微小RNA与胃癌关系的研究进展

微小RNA(mircoRNA,miRNA)是22个核苷酸左右的非编码RNA.自从Lee等[1]于1993年在秀丽线虫(C.elegans)体内发现了第一种呈时间特异性表达的miRNA以来,关于miRNA研究的新成果不断涌现.miRNA在生物个体发育、细胞增殖、分化、凋亡、脂类代谢、激素分泌及肿瘤发生等多种生理和病理过程中发挥着重要作用[2-4].目前,miRNA已成为肿瘤病理学研究领域中最受关注的生物大分子之一.由于胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,我们就miRNA与胃癌关系的研究进展综述如下.     

植物雌激素大豆苷原(daidzein)对结肠癌LoVo细胞生长的影响

目的　了解植物雌激素大豆苷原(daidzein)对结肠癌细胞生长的影响。方法　取对数生长期的人结肠癌细胞株LoVo细胞,以不同浓度的大豆苷原处理细胞2 ,3,4和6d ,然后应用MTT法测定细胞的生长率。结果　大豆苷原在高浓度10 0 μmol/L时在体外对LoVo有明显的抑制作用(P<0.01) ,而在低浓度<5 μmol/L时对LoVo细胞又具有促增殖作用。结论　大豆苷原在体外对LoVo细胞的生长具有促进和抑制的双向作用     

枸杞多糖对人肝癌细胞 HepG2 生长的影响及其分子机制

目的 探讨枸杞多糖 (Lycium barbarum polysaccharides, LBP) 对人肝癌细胞 HepG2 生长的影响及可能机制。方法 人肝癌 HepG2 细胞用 100～1 000 mg/L LBP 处理 1～5 d,分别用 MTT 方法、流式细胞术检测细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡。用 Western blotting 分析周期蛋白 (cyclin) 和周期蛋白依赖性激酶 (cyclin-dependent kinase, CDK) 表达的变化。结果 LBP 以质量浓度依赖方式抑制肝癌细胞的生长,阻滞细胞在 G⁰/G¹ 期,并诱导细胞凋亡;其分子机制为引起 cyclin D、cyclin E 和 CDK2 蛋白表达下降。结论 LBP 抑制人肝癌细胞 HepG2 增殖的机制包括阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡。     

芦荟大黄素抑制胃癌细胞生长与细胞周期阻滞的关系

目的 探讨芦荟大黄素抑制胃癌细胞生长与细胞周期阻滞的关系.方法 人胃癌SGC-7901细胞用2.5、5、10、20、40 μmol/L芦荟大黄素处理1～5 d.分别用MTT方法和流式细胞术检测细胞增殖情况和细胞周期的变化,然后用Western blotting方法检测细胞周期相关调控蛋白周期蛋白(cyclin)和周期蛋白依赖性激酶(cyclindependent kinase,CDK)的变化.结果 芦荟大黄素以剂量依赖方法抑制胃癌细胞的生长;芦荟大黄素引起细胞阻滞在G2/M期;其分子机制为引起cyclin A和CDK2的表达水平下降、cyclinBl和CDKl的表达水平上升.结论 芦荟大黄素抑制胃癌细胞生长的机制之一是阻滞细胞周期,说明芦荟大黄素在胃癌治疗方面有潜在的临床价值.     

靶向survivin基因siRNA对喉癌细胞增殖、凋亡的影响

目的观察靶向survivin基因的siRNA对喉癌细胞Hep-2增殖和凋亡的影响,为喉癌的基因治疗提供有效靶点及技术。方法使用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将靶向survivin基因的siRNA转染至喉癌细胞株Hep-2;MTT[3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐]法检测对喉癌细胞Hep-2增殖的影响;RT-PCR检测喉癌细胞Hep-2survivin基因mRNA表达的变化;Western Blot检测survivin基因蛋白表达;流式细胞技术检测喉癌细胞Hep-2凋亡情况。结果各浓度survivin-siRNA转染组细胞增殖抑制率和凋亡率均明显高于对照组（〈0.05）,survivinmRNA和蛋白表达有不同程度减弱,并且有明显的浓度依赖性,随着浓度的上升表达率下降。结论利用RNA干扰技术沉默survivin基因表达可以显著抑制喉癌细胞Hep-2细胞增殖,并在一定程度上诱导其自发凋亡,不同浓度survivin-siRNA转染能下调survivinmRNA和蛋白表达,靶向survivin基因的RNA干扰技术在喉癌的基因治疗中具有一定价值。     

