同频率的周期性压力刺激兔软骨细胞,均能促进软骨细胞增殖和增加整合素含量的作用,但并非频率越高作用越强。本实验中以2Hz频率的周期性压力作用最强。     

Th17细胞与RA骨破坏

类风湿性关节炎（Rheumatoid Arthritis,RA）是以自身免疫过度活化、关节滑膜炎症和骨破坏为特征的自身免疫性疾病。CD^4＋T细胞接受抗原激活后在不同细胞因子及微环境作用下分化为Th1、Th2、Treg、Tfh、Th9和Th17细胞几个亚群,Th17作为一个新亚群被证实对自身免疫和感染等疾病的发生有重要影响,是介导炎症反应的一类重要细胞。Th17细胞的异常活化引起Th17／Treg细胞间失衡,在RA等自身免疫性疾病中发挥关键作用,尤其在局部炎症反应和骨破坏方面。长期的局部炎症诱发和恶化RA关节软骨的破坏。     

模拟按压手法对兔膝骨关节炎治疗作用的实验研究

目的探讨推拿手法对兔膝骨关节炎的治疗作用及机制。方法将36只健康新西兰大白兔随机分为6组,每组6只,即正常组、模型组和治疗组(根据治疗手法不同再分成4组);除正常组外,其余30只实验兔采用髌韧带缺损术建立膝骨关节炎模型,8周后对治疗组实验免进行治疗,隔天治疗1次,连续治疗6周;对照组不做任何治疗。6周后,检测各组实验兔血清中TNF-α、MMP-13水平,膝关节软骨标本经HE、番红O及甲苯胺蓝染色后光镜下观察病理组织学改变,并用免疫组化检测软骨细胞整合素α1β1的表达。结果①组织形态学:治疗组与模型组比较,软骨细胞簇集和基质失染现象有减轻趋势,但未达到正常组水平;②各治疗组与模型组比较,Mankin评分及血清TNF-α、MMP-13水平差异有统计学意义(P<0.05),治疗组组间差异无统计学意义(P>0.05);③治疗组与模型组整合素α1β1表达无明显差异,但均较正常组表达高。结论软骨组织形态学及血清学检测显示,按压手法通过改变关节内应力环境,调节TNF-α、MMP-13和整合素α1β1的表达来抑制软骨细胞的凋亡,刺激软骨的组织与再生,促进软骨细胞外基质的代谢,从而起到抑制关节软骨退变的作用。     

淫羊藿苷对IL-1β刺激RA滑膜成纤维细胞增殖及TNF-α和RANKL分泌的影响

目的观察淫羊藿苷(Icariin,ICA)对IL-1β刺激类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞(rheumatoid arthritis synovial fibroblasts,RASFs)增殖及培养上清TNF-α和RANKL含量的影响。方法体外分离培养RA患者来源滑膜成纤维细胞,取第二代细胞分别接种于96孔板和6孔板,除正常对照组(N组)外其余各组均以终浓度为5μg/L的IL-1β刺激24 h后加入不同药物干预,分别设置空白对照组(C组)、MTX组(50 mg/L)、淫羊藿高剂量组(IH组,50μmol/L)和淫羊藿低剂量组(IL组,5μmol/L);继续培养72 h后,以WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测各组细胞增殖情况,以ELISA法检测各组培养上清中TNF-α和RANKL含量。结果 C组以IL-1β连续刺激RASFs 96 h后,细胞增殖率为17.9%,培养上清中TNF-α、RANKL含量分别为(361.542±7.178)ng/L和(428.468±11.118)ng/L,与N组[TNF-α、RANKL含量分别为(346.458±3.329)ng/L和(400.630±7.007)ng/L]比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。以不同药物干预后,与C组比较,MTX组细胞增殖率为-34.70%(P<0.05);IH组培养上清中RANKL含量降低,为(375.766±7.806)ng/L(P<0.05);IL组细胞增殖率为-31.90%,培养上清中TNF-α、RANKL含量分别为(334.542±6.691)ng/L和(365.495±5.280)ng/L,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-1β能促进RA滑膜成纤维细胞增殖和分泌细胞因子TNF-α、RANKL;淫羊藿苷能抑制IL-1β刺激RA滑膜成纤维细胞的增殖及TNF-α、RANKL的分泌。     

理筋手法结合功能训练治疗膝骨关节炎的步态特征研究

目的:对膝骨关节炎患者下肢步行能力进行步态分析评定,探讨理筋手法及功能训练的康复效果.方法:应用三维红外步态分析设备,分析了81例(男36例,女45例)膝骨关节炎患者在理筋手法和功能训练干预前后平衡能力和步行效率的变化情况.结果:理筋手法+功能训练组患者的步长、步速、双支撑相等指标疗后明显改善,与单纯理筋手法组的差异有...     

