硫芥所致犬血淋巴细胞DNA损伤的图像分析与评价

目的　利用图像分析系统对硫芥引起的犬外周血淋巴细胞DNA损伤进行分析和评价。方法分离比格犬外周血淋巴细胞 ,设阴性对照、阳性对照(10 0 μmol·L- 1H2 O2 )、溶剂对照 (3.5 %丙二醇 )、硫芥中毒 (1,10 ,10 0和 10 0 0 μmol·L- 1)共 7组 ,在37℃作用 1h ,应用单细胞凝胶电泳 (SCGE)及其图像分析系统进行淋巴细胞DNA损伤的图像分析 ,所用参数为彗星长、尾长、尾部DNA百分含量、Olive尾矩和尾长 /头长。结果　硫芥引起的淋巴细胞DNA损伤呈现出明显的剂量效应关系 ,其中彗星长、尾长和尾部DNA百分含量从 10 μmol·L- 1硫芥中毒组开始即显著高于溶剂对照组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,Olive尾矩和尾长 /头长从 10 0 μmol·L- 1硫芥中毒组开始非常显著地高于溶剂对照组(P <0 .0 1)。结论　SCGE图像分析系统可较好地用于犬外周血淋巴细胞DNA损伤的分析和评价。     

彗星试验目测与图像分析结果的比较

目的　探讨彗星试验目测与图像分析结果的比较。方法　分离人外周血淋巴细胞 ,设 16 40培养液、H2 O2 和 1,2 丙二醇分别为阴性、阳性和溶剂对照组 ,硫芥为受试物 ,37℃水浴 1h ,清洗后单细胞凝胶电泳 ,用目测微尺和图像分析系统观察分析硫芥对人血淋巴细胞细胞DNA损伤的程度。结果　彗星试验检测 12 .5～ 2 0 0 μmol·L- 1H2 O2 和 1,10 ,10 0和 10 0 0 μmol·L- 1硫芥对人外周血淋巴细胞DNA损伤 ,目测 (迁移率和迁移度 )观察和计算机图像分析(彗星长、尾长、Olive尾矩、尾DNA %和尾 /头 (长 ) 5项参数 )的结果基本一致 ,DNA损伤的程度呈现浓度 效应关系。各项观察指标和参数检出DNA损伤(P <0 .0 5或P <0 .0 1)的浓度不尽一致。目测迁移率检测H2 O2 诱导的DNA损伤最低作用浓度为 12 .5μmol·L- 1,比迁移度 2 5 μmol·L- 1的检出浓度敏感。计算机图像分析中尾DNA %参数能显示 1μmol·L- 1硫芥和 12 .5 μmol·L- 1H2 O2 诱导的DNA损伤 ,其敏感程度为各项指标和参数之首 ;参数Olive尾矩对H2 O2 和硫芥诱导的DNA损伤的最低作用浓度分别是 5 0和 10 0 μmol·L- 1,为不敏感参数。溶剂 1%～4 %丙二醇各组与阴性对照相比 ,无显著性差异(P >0 .0 5 )。结论　①彗星试验检测硫芥对人外周血淋巴细胞DNA损?     

基于兔骨质疏松模型的骨质疏松症进展中骨髓代谢组学变化

目的：探讨兔骨质疏松症（osteoporosis,OP）发生过程中骨髓代谢的变化特点。方法：通过兔双侧卵巢切除术（ovariectomy,OVX）制作兔OP模型模拟绝经期妇女的OP过程。双能X线吸收测量法测量骨密度（bone mineraldensity,BMD）的变化。通过活体磁共振氢质子波谱（proton magnetic resonance spectroscopy,1H?MRS）和离体液相色谱结合质谱（LC?MS/MS）分析等多种方法对骨髓进行代谢组学分析。OVX组和假手术组（Sham组）的取样分析节点均分别设定在术前、术后2个月和术后5个月。结果：随着时间的发展,术后5个月OVX组的BMD值较Sham组明显减低（2个月,P＜0.05;5个月,P＜0.01）。1H?MRS扫描分析表明,与Sham组相比,OVX组骨髓中的乳酸和脂类含量在术后2个月和5个月时均明显增加。OVX组骨髓中的胆碱、肌酸、谷氨酰胺、羟脯氨酸却较Sham组减少。在术后2个月时,进行离体骨髓代谢组学分析,也得到了上述相似的骨髓代谢变化结果。此外,1H?MRS扫描分析发现,OVX组的氨基酸、酰基肉碱、核苷酸和神经酰胺发生了显著变化。相关分析发现,BMD值与乳酸值之间呈明显负相关（r=-0.842,P < 0.01）,BMD与胆碱、肌酸、谷氨酰胺和羟脯氨酸呈显著正相关。结论：本研究发现随着OP进展,骨髓代谢会发生一系列复杂变化。利用1H?MRS对活体进行骨代谢变化扫描分析可能是评价OP的一种潜在无创方法。     

