转染p16与dll4阻滞白血病细胞株K562细胞周期

本研究探讨p16,dll4基因真核表达载体在白血病细胞中的表达和作用,设计并构建包含野生型p16cDNA,dll4cDNA的真核双表达载体pBudCE4.1-16-dll4,用脂质体法转染白血病细胞,用Western blot方法检测外源性p16及dll4的表达情况;通过CCK-8和流式细胞仪检测细胞的生长曲线和周期。结果表明:成功构建p16、dll4基因双表达真核载体,体外成功转染入白血病细胞。在白血病细胞检测到外源性P16、Dll4蛋白的表达。转染48小时后,试验组与对照组比较,细胞周期被阻滞(p0.001),细胞增殖下降(p0.001)。结论:重组质粒pBudCE4.1-16-dll4体外转染白血病细胞后,两个目的基因能够在细胞中同时表达,并诱发细胞周期阻滞于G0/G1期。     

小剂量重组改构人肿瘤坏死因子治疗恶性胸腔积液疗效评价

目的 评价恶性胸腔积液(MPE)患者胸腔灌注小剂量重组改构人肿瘤坏死因子(rmhTNF)的疗效及不良反应.方法 将72例病理确诊的恶性胸腔积液患者随机分成两组,观察组36例胸腔灌注小剂量rmhTNF,对照组36例胸腔灌注顺铂,观察两组胸腔积液控制程度、患者生存质量、不良反应.结果 观察组胸水控制25例(69.44％),对照组20例(55.56％),两者差异无统计学意义.观察组生存质量改善率63.89％,对照组改善率52.78％,两者差异无统计学意义(P＞0.05).观察组1～2级发热2例,1～2级胸痛3例,对照组1～3级胸痛3例,1～2级胃肠道反应6例,1～2级骨髓抑制4例,不良反应发生率两组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 小剂量rrnhTNF治疗恶性胸腔积液疗效与顺铂相当,不良反应少且轻,值得临床推广.     

硅酮支架与覆膜金属支架并发症的对比观察

目的对照观察硅酮支架与Z型不锈钢覆膜金属支架置入后的并发症,为临床支架的选择提供参考。方法 2014年4月至2015年2月因气道狭窄或气道瘘65例患者置入硅酮支架,77例患者置入覆膜金属支架,术后定期支气管镜检查,观察2个月内两组病例的主要并发症。结果硅酮支架组置入分叉型支架45例、沙漏状支架7例、直筒型支架13例;覆膜支架组置入分叉型支架70例、直筒型支架7例。两组并发症比较:痰液潴留硅酮支架50例(76.9%)、覆膜支架61例(79.2%),相差不显著(P0.05);肉芽增生硅酮支架39例(60.0%)、覆膜支架69例(89.6%),相差显著(P0.01);支架移位:分叉型及沙漏状支架均无移位,直筒型支架移位硅酮支架2例(15.3%)、覆膜支架6例(85.7%),相差显著(P0.01);顽固性咳嗽硅酮支架4例(6.1%)、覆膜支架7例(9.0%),相差不显著(P0.05)。因肉芽增生明显经处理效果差,9例覆膜支架取出支架,硅酮支架未因肉芽增生取出支架。结论硅酮支架与覆膜支架比较,硅酮致肉芽增生较轻,其直筒型移位较少,建议对需长期放置支架的患者,优先考虑硅酮支架。     

Notch在血液肿瘤细胞周期阻滞中的作用

细胞周期调控依赖多种调控蛋白协同作用以及生长因子等细胞外因素通过信号转导调控。这中间任一环节异常都可能引起细胞周期阻滞。p53、p21以及p16基因使细胞停滞在G1期的研究已相当透彻。Notch信号传递途径在胚胎发育和肿瘤血管发生中扮演重要的角色,尚有抑制Notch达到抑制肿瘤细胞增长的目的。新近研究发现,由配体刺激的Notch活化调节了急慢性髓细胞白血病细胞增长,Notch系统对白血病的治疗是一个很有前景的途径。     

液相共沉淀法制备吉西他滨磁靶向纳米粒

目的：采用液相共沉淀法制备吉西他滨磁靶向纳米粒,探索制备过程中的一些条件。方法观察不同搅拌速度、Fe3+/Fe2+比、pH、温度对四氧化三铁（Fe3O4）纳米粉的影响以及乳化水相/油相、超声时间、固化温度对磁靶向纳米粒的影响。结果制备Fe3O4纳米粉采用条件如下：800 r/min的搅拌速度、1.7∶1的Fe3+/Fe2+比、pH9、反应温度60℃,以及采用5∶40的水相/油相比、10 min的超声时间、100℃的固化温度。结论制备的Fe3O4纳米粉粒径小,纯度高,无团聚现象,制备的吉西他滨磁靶向纳米粒稳定性好。     

吉西他滨纳米磁靶向药囊对肺鳞癌细胞株A2裸鼠模型 Bcl-2表达的影响

目的：研究吉西他滨纳米磁靶向药囊对肺鳞癌 A2细胞体内移植瘤的抑制作用及对Bcl-2表达的影响。方法将植入肺鳞癌细胞株 A2细胞的裸鼠肺癌模型分为3组：模型组、化疗药物组和纳米磁靶向药囊组。观察并计算各组小鼠肿瘤生长情况,并通过 RT-PCR 和 Western blot 检测各组 Bcl-2的表达情况。结果纳米磁靶向药囊可以显著抑制肿瘤生长,抑瘤率为33%,并且显著下调Bcl-2的 mRNA 和蛋白表达水平,与模型组相比差异有统计学意义(P 值均<0.05)。结论纳米磁靶向药囊可以显著抑制肺鳞癌 A2移植瘤的生长,下调 Bcl-2的表达,诱导肿瘤细胞凋亡。     

转染p16、p53对白血病细胞株K562及HL-60的抑制作用

本研究构建p53,p16基因真核表达载体,用脂质体法转染入白血病细胞,观察其在白血病细胞中的表达和对白血病细胞的作用。设计并构建包含野生型p53cDNA与p16cDNA的真核双表达载体pBudCE4.1-53-16,用脂质体法转染白血病细胞,用间接免疫细胞化学法、Western blot法检测鉴定外源性p53及p16的表达情况。通过CCK-8,流式细胞仪检测细胞的生长曲线、细胞周期、细胞凋亡。结果发现:p53p16基因双表达真核载体构建成功,体外转染入白血病细胞后能检测到外源性P53、P16蛋白在白血病细胞中表达。转染48小时后,试验组与对照组比较,细胞周期阻滞(p0.001);试验组和对照组比较,细胞增殖下降,细胞凋亡增加(p0.001)。结论:重组质粒pBudCE4.1-53-16构建成功,经体外转染白细胞细胞后2个目的基因能够在细胞中同时表达,并引起细胞周期阻滞于G0期,细胞凋亡增加。