社区卫生服务--城郊卫生院的出路

随着生活水平的提高,卫生服务需求呈现多样化,城市居民急切盼望一种新的服务模式,以提供方便快捷、直接进入社区家庭的基本医疗服务.国务院<关于城镇医药卫生体制改革的指导意见>明确了卫生改革的方向和目标,其主要内容之一是发展社区卫生服务.城郊卫生院因所处地域的特殊性,其运作机制和运行结构上存在的深层次矛盾日益突出,绝大部分卫生院是内忧外患、举步维艰.笔者认为在当前形势下城郊卫生院摆脱困境的突破口就是大力发展社区卫生服务.     

基于关节力学失稳方法建立兔膝骨关节炎模型

目的探索基于关节力学失稳建立膝骨关节炎动物模型的方法。方法将24只新西兰大白兔随机分为正常组、模型4周组和模型8周组。模型组动物采用手术切断内侧副韧带并切除部分髌韧带的方法造模;正常组仅切开皮肤,显露上述结构而不予特殊处理。各组分别于造模后4周、8周时处死动物,取膝关节标本,病理切片后行HE染色,镜下观察软骨组织形态结构,并应用Mankin评分标准评价关节软骨退变情况;取血清样本,检测IL-1β、TNF-α、MMP-13水平。结果模型4周组和模型8周组的关节软骨标本分别呈现出不同程度的退变表现,两组的Mankin评分均明显高于正常组(P0.01);与正常组比较,模型4周组、模型8周组动物血清中IL-1β、TNF-α、MMP-13水平均升高,差异具有统计学意义(P0.01);与模型4周组比较,模型8周组Mankin评分和IL-1β、TNF-α水平明显升高(P0.01)。结论采用切断内侧副韧带并切除部分髌韧带的方法可获得较为理想的兔膝骨关节炎模型,且操作简单,动物感染率和死亡率低。     

膝骨关节炎患者尿液代谢谱与中医证候的相关性研究

目的：比较膝骨关节炎（OA）患者与正常对照者之间尿液代谢谱的差异,及膝OA不同证型间代谢表型的差异,为中医“证”的本质研究提供客观依据。方法：利用气相色谱-质谱（GC—MS）联用技术检测37例膝OA患者和37例正常对照者尿液代谢产物,识别OA潜在的生物标记物;比较分析OA两个证型组的尿液代谢谱变化。结果：OA组与正常对照组尿液中代谢物的总离子流图存在明显差异,两证型组尿样中多种内源性代谢物的含量和尿液代谢谱差异明显。结论：中医“证”的本质具有特定的生化物质基础;代谢组学分析可以为OA的临床诊断和中医“证”本质研究提供新的技术手段。     

髌韧带内侧缺损构建兔膝骨关节炎模型初探

目的探讨构建膝骨关节炎动物模型的方法。方法将16只健康纯种成年新西兰大白兔随机分为正常组、模型4周组、模型6周组和模型8周组,每组4只。各模型组实验兔于无菌条件下造成双后肢膝内侧髌韧带2/3缺损,术后允许其自由活动,手术7天后每天强迫活动1h。光镜下观察造模后各时间段股骨髁负重区软骨病理改变,ELISA试剂盒检测血清中MMP-13及TNF-α水平。结果模型6周组、模型8周组出现关节软骨细胞变化、基质分解破坏、滑膜增生等炎症及退行性改变,其Mankin评分及血清MMP-13、TNF-α水平与正常组差异均有统计学意义(P<0.05);模型6周组表现为膝骨关节炎早期改变,模型8周组表现为膝骨关节炎中期改变。结论髌韧带内侧缺损法构建兔膝骨关节炎模型,方法可行,能更好地再现因应力异常而导致的膝骨关节炎。