RNA干扰VEGFR-2表达对Calu-1细胞增殖、迁移、侵袭力及放射效应影响

目的 研究VEGFR-2对肺癌细胞系Calu-1细胞增殖、迁移、侵袭及联合放射后凋亡率影响, 并探讨其可能机制。方法 siRNA敲低Calu-1细胞中的VEGFR-2基因, 借助实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测VEGFR-2表达水平的变化;将细胞分为对照组、VEGF组、VEGFR-2基因敲低组和基因敲低加VEGF组。利用CCK8法、细胞划痕实验及Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭能力变化, 利用蛋白印迹法检测VEGFR-2及下游相关信号通路蛋白表达水平变化;各组细胞联合放射后, 检测细胞凋亡。结果 RNA干扰VEGFR-2后Calu-1细胞中VEGFR-2的mRNA水平和蛋白水平均降低(P=0.001、0.000);RNA干扰VEGFR-2后Calu-1细胞的增殖、迁移、侵袭能力均降低(P=0.000、0.000、0.031);RNA干扰VEGFR-2后Calu-1细胞中Akt、ERK1/2、p38的蛋白磷酸化水平均降低(P=0.336、0.986、0.553);RNA干扰VEGFR-2后联合放射后Calu-1细胞的凋亡率增加(P=0.012), RNA干扰VEGFR-2后HIF-1α蛋白表达被抑制(P=0.016)。结论 VEGFR-2基因表达敲低后显著抑制了Calu-1细胞的多项生理功能, 并提高了放射后细胞凋亡率。     

人胰腺癌PANC-1细胞株中不同亚群放射敏感性的比较分析

目的：研究人胰腺癌PANC‐1细胞株中干性细胞放射敏感性,并探讨其放射抗拒的可能机制。方法应用流式细胞仪分选CD44＋CD24＋、CD44－CD24＋、CD44＋CD24－和CD44－CD24－细胞亚群;照射后,计算放射增敏比;利用流式细胞术检测凋亡及周期分布,并结合DCFH‐DA探针检查各亚群活性氧簇（ROS）水平。结果 PANC‐1细胞中CD44＋细胞比例约为92．0％, CD24＋细胞比例约为4．7％。照射前4组凋亡差异无统计学意义（ P＞0．05）;照射后CD44＋ CD24＋的凋亡比例最低（ P＜0．01）。照射前后CD44＋CD24＋的G0／G1期比例最高,显著高于其他3组（ P＜0．01）。照射后CD44＋ CD24－、CD44－CD24＋和CD44－CD24－放射增敏比分别为1．61、1．81、1．94;照射后CD44＋ CD24＋ ROS水平最低,平均荧光强度显著低于其他3组（ P＜0．01）。结论人胰腺癌PANC‐1细胞株中干性细胞大多处于静止期,且低ROS水平,因此考虑胰腺癌干性细胞的放射抗拒与此有关。     

非小细胞肺癌外周血T细胞表面程序性细胞死亡因子1的表达与免疫治疗疗效的相关性研究

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)病人外周血CD3⁺T细胞、CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞表面的免疫检查点程序性细胞死亡因子1(PD-1)的表达情况及其与PD-1单抗治疗疗效的相关性分析。方法 选取2020年9月至2021年12月在连云港市第一人民医院初步诊断为非小细胞肺癌的病人50例,另外选取该院体检中心的健康体检者40例为本研究的健康对照组。采用流式细胞术(FCM)检测50例NSCLC病人和40例健康对照者的外周血CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞表面PD-1的表达水平,分析其与临床特征的关系;所有NSCLC病人均接受PD-1单抗治疗,每周期用药前检测PD-1的表达水平,后通过实体瘤免疫疗效评价标准(iRECIST)疗效评价,将病人分为治疗缓解组和治疗耐药组,观察免疫治疗疗效与PD-1的水平变化之间的相关性。结果NSCLC病人外周血CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞表面PD-1...     

彩色多普勒超声筛查椎动脉狭窄的效果

目的 评价彩色多普勒超声筛查椎动脉狭窄并评价狭窄程度的效果.方法 选取2019年8月至2020年8月惠州市第六人民医院功能科82例行椎动脉狭窄性病变筛查的患者,所有患者均行数字减影血管造影(DSA)检查及彩色多普勒超声检查,以DSA检查结果为金标准,分析彩色多普勒超声检查的诊断符合率及其对不同程度椎动脉狭窄的诊断价值.结果 82例患者共诊断164支椎动脉,DSA检查结果为椎动脉正常、轻度狭窄、中度狭窄、重度狭窄、闭塞分别为77、24、21、29、13支,彩色多普勒超声筛查结果分别为58、32、34、27、13支,检查结果一致共110支,符合率为67.07％(110/164).彩色多普勒超声与DSA筛查,对不同程度椎动脉狭窄的判断结果差异无统计学意义(P>0.05).结论 彩色多普勒超声对椎动脉狭窄性病变的诊断准确率较高,对椎动脉狭窄程度的判断准确性较好.     

