金贝口服液抗SARS-CoV-2的作用机制研究

目的 探讨金贝口服液(黄芪、党参、北沙参等组成)抗新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)的作用机制。方法 通过细胞病变效应和蚀斑实验证明金贝口服液对SARS-CoV-2的抑制作用;利用前期建立的基于3C样蛋白酶(3-chymotrypsin-like protease,3CLpro)和木瓜样蛋白酶(papain-like protease,PLP)活性的药物筛选体系,测定金贝口服液对3CLpro和PLP活性的抑制效果;利用超高效液相色谱测定金贝口服液中的主要成分,并将鉴定出的成分与3CLpro和PLP进行分子对接,推测金贝口服液中可能抑制SARS-CoV-2的物质基础。结果 金贝口服液在体外具有抑制SARS-CoV-2作用,对3CLpro和PLP的IC50分别为(2.757±0.082)μL·mL^-1和(3.527±0.188)μL·mL^-1。分子对接结果显示,超高效液相色谱鉴定出的金贝口服液中12个主要成分中的连翘酯苷A、黄芩苷、丹酚酸B、汉黄芩苷...     

磷酸奥司他韦不同时序干预对A型H1N1流感病毒感染小鼠模型药效及炎症因子调控作用研究北大核心CSCD

目的针对目前抗病毒体内实验给药时间点偏早的现状,本研究以磷酸奥司他韦(达菲)作为“工具药”,比较不同时序干预对病毒感染小鼠的影响,为抗病毒药物研究选择合理的模型干预时间点提供依据。方法将Balb/c小鼠随机分成6组,滴鼻感染流感病毒(0.25 TCID_(50))建立病毒感染小鼠模型,达菲-1组、达菲-2组分别在染毒后d 1和d 4灌胃给药。测定体质量,计算生存率、脏器指数,测定病毒载量及炎症因子含量。结果与空白对照组比较,模型组小鼠的体质量降低,肺指数均明显升高(P<0.05);模型-2组13个炎症因子表达水平差异有显著性(P<0.05)。与模型-1组相比,达菲-1组肺指数、脾指数明显降低(P<0.05),病毒载量为模型-1组的0.54倍;与模型-2组相比,达菲-2组肺指数明显降低(P<0.05)、胸腺指数明显升高(P<0.05),病毒载量为模型-2组的0.03倍,13个炎症因子表达水平差异具有显著性(P<0.05)。结论方案2的小鼠染毒后症状更明显、稳定、给药后减轻了肺部炎症损伤,考虑了潜伏期,待模型动物出现症状开始进行药物干预符合临床用药指征,无论是在模型评估还是药物评价将更合理和准确。     

Mina53与CBX8在肝细胞肝癌中的表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的 探讨Mina53与CBX8在肝细胞肝癌中的表达，并分析两者与肝细胞肝癌患者临床病理特征及预后的关系。方法 收集121例肝细胞肝癌患者术后切除标本制作组织芯片，采用免疫组织化学PV6000法检测Mina53与CBX8在肝细胞肝癌及相应癌旁相对正常组织中的表达，应用SPSS23.0软件对数据进行统计分析。结果 Mina53、CBX8在肝细胞肝癌中的表达水平高于癌旁相对正常组织（均P<0.001）。Mina53表达与肿瘤大小、被膜侵犯、脉管侵犯、病理分级、TNM分期有关（均P<0.05）；CBX8表达与乙肝表面抗原（HBsAg）、肿瘤大小、被膜侵犯、TNM分期有关（均P<0.05）。肝细胞肝癌中Mina53与CBX8表达呈正相关（r=0.574, P<0.01）。Mina53与CBX8均高表达患者的OS和DFS较Mina53或CBX8高表达者和两者均低表达者更短（均P<0.001）。多因素分析显示，Mina53、CBX8的表达水平是肝细胞肝癌患者术后OS和DFS的独立预后影响因素（P<0 . 0 5 ） 。结论 Mina53及CBX8在肝细胞肝癌组织中高表达， 可能与肝细胞肝癌的发生发展和浸润转移有关，Mina53和CBX8高表达提示患者预后不良，联合检测Mina53和CBX8有助于肝细胞肝癌的预后判断。     

EIF5A2在人肝细胞癌中的表达及其与术后生存期的关系

目的 检测真核翻译起始因子5A2（EIF5A2）在肝细胞癌（HCC）中的表达,探讨其与临床病理特征及预后的关系。方法 qRT-PCR和Western blot法分别检测12对新鲜HCC及癌旁非瘤组织中EIF5A2 mRNA和蛋白水平的表达;免疫组织化学检测284对HCC及癌旁非瘤组织中EIF5A2的表达水平,并分析其与患者临床病理特征及预后的关系。结果 新鲜HCC组织中EIF5A2 mRNA和蛋白质的相对表达水平均高于癌旁非瘤组织,差异有统计学意义（t=5.305, P=0.0003; t=10.120, P<0.001）;284例HCC组织中EIF5A2的相对表达水平高于癌旁非瘤组织（z=-12.186, P<0.001）。EIF5A2的表达与HCC患者的肿瘤大小（χ²=13.079, P<0.001）、肿瘤多发性（χ²=4.589,P=0.032）和分化程度有关（χ²=4.844,P=0.028）;EIF5A2高表达患者术后三年及五年总体生存期及无病生存期较低表达者更短（均P<0.001）;EIF5A2是影响HCC患者三年及五年总体生存期和无病生存期的独立预后因素（均P<0.05）。结论 EIF5A2的高表达可能与肝细胞癌的发生发展有关,EIF5A2高表达是预后不良的独立影响因素,可作为判断肝细胞癌患者预后的潜在分子标志物。     

6种中成药对SARS-CoV-23CLpro和PLP活性的抑制作用

目的 研究治疗新型冠状病毒肺炎不同时期的6种中成药对3C样蛋白酶(3CLpro)和木瓜样蛋白酶(PLP)的抑制作用，探讨其干预新型冠状病毒肺炎的机制。方法 经镍柱纯化获得原核表达且纯度高的3CLpro和PLP。基于荧光共振能量转移原理，建立3CLpro和PLP活性检测的药物筛选模型，分别以3CLpro抑制剂依布硒、PLP抑制剂GRL0617验证筛选模型的有效性。在此基础上，开展针对新型冠状病毒肺炎临床不同时期(医学观察期、轻型、普通型、重型、危重型)的代表性6种中成药靶向抑制3CLpro和PLP活性的研究。结果 金花清感颗粒、疏风解毒胶囊、热毒宁注射液、血必净注射液、痰热清注射液对3CLpro具有较强的抑制作用(抑制率>80%),同时疏风解毒胶囊、痰热清注射液、热毒宁注射液对PLP也具有较强的抑制作用(抑制率>80%)。结论 金花清感颗粒等6种中成药对3CLpro或PLP都有较强的抑制作用，这可能是它们针对新型冠状病毒肺炎临床不同时期发挥抗SARS-CoV-2的内在机制。另外，疏风解毒胶囊、痰热清注射液、热毒宁注射液对新型冠状病毒2个靶蛋白酶活性的抑制作用都较强，可能具有潜...