麻仁软胶囊在诱导大鼠结肠上皮细胞阴离子分泌中的作用

目的:探讨麻仁胶囊对大鼠结肠上皮电解质转运的影响和机制.方法:在药物和特异性通道阻断剂的作用下,用短路电流(ISC)技术,体外测量跨结肠上皮电解质转运的变化;并且用ELISA方法测定火麻仁对结肠上皮细胞内cAMP浓度的影响.结果:在结肠上皮的浆膜面加入麻仁胶囊(0.1～25mg/ml),能产生一个剂量依赖性的短路电流,EC50为2.88±0.39mg/ml;将Cl-或HCO3-从浴液中替换掉以后,分别将火麻仁诱导的短路电流抑制了78.3 %(n=4,P<0.05)和28.3%(n=4,P<0.05),当两种阴离子同时被替换后,该电流减少了97. 8%(n=4,P<0.01);在结肠上皮的黏膜面用Na 通道阻断剂amiloride(100μ M)预处理后,不影响随后由该药产生的短路电流;而该短路电流能被黏膜面Cl-通道非选择性阻断剂DPC(1mM)完全阻断,但对DIDS(100 M)(Ca2 激活的Cl-通道阻断剂)不敏感;在结肠上皮的浆膜面加入Na -K -2Cl-共转运体(NKCC)阻断剂bumetanide(100 M)能完全抑制该药产生的短路电流;浆膜面K 通道阻断剂quindine(100 M)能部分抑制该药在结肠上皮产生的短路电流(n=4,P<0.01).胞内腺苷酸环化酶(AC)的抑制剂MDL-12330A(20 M)预处理结肠上皮30分钟后,显著抑制了该药诱导的短路电流增加;在ELISA测定结肠上皮胞内[cAMP]i的实验中,该药被证实能升高胞内[cAMP]i.结论:麻仁胶囊能呈剂量依赖性地刺激大鼠远端结肠上皮的阴离子分泌;通过升高胞内[cAMP]i激活黏膜面上的CFTR通道,并且共同作用位于基底膜面的NKCC和K通道,从而促进结肠上皮的水和电解质转运.     

长链非编码RNA MALAT1调控Rac1b表达与结直肠癌侵袭和转移的关系

目的:探讨MALAT1调控Rac1b的表达与结直肠癌侵袭和转移的关系。方法:结直肠癌患者组织样本手术切除后30 min内于-80℃保存;实时荧光定量PCR检测肿瘤组织和配对正常组织中MALAT1和Rac1b mRNA的表达;RNA干扰沉默结直肠癌细胞MALAT1表达,通过Western blot检测Rac1b和上皮间质化标志物的表达,Ed U实验检测其对细胞增殖的影响;Transwell小室实验检测MALAT1低表达后对细胞迁移和侵袭的影响。结果:MALAT1在结直肠癌中低表达;干扰MALAT1表达后,Rac1b的表达升高,细胞增殖加快,且上皮间质化标志物E-cadherin和β-catenin表达升高。干扰MALAT1的表达可明显促进结直肠癌侵袭和细胞的迁移和侵袭。结论:MALAT1低表达与结直肠癌侵袭和转移密切相关,并且这一相关性是通过调控Rac1b的表达实现的。