芹菜素对A375黑色素瘤生长、迁移和血管生成的影响及其作用机制

目的  探讨芹菜素对A375黑色素瘤增殖、迁移和血管生成的影响及其作用机制。方法  采用四唑氮化合物（MTS）法检测芹菜素对人黑色素瘤A375细胞增殖的影响;裸鼠皮下移植瘤模型考察芹菜素对体内黑色素瘤生长的影响;划痕实验检测芹菜素对细胞体外迁移的影响;小管形成实验检测芹菜素对人黑色素瘤血管生成的影响;Western blot检测芹菜素对A375细胞中调控增殖及血管生成相关蛋白表达的影响,如血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、磷酸化P38（p-P38）、总蛋白P38（t-P38）、磷酸化Erk（p-Erk）、总蛋白Erk（t-Erk）。结果  体外芹菜素处理A375细胞后,肿瘤细胞的体外增殖及体内生长较空白对照组明显受抑制;肿瘤细胞的迁移能力较溶剂对照组明显减弱;小管形成实验中,芹菜素能够抑制肿瘤细胞诱导的血管生成;分子机制研究发现,芹菜素能抑制血管生成相关蛋白VEGF及MMP-9的表达,同时芹菜素也能抑制调控肿瘤细胞增殖相关蛋白,如p-P38及p-Erk的表达。结论  芹菜素能抑制A375黑色素瘤生长、迁移及血管生成,其机制可能与抑制调控肿瘤细胞增殖及血管生成相关蛋白的表达有关。

     

使用不同疗程抗菌药物对肝切除术后患者医院感染的影响研究

目的分析不同疗程抗菌药物对肝切除术后患者医院感染的影响。方法选取2015年1月-2016年12月医院收治的128例原发性肝癌行肝切除术患者作为临床研究对象,分为研究组65例和对照组63例,对照组患者术前1h和术后6h给予抗菌药物治疗,而研究组患者则采用术前1h和术后2次/d,连续治疗3d的抗菌药物治疗方案,并分别对两组患者的肝切除术情况,术后感染发生情况,术后身体状况予以比较分析。结果研究组患者术中出血量(312.43±27.86)ml,肝门阻断时间(23.89±3.27)min,手术时间(97.27±10.15)min,腹腔双套管时间(65.68±7.29)h,胃管留置时间(21.35±3.46)h,尿管留置时间(71.96±8.82)h,术后下床活动时间(73.12±8.57)h等指标与对照组相比,差异无统计学意义;研究组患者术后感染率为4.61%(3/65),拆线天数(10.28±1.47)d,体温(37.16±4.35)℃,总胆红素(15.09±2.63)μmol/L,白细胞(8.45±1.36)×109/L,中性粒细胞(72.10±8.03)%等与对照组相比,差异无统计学意义。结论在肝切除术后采用短疗程抗菌药物治疗能够获得与长疗程抗菌药物治疗相当的感染预防效果,且未对手术及术后身体状况造成影响。     

汉化版执行功能表现测试的信效度研究

目的 评价执行功能表现测试（EFPT）在我国文化背景下的适用性以及其临床使用价值。 方法 将获得性脑损伤患者46例设为患者组,健康自愿者49例设为正常组。2组受试者均接受EFPT、神经心理学测试（Flanker任务、颜色形状转换任务、言语及视空间2-Back和威斯康辛卡片分类测试（WCST）以及工具性日常生活活动能力量表（IADL）检查,并于入组四周后随机抽取30例正常人再次进行EFPT评估。将本研究结果中所得数据采用Spearman相关分析进行信度和效度分析,其中人口资料学（性别、年龄和受教育年限）以及执行功能相关测试的组间差异分析采用两独立样本的非参数符号秩和检验。 结果 ①信度——通过对EFPT的各定量指标进行同质性信度及重复信度检验,发现EFPT具有良好的同质性信度（Cronbach′s α系数为0.73~0.83）和较高的重复信度,组内相关系数（ICCs）范围为0.50~0.85。②效标效度——EFPT与神经心理学测试各指标的相关分析发现,EFPT与WCST中的总应答数、完成分类数、持续性应答数、非持续性错误数及概括水平百分数的相关系数绝对值范围为0.29～0.57,具有显著相关性（P<0.05）。③生态效度——EFPT与IADL相关分析发现,EFPT中除外服药得分与IADL无相关性外,其他分测验及EFPT总分与IADL的相关系数绝对值范围为0.37～0.68,具有显著相关性（P<0.05）。④区分效度——通过两独立样本的非参数秩和检验发现,在EFPT总分、各分测验得分以及测试时间指标上,获得性脑损伤组均显著高于性别、年龄、受教育年限匹配的正常组（Z=-3.62～-8.32,P<0.05）。 结论 汉化版的EFPT在获得性脑损伤患者中具有良好的信效度,且具有良好的临床使用价值,能够反映获得性脑损伤患者与日常生活功能相关的执行功能障碍情况。     

HPLC测定葶苈降血脂胶囊中熊果酸的含量

目的 建立高效液相色谱法测定葶苈降血脂胶囊中熊果酸的含量.方法 采用Diamonsil ODS色谱柱;流动相为乙腈-甲醇-水(65∶10∶25,每100 mL加乙酸铵0.5 g);检测波长为220 nm.结果 熊果酸进样量在1.592～7.960 μg内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 9);平均加样回收率为99.80%(RSD=1.89%,n=6).结论 方法简便、准确,可作为该制剂的质量控制方法.     

单细胞凝胶电泳技术在军事毒理学中的应用

由Ｏｓｔｌｉｎｇ和Ｊｏｎｈａｎｓｏｎ首先提出,后又经Ｓｉｎｇｈ和Ｏｌｉｖｅ建立和改进的单细胞凝胶电泳（ＳｉｎｇｌｅＣｅｌｌＧｅｌＥｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ,简称ＳＣＧＥ）技术,因其细胞电泳形状颇似慧星,又称慧星试验（ＣｏｍｅｔＡｓｓａｙ）。它是一种测定和研究单个细胞ＤＮＡ链断裂的新电泳技术,与传统方法相比,其简便、快速、灵敏、样品量少、无需放射性标记,具有极高的实用价值。该技术可用于体内、体外各种实验,目前已广泛地应用于各种有核细胞经受试物诱导的ＤＮＡ损伤和修复的研究。在国外,ＳＣＧＥ被用于…