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目的:采用HPLC-DAD方法,对气血双补酊剂进行指纹图谱分析和10种活性成分同时测定来进行质量控制。方法:通过优化提取、分离和分析条件,采用Merck C18色谱柱,流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液,波长203 nm。结果:通过分析10批样品指纹图谱,确立了32个共有峰作为特征峰来进行评价,10批样品相似度高,10种活性成分含量同时测定的结果稳定可靠。结论:该多成分含量测定的方法,结合色谱指纹图谱分析,具有实际应用,可以全面对气血双补酊剂进行质量进行控制。 相似文献
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p65结合肽与p65的亲和力检测及其对NF-κB DNA结合活性抑制作用的鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的检测NF-κB p65亚基结合肽与p65间相互作用的亲和常数,以及其对NF-κB DNA结合活性的抑制效应.方法借助于生物传感器技术分析NF-κBp65亚基结合肽与p65相互作用的动力学,同时应用竞争性ELISA鉴定结合多肽对NF-κB DNA结合活性的抑制效应.结果生物传感器技术分析结果表明5条p65结合肽均能与p65发生相互作用,相互作用的亲和常数分别为GST-BPT1:2.67×10-7mol/L、GST-BPT2:9.02×10-6mol/L、GST-BPT3:1.07×10-6mol/L、GST-BPT4:8.03×10-6mol/L、GST-BPT5:9.83×10-7mol/L.竞争性ELISA检测结果表明5条p65结合肽均能在一定程度上抑制NF-κB与其顺式作用元件κB基序的结合,且这种抑制效应随多肽浓度的增加而增强.结论酵母双杂交筛选获得的5条p65结合多肽与p65间确实存在相互作用,且5条结合肽对NF-κBDNA结合活性均有一定的抑制效应,由此提示以这些多肽为先导物设计和开发靶向NF-κB的抗炎多肽药物将成为可能. 相似文献
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抑郁症是一种严重危及人类身心健康的情感障碍性精神疾病。临床常用抗抑郁药物在一定程度上能够缓解患者的症状,但存在起效缓慢、副作用大等局限性。神经肽是体内重要的生物活性分子,广泛参与了应激反应、睡眠、情绪等过程。近年来,神经肽在抑郁症发病中的作用逐渐引起关注,以神经肽作为分子靶点已经成为抗抑郁药研发的新方向。神经肽三叶因子3(trefoil factor 3,TFF3)分布于海马、杏仁核和下丘脑等脑区,参与焦虑行为的调节。本研究旨在探讨神经肽TFF3的抗抑郁作用,以期为抑郁症发生机制研究和开发新型抗抑郁药物提供实验依据。大鼠强迫游泳实验是经典的行为绝望模型,因其简单、快速、敏感,经常被用于抗抑郁药物的快速筛选。在强迫游泳实验中,单次给予TFF3能显著降低大鼠不动时间,而不影响大鼠自发活动。慢性轻度应激通过长期给予动物厌恶的、不可预见的应激,比较真实的模拟了人类抑郁症的环境因素,使动物表现出与抑郁症患者相似的行为变化,是目前国内外公认的抑郁症模型之一。我们采用连续给予21 d应激,通过糖水偏爱来检测动物的快感缺失以及TFF3的抗抑郁作用。与对照组比较,应激组动物蔗糖偏爱度降低,单次给予TFF3可逆转上述抑郁样行为,提示TFF3在这一模型上具有良好的抗抑郁样作用。此外,单次给予TFF3能显著增加基底外侧杏仁核(BLA)脑区的c-Fos表达,但对CeAc-FOS表达水平无显著影响。最后,BLA微注射PI3K抑制剂LY294002能显著抑制TFF3的抗抑郁作用,表现为LY294002能逆转强迫游泳中TFF3给药大鼠不动时间的降低,LY294002给药本身不改变大鼠强迫游泳的不动时间。TFF3不改变大鼠的攀爬时间,而LY294002给药本身也不显著改变大鼠攀爬时间。本研究结果首次证实了神经肽TFF3具有抗抑郁作用,BLA脑区PI3K信号通路可能介导了TFF3的抗抑郁作用。本研究的开展为抑郁症发病机制研究和开发以神经肽TFF3为靶点的新型抗抑郁药物提供了新的思路。 相似文献
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目的探讨哺乳期母源应激对子代小鼠青春期神经行为发育的影响。方法哺乳期母鼠随机分为应激组、分离组、对照组,小鼠出生7d后,应激组母鼠每天进行5min的冷水游泳应激,持续14d,采用强迫游泳、悬尾实验、自发活动等方法对子代小鼠青春期(35d)体质量、神经行为进行评定。结果哺乳期母源慢性应激显著增加青春期子代小鼠对应激的易感性,表现为对强迫游泳漂浮不动时间的显著增加[雌性:应激组、分离组和对照组分别为(139±6)s,(138±9)S和(96±9)S;雄性:3组分别为(139±9)s,(112±9)S和(96±9)s]和悬尾测试中小鼠不动时间的增加[雌性:应激组、分离组和对照组分别为(127±8)s,(123±8)S和(98±6)S;雄性:3组分别为(141±7)s,(105±5)s和(92±6)s];同时发现应激易感性的改变存在性别差异,雌性个体对哺乳期母源慢性应激更加敏感。结论哺乳期母源应激可能是子代青春期抑郁发生的重要影响因素,为青春期抑郁症的早期预防和干预拓宽了思路。 相似文献
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目的 探讨神经肽三叶因子3(trefoil factor 3,TFF3)对可卡因诱导的大鼠奖赏行为的影响及其可能机制.方法 50只SD大鼠分为对照组、可卡因组、可卡因+TFF3(0.01 mg/kg)组、可卡因+TFF3(0.1 mg/kg)组、可卡因+TFF3(0.5 mg/kg)组和TFF3(0.1 mg/kg)组六组(n=7~9),TFF3/生理盐水腹腔注射后30 min后给予可卡因(10 mg/kg)腹腔注射,记录可卡因给药后1h内大鼠自发活动情况.自发活动测试后立即断头取脑,分离伏隔核脑区(n=4~6),采用高效液相色谱法测定伏隔核脑区神经递质(多巴胺及其代谢物二羟苯乙酸)含量;另有21只大鼠分为对照组和TFF3处理组,经2d生理盐水、可卡因交替训练建立条件位置偏爱(CPP)模型,TFF3(0.1 mg/kg)/生理盐水腹腔注射后30 min后给予可卡因(5 mg/kg)腹腔注射TFF3,观察其对可卡因CPP评分的影响.结果 腹腔注射TFF3(0.1 mg/kg)可增强可卡因诱导的奖赏行为,表现为TFF3显著增加可卡因诱导的大鼠自发活性变化[对照组、可卡因组、可卡因+TFF3(0.01 mg/kg)和TFF3(0.1 mg/kg)组大鼠1h内运动总路程分别为:(180±41)cm,(359±53)cm,(590±75)cm,(153±27)cm];条件性位置偏爱实验显示,TFF3(0.1 mg/kg)能显著增强可卡因诱导的条件性位置偏爱的形成[训练后偏爱值分别为:(98±18)s,(187±24)s];高效液相色谱分析发现,TFF3能显著增加由可卡因诱导的大鼠伏隔核多巴胺变化[对照组、可卡因组、可卡因+TFF3(0.1 mg/kg)和TFF3(0.1 mg/kg)组分别为:(0.65±0.1)ng/ml,(1.24±0.14)ng/ml,(1.75±0.23) ng/ml,(0.74±0.21) ng/ml].结论 神经肽TFF3能够调节可卡因诱导的奖赏行为,这种调节作用可能与其影响伏隔核脑区多巴胺含量调节有关. 相似文献
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PBL理论及其在生化实验教学中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
基于问题的学习(problem-based learning,PBL)是1969年美国神经病学教授Barrows提出的一种新型教育模式。它强调把学习设置到复杂的、有意义的问题情境中,通过让学生合作解决真实性问题,来学习隐含于问题背后的科学知识,旨在培养学生.获取新知识能力、自主学习能力以及解决真实问题的能力。目前PBL已经应用于多个学科领域。 相似文献