5一羟色胺能神经对横断损伤脊髓的再支配-脊髓内移植研究

用成年SD大鼠20只在脊髓的低位胸髓完全横断损伤,分别在1周和1月后,用富含5一羟色胺(5—HT)神经元的胚鼠脑干中缝组织悬液植人损伤尾侧的脊髓内,动物存活2个月,脊髓作5—HT免疫组化观察.结果:(1)胚5-HT能神经元能在成年大鼠脊髓内存活,5-HT纤维大多在灰质中延伸并向靶区分布,(2)损伤后1周移植组的5-HT能神经元存活量,5-HT纤维在宿主脊髓内延伸距离,以及5-HT末梢再分布的密度都优于损伤后1月移植组.     

调心方对Aβ25-35杏仁核注射大鼠脑内细胞周期相关蛋白表达的影响

目的 :探讨调心方对 β淀粉样蛋白 (β amyloid ,Aβ)片段Aβ2 5 3 5杏仁核注射大鼠脑内细胞周期相关蛋白表达的影响。方法 :用Aβ2 5 3 5多肽片段进行大鼠单侧杏仁核注射 ,以模拟阿尔茨海默病 (Alzheimer’sdisease ,AD)脑内Aβ对神经系统的损害。应用免疫组织化学染色和积分光密度分析检测磷酸化tau、Aβ、cyclinA、cyclinB1等蛋白水平的变化。结果 :与生理盐水对照组比较 ,Aβ注射大鼠脑内的磷酸化tau、Aβ、cyclinA、cyclinB1等蛋白水平有不同程度的升高 (P <0 0 5 ) ,而给予调心方的动物在一定程度上能降低这些蛋白的水平 (P <0 0 5 )。结论 :调心方对Aβ引起的动物脑内神经元异常表达的细胞周期相关蛋白有一定的抑制作用。     

调心方对大鼠杏仁核注射Aβ25-35致P35和tau蛋白磷酸化的调节作用

目的　观察大鼠单侧杏仁核注射 β淀粉样蛋白 (Aβ)多肽片段Aβ2 5 3 5后 ,其学习记忆能力改变、脑内tau蛋白磷酸化和P35蛋白的表达变化 ,并用此动物模型观察调心方的作用。　方法　Morris水迷宫检测学习记忆能力 ,免疫组化法检测大鼠脑内P35和磷酸化tau蛋白。　结果　Morris水迷宫测试显示 ,Aβ注射组大鼠平均潜伏期 (2 0 4± 36 5 )s比手术对照组 (8 8± 12 1)s明显延长 ,Aβ加用调心方组 (9 8± 10 3)s较Aβ注射组显著缩短 (P <0 0 5 )。免疫组化和积分光密度分析显示Aβ注射后脑内P35和磷酸化tau增加 ,但术后 2 1dP35蛋白水平开始下降 ,而磷酸化tau蛋白继续增高 ;调心方治疗组P35和磷酸化tau蛋白均较Aβ注射组有不同程度的降低。　 结论　Aβ的毒性作用可导致脑内神经元tau蛋白磷酸化增加 ,其部分原因可能与P35蛋白表达增加有关 ;而调心方具有抑制Aβ诱导的这些反应。     

