丹参多糖提取工艺优选与含量测定

目的优化丹参多糖提取工艺,测定不同产地丹参药材多糖含量。方法采用正交实验设计法,以丹参药材中多糖含量为指标,确定多糖提取的最佳工艺,采用苯酚 硫酸法对不同产地丹参药材的多糖含量进行测定。结果建立了丹参药材多糖的最优提取工艺：加入溶剂量20倍,药材粉末回流提取50 min,提取3次,醇沉浓度为70%。不同产地的丹参药材多糖含量差异无统计学意义。结论优化的提取工艺稳定、合理、可行,为丹参药材多糖活性的进一步研究和药材质量评价提供了可靠的实验依据。     

桔梗生长年限和采收期与质量的相关性研究

目的确定桔梗最佳生长年限与最佳采收期。方法蒽酮比色法测定多糖含量;HPLC测定桔梗皂苷D含量;改进的总苷称重法测定总皂苷含量。结果以两年生,9月下旬至11月上旬采收的桔梗质量最佳。结论三种指标具有代表性,能够较全面反映药材质量。     

壁虎和蛤蚧的PAGE鉴别与总蛋白含量测定

目的：通过蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）为壁虎和蛤蚧的有效鉴别提供实验依据。方法：提取中药无蹼壁虎和蛤蚧干燥全体的水溶性蛋白质,对其进行总蛋白含量的测定和等体积PAGE,分析电泳图谱。结果：蛤蚧样品的水溶性总蛋白含量高于壁虎;壁虎和蛤蚧的蛋白质条带在分布和数量方面存在比较明显的差异。结论：PAGE实验快速、准确、重复性好,可用于壁虎和蛤蚧的区别鉴定,同时可作为中药材质量评价的重要依据之一。     

不同产地和不同部位的壁虎药材蛋白质比较研究

目的:为中药壁虎质量标准的制订与资源开发提供科学的实验依据及可靠的实验方法.方法:提取不同产地的无蹼壁虎药材不同部位(壁虎体与壁虎尾)的水溶性蛋白质,并对其进行含量测定和聚丙烯酰胺凝胶电泳,比较壁虎药材蛋白质含量和组成的产地差异和部位差异.结果:不同产地壁虎药材的蛋白质含量不同,同一产地壁虎药材的不同部位蛋白质含量也存在差异.蛋白质电泳图谱显示,除共有条带外,同一提取部位的蛋白条带的分布位置和数量随产地存在一定差异.结论:考马斯亮蓝染色法简便、快速,标准曲线线性关系良好,可以用来进行蛋白质含量的测定.聚丙烯酰胺凝胶电泳实验快速、准确、重复性好,得到的蛋白质电泳指纹图谱可作为壁虎药材质量评价和资源开发的重要依据之一.     

单因素考察和正交试验结合优选黄芪药材蛋白质提取工艺

目的:优选黄芪药材可溶性蛋白质的最佳提取工艺。方法:对黄芪药材蛋白质提取条件进行单因素考察,并采用L9(34)正交试验设计法,采用考马斯亮蓝染色法,以黄芪药材可溶性蛋白质含量为指标,考察料液比、pH值、提取温度、提取时间四个因素对可溶性蛋白质提取率的影响,从而确定黄芪药材蛋白质的最佳提取工艺。结果:建立了黄芪药材蛋白质的最佳提取工艺:向黄芪药材粉末中加入20倍量pH为12的蒸馏水,在温度30℃条件下回流提取10 min。结论:优化的提取工艺稳定、合理、可行,能正确反映黄芪药材中的蛋白质含量,为黄芪生物活性物质的进一步研究提供了实验依据。     

丹参多糖提取影响因素研究

目的:考察不同提取方式和不同因素水平对丹参多糖提取率的影响,优化丹参药材多糖提取工艺。方法:采用苯酚-硫酸比色法,以丹参药材多糖提取率为评价指标,采用单因素实验设计,考察提取方式、料液比、醇沉浓度、提取时间对丹参多糖提取率的影响。结果:回流提取方式的丹参多糖得率显著高于超声提取方式。料液比为1∶20时丹参多糖提取率最高,醇沉浓度以70%效果最好,提取时间以提取70 min时得到的多糖量最高。结论:不同提取方式和不同因素水平对丹参药材多糖提取率有显著影响。     

壁虎体外抗Bel-7402肿瘤细胞活性部位的筛选研究

目的:对壁虎体外抗Bel-7402肿瘤细胞的活性部位进行筛选研究,为壁虎抗肿瘤活性物质研究奠定基础。方法:采用超声﹑萃取的方法依次分级提取壁虎的石油醚部位、二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位,并采用噻唑蓝(MTT)法对不同极性部位的体外抗Bel-7402肿瘤细胞作用进行研究。结果:壁虎醇提物的石油醚部位、二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位在体外对Bel-7402肿瘤细胞抑制率分别为93.24%、74.81%、93.25%、91.03%和25.13%,抑制率从高到低依次为石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、二氯甲烷部位、水部位。结论:壁虎醇提物的石油醚部位、二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位对Bel-7402肝癌细胞均有一定抑制作用,其中以石油醚部位的抑制作用最强。     

黄芪蛋白提取方法的比较

目的:应用蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术筛选建立黄芪蛋白质指纹图谱及蛋白提取方法。方法:采用8种提取方法(稀释4倍的浓缩胶缓冲液,双蒸水,Tris-HCl法,柠檬酸盐法,PVP buffer,改良饱和酚法,TCA-丙酮法,植物蛋白提取试剂盒)提取黄芪药材的水溶性蛋白质,根据PAGE谱带的多少和清晰度优选建立黄芪药材蛋白质指纹图谱的蛋白提取条件。结果:植物蛋白质提取液、稀释4倍的浓缩胶缓冲液和Tris-HCl缓冲液提取的蛋白含量较高,但杂质较多,条带拖尾,部分特征峰不能得到有效分离。TCA-丙酮法、改良饱和酚法、柠檬酸盐缓冲液和PVP buffer提取的蛋白含量较低,谱带数目较少,辨识度低。以双蒸水为提取溶剂时可辨识谱带数目最多,清晰度较好,电泳指纹图谱中各峰的分离度较高。结论:双蒸水直接提取法更适用于建立黄芪药材的蛋白质指纹图谱。     

药用植物学实验教学探索与实践

结合药用植物学实验教学实践及现代社会对高素质人才的要求,针对教学过程中的具体问题,从实验准备、实验内容、教学手段、考核方式等方面对药用植物学实验教学进行探索与实践,以促进实验教学水平的提高和学生思维能力、创新能力的发展.