免疫磁珠与荧光定量逆转录聚合酶链反应在胃癌患者外周血癌细胞检测中的应用价值

目的研究免疫磁珠和荧光定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测胃癌患者外周血癌细胞的应用价值。方法将不同浓度的人胃腺癌细胞系MGC803细胞加入到健康人血中,经淋巴细胞分离液收集单核细胞后,等分4份。其中1份直接用于提取RNA(方法Ⅰ)、其他分别用阴性磁珠(方法Ⅱ)、阳性磁珠(方法Ⅲ)及联用阴性和阳性磁珠(方法Ⅳ)富集癌细胞。然后,以癌胚抗原(CEA)mRNA作为分子标志物进行荧光定量RTPCR检测其相对拷贝数;并检测45例胃癌、30例胃溃疡患者和30名健康人外周血CEAmRNA。结果方法Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ测得的CEAmRNA相对拷贝数与癌细胞数间有良好的相关性(方法Ⅱ和ⅢP<005;方法ⅣP<001),尤以Ⅳ方法为佳,可检测出每毫升血中含有的1个胃癌细胞。Ⅰ～Ⅳ方法检测胃癌患者阳性率分别为4222%、5333%、5111%和6444%;方法Ⅳ与方法Ⅰ比较,差异有显著意义(P<005)。用方法Ⅳ检测30例胃溃疡患者均为阴性,而其他3种方法检出2例阳性;30名健康人中4种方法均未检出扩增产物。结论免疫磁珠与荧光定量RTPCR法可提高胃癌患者外周血CEAmRNA的检出率。     

特异性微小RNA抑制剂对胃癌细胞增殖的影响

目的： 探讨特异性微小RNA抑制剂对胃癌细胞增殖的影响。方法: 设计并合成4种微小RNA（miR-17、miR-21、miR-106a和miR-421）的2’-甲氧修饰的RNA寡核苷酸（微小RNA抑制剂）,用脂质体分别转染到SGC-7901和MGC-803胃癌细胞,然后用实时定量逆转录-聚合酶链反应技术检测微小RNA的表达情况,最后用MTT方法检测胃癌细胞的增殖情况。结果: 4种微小RNA抑制剂均有效抑制了SGC-7901和MGC-803细胞中相应微小RNA的表达;除miR-21抑制剂未见抑制胃癌细胞的增殖外,其它3种微小RNA抑制剂均以剂量依赖方式抑制胃癌细胞的增殖且对SGC-7901的效果优于MGC-803。结论: 微小RNA的特异性抑制剂能有效抑制胃癌细胞的增殖,采用这种技术为研究胃癌的发病机制提供了新方法。     

枸杞多糖对人肝癌细胞HepG2生长的影响及其分子机制

目的探讨枸杞多糖(Lycium barbarumpolysaccharides,LBP)对人肝癌细胞HepG2生长的影响及可能机制。方法人肝癌HepG2细胞用100~1 000 mg/L LBP处理1~5 d,分别用MTT方法、流式细胞术检测细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡。用Western blotting分析周期蛋白(cyclin)和周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependentkinase,CDK)表达的变化。结果 LBP以质量浓度依赖方式抑制肝癌细胞的生长,阻滞细胞在G0/G1期,并诱导细胞凋亡;其分子机制为引起cyclin Dc、yclin E和CDK2蛋白表达下降。结论 LBP抑制人肝癌细胞HepG2增殖的机制包括阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡。