融合蛋白 NrCAM-Fc的重组体的构建

目的：构建神经原相关的细胞粘附分子（NrCAM）和免疫球蛋白Fc片段融合基因的重组质粒并通过Baculovirus载体转染到昆虫细胞。方法：利用RT－PCR方法从神经母细胞瘤细胞系SK－N－SN获得NrCAM的信号肽区和跨膜区片段并直接克隆到pGEMT载体，经多次酶切、连接、转化、筛选获得NrCAM-Fc的重组副合基因，测序后将此基因通过Baculovirus载体转染至昆虫细胞。结果：多种酶切和测序结果表明NrCAM-Fc的序列与原序列符合率达98％以上，NrCAM与Fc连接处序列保证了Fc的读码框架（ORF）。结论：Baculovirus载体转染效率高，检测方法简便易行。     

人巨细胞病毒临床分离株US28基因的研究

目的 研究US28基因在儿童人巨细胞病毒临床分离株中的多态性，探讨多态性与致病性间的关系。方法 对临床分离株进行PCR扩增和HMA—SSCP分析，选取有代表性的毒株进行克隆和测序，对测序结果进行序列分析。结果 测序结果可见US28核酸变异比较普遍，变异集中在序列的两端，大部分变异是同义突变，US28的重要功能基团高度保守；氨基酸变异使临床株的US28编码蛋白的二级结构呈现出3种新构象；未发现US28基因多态性与临床致病性的联系；GenBank序列与临床分离株序列的氨基酸高突变位点不尽相同。结论 US28基因变异在临床分离株中普遍存在，临床株序列与GenBank序列在氨基酸的高突变位点上存在差异；实验室标准株VHL／E株比AD169株和TOWNE株更接近临床株。     

脑得生分散片处方优选及体外释放度评价

目的:优选脑得生分散片的成型工艺并对其体外释放度进行评价。方法:以崩解时间、成型性为指标,采用单因素试验和正交试验筛选脑得生分散片的辅料种类及配比;以葛根素为检测指标,采用溶出度测定法对脑得生分散片和脑得生普通片的体外释放进行对比评价。结果:最佳制备工艺为以硫酸钙为填充剂,95%乙醇为黏合剂,联合崩解剂为5%微晶纤维素-5%交联聚乙烯吡咯烷酮-5%交联羧甲基纤维素钠-0.5%羟丙基纤维素,硬度6～7 kg适宜;脑得生分散片10 min内溶出率>80%,15 min左右溶出率已达90%,脑得生普通片10 min内溶出率<50%,45 min尚未达到80%,而脑得生分散片45 min体外释放度94.65%。结论:脑得生分散片制备工艺稳定、操作简便可行,且其体外释放效果明显优于脑得生普通片。     

逍遥散的研究概况

道遥散由柴胡、白芍、白术、茯苓、当归、甘草、生姜、薄荷8味中药组成.现已被广泛应用于治疗妇科、内科、消化科、呼吸科、五官科、皮肤科等12个科属,临床应用治疗多达165种痰病.因此,逍遥散的研究一直以来备受关注,在临床应用中发挥重要的作用.本文针对逍遥散个味药的化学成分、药理作用和临床应用等方面作一综述.     

胰岛素非注射给药及与中药联合应用新进展

胰岛素是一种常用降糖药,但直接将胰岛素口服给药,可使其在胃肠道被蛋白酶迅速降解,因此临床通常采用注射给药,但注射给药给病人带来诸多不便。近年来,非注射给药途径的胰岛素制剂已成为研究热点。随着国内外对胰岛素制剂的深入研究和药剂工业的发展,胰岛素非注射给药系统研究的发展十分迅速,取得了很大的进展。根据中医的研究理论可知,糖尿病早期以阴虚燥热型及气阴两虚型为多见,中药对于糖尿病的胰岛素功能、胰岛素抵抗及症状均有改善作用。中药联合胰岛素治疗可以更有效地控制糖尿病病情,减少并发症,能取得更好的治疗效果。全文介绍了胰岛素的口服、透皮、黏膜、肺部等非注射给药系统,并阐述了中药联合胰岛素治疗阴虚燥热型糖尿病的研究进展。     

人巨细胞病毒PPUL44蛋白核定位信号结合多肽氨基酸序列分析

目的 寻找与人巨细胞病毒（HCMV）PPUL44蛋白核定位信号（NLS）具有较强能力的多肽,研究这些多肽的氨基酸序列特点。方法 采用合成的HCMV PPUL44 NLSA和NLSB分别在一个随机多肽文库中筛选出与NLS具有结合能力的克隆,用四色荧光自动测序的方法测定上述克隆的DNA序列,对这些克隆的多肽氨基酸序列进行同源性比较,并与蛋白质文库中已知蛋白的氨基酸序列进行比较。结果 与HCMV PPUL44 NLSA具有结合能力的多肽（bNLSApep)的氨基酸序列与细胞输入蛋白Importin α亚单位的氨基酸具有较高的同源序列,其中bNLSApep48氨基酸序列AVVTPVLTEILK与Importin α亚单位的Arm7区的第18至29氨基酸序列ANIFPVLTEILQ具有极高的相似性;bNLSBpep39氨基酸序列则与Imporin α亚单位的全部8个Am区的第10至21氨基酸的同源序列相似。结论 HCMV PPUL44 NISA可能是Importin α亚单位针对HCMV PPUL44蛋白的特异性识别位点,与Importin α亚单位Arm7区结合;而HCMV PPUL44 NLSB则为Importin α亚单位的非特异性识别位点。本研究结果提供了Importin α亚单位的Arm重复区是NLS结构结合区的实验证据。