骨髓间充质干细胞经肾动脉移植对阿霉素慢性肾病大鼠肾脏炎症的影响

【摘要】 目的 分析经肾动脉移植骨髓间充质干细胞（BMSC）对慢性肾病（CKD）大鼠肾脏炎症的影响。方法 取37只雄性Sprague- Dawley（SD）大鼠,其中2只4周龄用作体外分离BMSC,8只为正常对照组（N组）,27只制作CKD模型。建模中3只死亡,24只建模成功后,随机分为CKD组（n=8）、经肾动脉移植BMSC组（A组,n=8）和经尾静脉移植BMSC组（V组, n=8）。BMSC移植后7、14 d,检测各组大鼠肾功能指标,制作肾脏病理切片,苏木精- 伊红（HE）染色观察肾脏病理形态学变化,免疫组化染色分析肾组织炎性细胞表达。结果 CKD组、A组、V组与N组相比,BMSC移植后血肌酐、血尿素氮和24 h尿蛋白均显著升高（P＜0.01）。移植后7、14 d,V组、A组血肌酐均较CKD组降低（P＜0.01）,A组在7 d时下降更为显著（P＜0.01）;移植后7 d,V组、A组血尿素氮较CKD组均显著下降（P＜0.01）,A组变化更为显著（P＜0.01）,移植后14 d,V组、A组较CKD组稍降低,A组变化更为显著（P＜0.01）;移植后7、14 d,V组、A组24 h尿蛋白较CKD组均显著降低（P＜0.01）,A组下降更为显著（P＜0.01）。HE染色病理结果显示A组、V组炎性浸润均较CKD组减轻,A组仅有少量肾间质炎性细胞浸润,萎缩肾小球数目减少,肾小管扩张情况有不同程度改善。免疫组化结果显示CKD组大鼠CD3、CD20呈强阳性或阳性表达,A组、V组大鼠肾间质CD3、CD20表达较CKD组减轻,但A组较V组减轻更为明显。 结论 BMSC通过抑制免疫介导性炎症修复受损肾脏组织。经肾动脉移植效果优于经尾静脉移植。     

间充质干细胞治疗肾纤维化的现状与展望

肾纤维化（renal fibrosis,RF）是慢性肾病进展为终末期肾病的重要途径。目前实验发现,多种因素可导致RF。干细胞是一类具有自我复制和多向分化潜能的原始未分化细胞。细胞治疗越来越普遍,间充质干细胞（mesenchymal stem cell,MSC）成为治疗RF的一种有前途的细胞类型。MSC具有多种分化能力,可释放多种因子调节炎症和免疫反应。本文综述了影响RF发生的相关机制及MSC治疗RF的应用现状,并对现存问题及前景进行展望。     

两种造模方法致大鼠慢性肾病模型的肾功能及病理变化比较

目的 探究两种造模方法对大鼠慢性肾病模型的肾功能影响及病理改变。方法 采用单侧肾切除+尾静脉重复注射阿霉素(ADR)法(A组)和二次尾静脉注射ADR法(B组)测定各组大鼠肾功能(血尿素氮、血肌酐)、血清白蛋白。光镜下观察各组大鼠肾脏的病理变化,并分别与正常对照组(N组)进行比较。结果 在4、8、12周末,A、B组血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)值均有显著上升(P<0.05),白蛋白降低(P<0.05),表现为低蛋白血症,部分大鼠合并腹腔积液。光镜下,A、B两组肾小球均有不同程度萎缩、硬化,肾小管受损不均,肾间质均出现炎性改变。单侧肾切除+重复尾静脉注射ADR诱导的肾脏损伤更为严重。结论 单侧肾切除+重复尾静脉注射ADR诱导的慢性肾病模型与二次尾静脉注射ADR法,均可使大鼠成模,两种方法比较,单侧肾切除+重复尾静脉注射ADR诱导的病理改变相对较为典型。     

肾动脉移植骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠肾纤维化的影响

【摘要】 目的 分析经肾动脉移植骨髓间充质干细胞（BMSC）对阿霉素慢性肾脏病（CKD）大鼠的治疗作用,评估不同移植方式对肾脏纤维化的影响。方法 实验动物为50只雄性Sprague-Dawley大鼠,其中2只4周龄大鼠用于体外分离培养BMSC;36只16周龄大鼠经尾静脉注射阿霉素构建CKD动物模型,造模成功后随机分为模型组（CKD组）、经尾静脉移植BMSC组（V-M组）和经肾动脉移植BMSC组（A-M组）,每组各12只;12只健康大鼠作为正常对照组（N组）,经尾静脉输注等量0.9%氯化钠溶液。移植BMSC后第7、14天检测各组大鼠血肌酐、血尿素氮、24 h尿蛋白水平;制作肾脏病理切片行HE染色观察肾脏结构病理改变,Masson三色染色评估肾脏纤维化程度。结果 CKD组、V-M组、A-M组在各观察点血肌酐、血尿素氮、24 h尿蛋白水平均显著高于N组（P＜0.01）。移植后第7天,V-M组、A-M组24 h尿蛋白水平均低于CKD组（P＜0.05）,且A-M组低于V-M组（P＜0.05）;A-M组血肌酐、血尿素氮显著低于CKD组（P＜0.01）。移植后第14天,V-M组、A-M组24 h尿蛋白水平均低于CKD组,但差异无统计学意义（P＞0.05）;A-M组血肌酐、血尿素氮均低于V-M组、CKD组（P＜0.05）。CKD组、V-M组、A-M组肾组织HE染色呈慢性肾病改变,Masson三色染色示肾间质及肾小囊周围不同程度纤维化,但A-M组纤维化程度较V-M组、CKD组有所改善。结论 经肾动脉移植BMSC可抑制或延缓CKD大鼠肾脏纤维化,并发挥积极的治疗作用。     