维持性血液透析患者导管相关性血流感染的临床研究

目的 探讨尿毒症维持性血透(maintenance hemodialysis, MHD)患者并发导管相关性血流感染(catheter-related bloodstream infection, CRBSI)的病原菌分布、药敏试验及临床相关分析。方法 选取2018年1月—2021年1月在周口市中心医院收治的尿毒症患者200例,根据MHD治疗期间是否并发CRBSI分组为感染组(n=31)和未感染组(n=169)。采集血标本进行病原菌培养、分离与鉴定,采用MIC法进行药敏试验,采用logistic回归分析影响尿毒症MHD患者发生CRBSI的危险因素。结果 31例尿毒症MHD合并CRBSI患者共检出病原菌53株,主要包括表皮葡萄球菌(18.87%)、金黄色葡萄球菌(16.98%)、铜绿假单胞菌(13.21%)和大肠埃希菌(13.21%)等。表皮葡萄球菌对万古霉素、替加环素和利奈唑胺抗生素较为敏感,对红霉素、阿奇霉素和青霉素G抗生素耐药率最高。铜绿假单胞菌对阿米卡星、粘菌素和庆大霉素较为敏感,对左氧氟沙星、替卡西林/克拉维酸和哌拉西林抗生素耐药率最高。白假丝酵母菌对伏立康唑、两性霉素和氟康唑均...     

miRNA-1对胃癌细胞体外EGFR-TKI敏感性影响的实验研究

目的 探讨上调或沉默miRNA-1(miR-1)表达对胃癌细胞体外表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)敏感性影响的研究.方法 选择人胃癌细胞系MKN-45作为受试对象,慢病毒转染miR-1或miR-1 shRNA,分别作为miR-1组和miR-1 shRNA组,并采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测...     

乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞阴性富集法检测及其临床意义

目的 循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)的检测作为一种新兴的检测方法,在临床实践中拥有广阔的应用前景.本研究通过阴性富集法检测乳腺癌患者外周血CTC,探讨CTC水平与其分子分型及临床特征的相关性,研究其临床意义.方法 选取连云港市第一人民医院2015-08-18-2016-02 20接受CTC检测的乳腺癌患者152例为研究对象,收集临床资料,选择同期该院29例乳腺良性疾病患者作为对照组.采用免疫磁珠阴性富集及免疫荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测CD45-/CEP+/DAPI+的CTC,并结合乳腺癌分子分型和临床特征进行统计学分析.结果 152例乳腺癌患者与29例乳腺良性疾病患者进行ROC曲线分析,比较不同切点的敏感度及特异度,经计算Youden指数最高为0.390,对应切点为≥2.5,故取CTC个数≥3为阳性指标.152例乳腺癌患者中CTC阳性率Ⅰ～Ⅱ期为41.5％,Ⅲ期为60.0％,Ⅳ期为73.9％,差异有统计学意义,x2=9.360,P=0.009.CTC与乳腺癌分子分型无相关性,P＞0.05,与肿瘤原发灶分期、区域淋巴结转移、激素受体状况及HER2表达均无相关性,P＞0.05.但与是否发生远处转移密切相关,x2=5.863,P=0.015.结论 CTC与乳腺癌分子分型无明显相关,但与患者临床分期、是否发生转移密切相关,检测CTC有利于更准确的评估病情.     

内皮抑素对NSCLC细胞系中VEGF受体2表达的影响及其放射增敏效应机制研究

目的 研究内皮抑素对NSCLC细胞(人肺腺癌A549细胞、人肺鳞癌Calu-1细胞)中VEGF受体2(VEGFR₂)表达影响,并探索其放射增敏效应的可能机制。方法 CCK8法检测内皮抑素对细胞增殖抑制作用,计算24 h的20%药物抑制浓度(IC₂₀);采用RT-PCR及蛋白印迹法检测各组VEGFR₂、相关信号通路及HIF-1α mRNA与蛋白表达变化;克隆形成实验检测各组细胞放射敏感性,流式细胞术检测凋亡及周期分布。多样本均数比较采用单因素方差分析,组间比较采用两样本均数t检验。结果 经内皮抑素处理后,Calu-1细胞增殖活力明显下降(F=50.36,P<0.01),IC₂₀=296.5 μg/ml;VEGFR₂和HIF-1αmRNA与蛋白表达水平均受抑制(F=25.43、10.44,P值均<0.05);同时Akt、ERK1/2和p38的蛋白磷酸化水平均减低(F=2.89、0.24、1.09,P值均<0.05);其放射增敏比为1.38;凋亡率、G₂+M期阻滞增加(F=44.15、104.24,P值均<0.01)。此外,与Calu-1细胞相比,内皮抑素对A549细胞放射增敏比为1.09。结论 内皮抑素能促进VEGFR₂高表达Calu-1细胞凋亡并能增强放射敏感性,对低表达的A549细胞效果有限。