调心方中β淀粉样蛋白结合成分的初步探讨

目的:探讨调心方中是否具有通过结合β淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)而减少其神经元毒性的成分.方法:调心方提取物与Aβ共同沉淀并对沉淀物中的Aβ进行免疫印迹检测,制备小量Affi-gel-Aβ,用高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)检测调心方中Affi-gel-Aβ结合组分;大鼠原代皮层神经元培养,以乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)测定法反映细胞损害程度.结果:免疫印迹检测显示Aβ能与调心方中的成分一起沉淀,且沉淀中的Aβ会随调心方的稀释而减少;调心方与Affi-gel-Aβ反应后,用甘氨酸液(pH 2.5)洗脱的组分中有可被HPLC荧光检测器所检测的物质.LDH漏出检测结果显示,在无血清和含血清的培养体系中5 μmol/L Aβ<,1-42>处理48 h均可导致原代培养神经元损害,LDH漏出率显著增加(P<0.01),而大鼠调心方药物血清可抑制Aβ诱导的LDH漏出(P<0.05);经Affi-gel-Aβ吸附的调心方药物血清对Aβ毒性仍有抑制作用(P<0.05),但较经Affi-gel吸附的药物血清有减弱的趋势.结论:调心方中有Aβ结合成分,这类成分不促进Aβ的毒性,而可能具有抑制Aβ毒性的作用.提示在对老年性痴呆有效的中药方剂中探寻Aβ结合成分可能是探寻治疗AD药物的一个手段.     

大鼠脊髓横断损伤后移植胚胎5—羟色胺能神经元…

成年ＳＤ大鼠于第九胸髓（Ｔ９）处横断损伤，一周后将大鼠胚胎脑干中缝组织细胞悬液植入Ｔ９以下的脊髓内，动物存活１－１２月，分期处死取材，作５－羟色胺（５－ＨＴ）免疫组化的光镜和电镜观察。结果：脊髓损伤部位尾侧的脊髓内５－ＨＴ阳性标记的纤维未梢消失，移植后于植入部位见许多５－ＨＴ阳性标记细胞，其突起在脊髓灰质内长距离延伸，末梢的分布与正常动物相似，并在免疫电镜下见到５－ＨＴ能神经末梢的突触形成。     

白细胞介素—1β及肿瘤坏死因子—α对脑损伤后胶质细胞c—fos…

本研究用分子杂交技术观察了白细胞介素－１β及肿瘤坏死因子－α对脑损伤后及培养的胶质细胞ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达的影响。结果发现：脑损伤后损伤周围组织ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达呈动态变化；１ｈ后增加１７０％，１２ｈ后增加３０％，２４ｈ后增加１３０％。发现白细胞介素－１β和肿瘤坏死因子－α能显著增加脑损伤后１２ｈ及２４ｈ ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ的表达；当培养的胶质细胞中加入此二者后１ｈ ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮ     

Alzheimer病患者和大鼠脑内早老蛋白-1的分布

用免疫组化方法和原位杂交观察散发性阿尔茨海默病 (Sporadic Alzheimer' s disease)病人和老年对照 ,以及成年大鼠脑组织内的早老蛋白 -1(Presenilin-1,PS1)分布。结果观察到 PS1在脑内广泛分布 ,其中小脑的 Purkinje细胞、皮层的第 、 层细胞、内嗅皮层的第 层、海马的锥体细胞层和颗粒细胞层、黑质等结构 PS1表达较高。在大鼠和正常对照人脑内大多数 PS1阳性神经元染色呈点状分布于胞浆内 ;而阿尔茨海默病人脑内有许多 PS1阳性神经元为均质染色并且其中有些呈神经原纤维缠结状 ,其次有大量各型 PS1阳性老年斑 ,和少量 PS1阳性胶质细胞。结果提示 PS1可能参与散发性阿尔茨海默病脑病理改变     

β-淀粉样蛋白免疫治疗阿尔茨海默型痴呆的研究进展

β-淀粉样蛋白免疫治疗阿尔茨海默型老年性痴呆是近年开展起来的新的研究领域。在阿尔茨海默病转基因动物上，β-淀粉样蛋白免疫治疗可抑制并改善脑的病理损害。尽管β-淀粉样蛋白疫苗在二期临床实验中发现了脑炎症状的病例，但这些病人的脑内确实有老年斑的减少。进一步的研究已部分揭示了β-淀粉样蛋白免疫治疗清除脑内β-淀粉样蛋白老年斑的机制及其产生副作用的原因。这些研究不仅为将来β-淀粉样蛋白免疫治疗重新回到临床打下了基础，也为其他的神经退行性疾病的治疗提供了新思路。