不同途径移植骨髓间充质干细胞对慢性肾病大鼠 肾脏纤维化的影响

目的 观察不同途径移植骨髓间充质干细胞（BMSCs）对慢性肾病（CKD）大鼠的治疗效果及寡聚化结构域 样受体蛋白（NLRP）3 炎症小体对肾间质纤维化的影响。方法 雄性 SD 大鼠 50 只,其中 2 只用于体外分离培养 BMSCs;36只大鼠CKD造模（左肾切除+多次尾静脉注射阿霉素）成功后随机分为模型（CKD）组、肾动脉移植BMSCs （A-M）组、尾静脉移植BMSCs（V-M）组;另设假手术（SHAM）组,每组12只,尾静脉输注等量生理盐水。移植BMSCs 后第7、14天检测血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白水平;HE染色、Masson三色染色观察肾脏病理结构改变及纤维化情况, 免疫组化染色观察核苷酸结合NLRP3、凋亡相关微粒蛋白（ASC）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-1表达情况。 结果 与 SHAM 组相比,CKD 组、A-M 组、V-M 组 7 d、14 d 血肌酐、尿素氮、24 h 尿蛋白均显著升高（P＜0.05）。 BMSCs移植7 d、14 d后,A-M组、V-M组与CKD组比较血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白降低,且A-M组低于V-M组（P＜ 0.05）。HE染色、Masson染色结果示,A-M组、V-M组较CKD组炎性浸润减轻,萎缩肾小球数量减少,肾小管扩张情 况有所改善,纤维化程度减轻,A-M组改善程度优于V-M组。免疫组化结果示,A-M组、V-M组较CKD组大鼠肾间 质NLRP3、ASC、Caspase-1阳性表达减少,A-M组减少程度大于V-M组。结论 BMSCs可改善CKD大鼠肾脏纤维 化,动脉途径移植优于静脉途径,其机制可能与抑制NLRP3炎症小体活化有关。     

MTHFR C677T基因多态性与颈动脉狭窄及其侧支循环形成的关系

目的 研究MTHFR C677T基因多态性与颈动脉狭窄及其侧支循环形成的关系.方法 收集2018年10月至2021年3月昆明医科大学第二附属医院脑血管病科通过DSA诊断颈动脉中重度狭窄或慢性闭塞的患者65例,无明显颈动脉狭窄的对照组45例.所有患者完成一般情况评估.颈动脉中重度狭窄或慢性闭塞的65例患者DSA ASIT...     

不同剂量骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠肾纤维化形成的影响

【摘要】 目的 探讨不同剂量骨髓间充质干细胞（BMSC）对阿霉素慢性肾病大鼠肾纤维化形成的影响及其作用机制。方法 SD大鼠尾静脉注射阿霉素造模,首次剂量3 mg/kg,2周后相同剂量再次注射。造模成功后将大鼠随机分为M组（模型组,肾动脉注射磷酸缓冲液）,A组、B组、C组（肾动脉分别移植1×106个/mL、2×106个/mL、3×106个/mL BMSC,细胞悬液均为0.5 mL）,每组各9只。另取9只正常大鼠作为对照组（N组,尾静脉输注等量0.9%氯化钠溶液）。术后第4周测定各组大鼠体重,Masson染色评估肾纤维化程度,过碘酸六胺银（PASM）染色观察肾小球和肾小管基膜改变,免疫组化染色分析转化生长因子（TGF）-β1、纤维连接蛋白（FN）表达。结果 BMSC移植4周后,A、B、C组大鼠一般情况均较M组改善,体重改变最明显,体重增长变化为C组＞B组＞A组,但C组与B组差异无统计学意义（P＞0.05）。Masson染色显示M组表现为典型的肾小球和肾小管纤维化改变,肾组织大面积蓝染,A、B、C组虽也有不同程度肾纤维化改变,但程度和范围均较M组减少（P＜0.05）。PASM染色显示M组肾小球和肾小管基膜明显增厚,A、B、C组肾小球和肾小管基膜增厚程度下降（P＜0.05）。免疫组化染色显示A、B、C组肾组织不同部位TGF-β1、FN表达与M组比较均下降,尤其是C组下降最明显,仅在部分肾小球和肾小管上皮细胞见少量弱阳性表达。结论 BMSC移植治疗可延缓阿霉素慢性肾病大鼠早期肾纤维化形成,且该作用随细胞移植数量增加而增强。其机制可能是通过下调TGF-β1表达抑制细胞外基质过度沉积实现的。